IL-10在骨髓间充质干细胞移植治疗急性肝功能衰竭过程中的作用研究

发布时间：2017-07-06 04:11

  本文关键词：IL-10在骨髓间充质干细胞移植治疗急性肝功能衰竭过程中的作用研究

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【摘要】：目的：明确骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSC)通过分泌细胞因子来调节急性肝功能衰竭(Acute liver failure, ALF)体内的炎症微环境,并明确白介素-10(Interleukin-10, IL-10)在MSC移植治疗ALF过程中的关键作用。方法：本实验分为两部分,第一部分通过研究MSC以及MSC条件培养基移植对ALF体内炎症反应的抑制作用来明确MSC通过分泌细胞因子调节ALF体内炎症微环境,实验分为正常组、肝衰竭组以及治疗组,观察各组大鼠临床表现、生存率、肝功能指标、血清炎症因子水平、肝脏组织病理学情况。实验第二部分首先通过蛋白芯片检测MSC条件培养基筛选其中有效因子,然后通过IL-10抗体以及直接注射重组大鼠IL-10 (Recombinant Rat Interleukin-10, rm IL-10)来明确IL-10在MSC移植治疗ALF过程中的关键作用,实验分为肝衰竭组、治疗组以及对照组,观察各组大鼠临床表现、生存率、肝功能指标、血清炎症因子水平、肝脏组织病理学情况。结果：实验第一部分,MSC组大鼠较肝衰竭组,生存率有所升高(P0.05),血清AST、 ALT、TBIL显著降低(P0.05),促炎因子有所降低,抗炎因子升高(P0.05),肝组织损伤有所减轻,细胞增殖数量明显增多,凋亡数量明显减少(P0.05)；MSC-CM组与对照组相比,生存率升高(P0.05),血清AST、ALT、TBIL有所降低(P0.05),血清促炎因子有所降低,而抗炎因子升高(P0.05),组织病理学方面,MSC-CM组有所好转,细胞增殖数量明显增多,凋亡数量明显减少(P0.05)。实验第二部分,蛋白芯片检测显示MSC-CM中IL-10含量显著升高(P0.05)；MSC+anti-IL-10组与MSC组相比,生存率降低(P0.05),肝功能较有明显上升(P0.05),血清促炎因子上升,抗炎因子降低(P0.05),肝组织病理学情况明显加重,增殖数量明显减少,凋亡数量明显增多(P0.05)；rm IL-10组与其他两组相比,生存率升高明显(P0.05),血清AST、ALT、TBIL有明显下降(P0.05),血清促炎因子明显降低(P0.05),病理组织学情况明显好转,细胞增殖数量较其余两组明显增多,凋亡数量明显减少(P0.05)。结论：MSC能够有效缓解大鼠急性肝功能衰竭的症状,改善肝功能,提高生存率。MSC是通过旁分泌的方式分泌细胞因子调节肝脏炎症微环境,其中MSC分泌的IL-10起主要作用,使用rmIL-10直接注射治疗效果明显,有效降低肝衰竭大鼠肝功能,降低促炎因子的产生,有效缓解肝组织病理损伤,减少肝脏局部炎症细胞聚集,并且促进了ALF后肝损伤的再生、修复。
【关键词】：干细胞移植 白介素-10 间充质干细胞 炎症环境 动物模型 急性肝功能衰竭
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R575.3
【目录】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-12
• 第一部分 理论研究12-22
• 1. 急性肝功能衰竭的西医现状与进展12-17
• 1.1 定义12-13
• 1.2 病因和发病机制13-14
• 1.3 临床表现及诊断14
• 1.4 治疗14-17
• 2. 中医学对急性肝功能衰竭的认识17-22
• 2.1 病名17
• 2.2 病因病机17
• 2.3 辩证分型17-18
• 2.4 中医药治疗18-19
• 2.5 中医药对炎症的干预19-22
• 第二部分 实验研究22-72
• 一、骨髓间充质干细胞移植对急性肝功能衰竭炎症微环境的抑制作用22-47
• 1. MSC对急性肝功能衰竭体内炎症反应抑制作用的研究22-37
• 2. MSC条件培养基对急性肝功能衰竭体内炎症反应抑制作用的研究37-47
• 二、IL-10在MSC移植治疗ALF中的作用研究47-72
• 1. 蛋白芯片检测MSC条件培养基中的细胞因子水平47-51
• 2. 体内实验验证MSC通过分泌IL-10抑制炎症因子的作用51-61
• 3. 验证重组小鼠IL-10对急性肝功能衰竭的治疗作用61-72
• 全文总结72-73
• 参考文献73-80
• 附录80-81
• 攻读硕士学位期间取得的学术成果81-82
• 致谢82

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李梦东,聂青和;糖皮质激素治疗重型肝炎的临床及实验研究[J];实用肝脏病杂志;2005年01期

2 中华医学会感染病学分会肝衰竭与人工肝学组;中华医学会肝病学分会重型肝病与人工肝学组;;肝衰竭诊治指南(2012年版)[J];实用肝脏病杂志;2013年03期

3 刘志斌;;竹花重肝煎治疗重型肝炎高黄疸60例[J];湖北中医杂志;2008年05期

4 毛德文;;肝衰竭毒邪病因学说辨析[J];中医药导报;2007年01期

5 陈倩倩;万军;阎丽;王卫华;王昌正;石卉;苏斌斌;曾庆环;杜海涛;;绿色荧光蛋白小鼠骨髓间充质干细胞培养及其示踪的可行性[J];军医进修学院学报;2012年05期

6 张涛;孙克伟;;中医治疗乙型肝炎相关性肝衰竭的经验与进展[J];临床肝胆病杂志;2012年03期

7 毛德文;龙富立;邱华;黄古叶;韦新;王丽;;大黄赤芍在肝衰竭治疗中的应用[J];辽宁中医杂志;2008年10期

8 龙富立;邱华;张荣臻;陈月桥;石清兰;;毛德文论治肝性脑病的经验总结[J];辽宁中医杂志;2009年08期

9 邱华;毛德文;胡振斌;韦新;;重型肝炎中医证型相关文献统计分析[J];辽宁中医药大学学报;2008年04期

10 马文校;文小敏;刁建新;刘亚伟;华何与;杨运高;;肝衰竭中医药治疗的近现代新认识[J];辽宁中医杂志;2014年11期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 魏庆生;张_g;;论中医对炎症性疾病的动态分析及辨治规律[A];中华医学会急诊医学分会第17次全国急诊医学学术年会论文集[C];2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 高加林;大黄提取物联合骨髓间充质干细胞移植治疗急性肝功能衰竭的实验研究[D];南京中医药大学;2014年

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本文编号：524689