人抗菌肽LL-37的原核表达及其抗小鼠深Ⅱ度烫伤MRSA感染活性的初步研究

发布时间：2025-03-18 23:27

　　LL-37是人体内发现的抗菌肽Cathelicidin家族的唯一成员，由37个氨基酸残基组成，因其N端前两个氨基酸残基为亮氨酸（L）而得名。LL-37抗菌谱广，体外研究显示对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌、病毒均发挥抑制作用，特别是对部分临床耐药菌及临床易感菌株也有较强的抑菌活性，因此有很好的应用前景。本文采用原核表达系统实现小分子抗菌多肽LL-37的可溶表达，并研究其在皮肤创伤感染中发挥的活性作用。本课题将LL-37连接入pET32a载体中进行可溶表达，通过考察表达诱导因素获得高产量的LL-37，体外实验验证其抗菌活性，最后研究LL-37对于小鼠深Ⅱ度烫伤创面耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）感染的预防治疗作用，并从抗细菌生物膜方面探讨其作用机制。 研究目的： 本文主要是采用pET32a表达载体实现LL-37的可溶表达，同时还探讨了LL-37对于小鼠深Ⅱ度烫伤耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）创伤感染模型的预防治疗作用，并对其机制进行初步研究，为小分子抗菌肽的基因工程表达提供参考，也为LL-37的深入研究和开发应用提供实验依据。 研究方法： 1.融合蛋白Trx-L...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.1Cathelicins家族结构示意图

2图1.1Cathelicins家族结构示意图Fig.1.1Schematicrepresentationofthecathelicidinfamily

图1.2LL-37杀菌模式示意图

图1.2LL-37杀菌模式示意图ig.1.2SchematicrepresentationofLL-37bactericidalmod-37作为Cathelicidin家族唯一一个人源抗菌肽，修复中发挥了重要作用，受到越来越多学者的关

图2.2融合蛋白Trx-LL-37疏水性分析

（3）疏水性预测结果用ProtScaleServer进行亲水性/疏水性分析，正值越大表示越疏水，负值越大表示越亲水，而介于+0.5到-0.5之间为两性氨基酸。结果（图2.2）显示，多肽链第146位的Met亲水性最强（-2.467），第26位的Val疏水性最强（1....

图2.3目的基因LL-37的PCR扩增M：DNA分子量标准DL2000；1：PCR扩增产物

图2.3目的基因LL-37的PCR扩增A分子量标准DL2000；1：PCR扩Fig2.3PCRamplificationofLL-37:DNAMarkerDL2000;1:PCRpro-LL-37的鉴定化成功的单克隆菌落作为模板与预期的....

本文编号：4036340