复方苦参对内毒素致兔急性呼吸窘迫综合征保护作用机制的研究

发布时间：2017-07-16 19:17

  本文关键词：复方苦参对内毒素致兔急性呼吸窘迫综合征保护作用机制的研究

  更多相关文章： 急性呼吸窘迫综合征 内毒素 免疫组化 苦参素

【摘要】：目的：急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是威胁人类健康的严重危重症之一，其发病机理至今尚未阐明，病死率极高，为临床亟待解决的一个主要课题。本实验以大肠杆菌内毒素（其主要致病成分为脂多糖LPS）复制兔ARDS模型，通过观察模型动物病理生理及病理变化，探讨内毒素（ET）致伤机理及复方苦参的保护性作用，旨在为临床提供理论参考。 方法：随机将21只新西兰白兔分为3组：对照组(A组)、致伤组(B组)和治疗组(C组)，每组7只。实验前12h禁食、禁水，25%乌拉坦（4ml/kg）腹腔麻醉，分离左侧颈动脉，检测生命体征和采集血液标本，建立耳缘静脉通道用于给药。A组静脉注射生理盐水（4ml/kg），B、C两组经静脉一次性注射LPS720ug/kg体重复制兔的ARDS模型，C组同时静脉注射复方苦参注射液（4ml/kg）进行干预治疗。具体检测指标如下： 1.0h、0.5h、1h、2h、4h点记录血压、呼吸等生命体征； 2.0h、0.5h、1h、2h、4h点测量动脉血气； 3.测定肺组织湿干重比; 4.光镜下观察各组动物肺组织病理学改变； 5.免疫组化方法测定各组动物肺组织髓样细胞触发性受体1（TREM-1）、髓过氧化物酶（MPO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、细胞间粘附因子-1（ICAM-1）、水通道蛋白-1（AQP-1）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达。 结果： 1.A组在实验过程中各项实验指标相对平稳，三组间在实验前各项实验指标无统计学差异。 2.生命体征测定： (1)呼吸：静注LPS后，B组动物出现呼吸急促，最快频率约78次/分，0.5h变化最为显著，之后呼吸频率逐渐下降；C组亦出现先快后慢的变化趋势。 (2)血压：A组动物在整个实验中血压维持在93mHg以上；B组在给LPS后0.5h，血压明显下降，明显低于A组(P0.01)；C组实验后血压亦呈下降趋势，其各时点显著低于A组但明显高于B组。 (3)血气分析：A组动物血气分析值均在正常范围，静注LPS后，B组兔血PaO2及Pa02/Fi02显著降低，0.5h为最低点，分别为55.23mmHg和258.7mmHg，符合ARDS诊断标准，之后随着时间延长逐渐恢复。C组兔Pa02/Fi02值在0.5h点虽然有所下降，与A组比较有差异(P0.05)，但未达到ARDS诊断标准，仍部分高于B组(P0.01)。PaCO2在B组和C组均有下降。 3.实验4h后，B组肺组织湿/干比显著高于A组(P0.01)，，C组明显高于A组(P0.01)但低于B组(P0.05)； 4.肺组织光镜下病理学检查：A组肺泡结构基本正常，肺泡腔内无明显出血、渗出等；B组可见肺泡间隔增厚、充血、肺水肿表现，肺泡腔变小，其内可见红染物质渗出及散在蔟集的中性粒细胞粘壁、扣押，可见小灶性肺不张；C组肺泡间隔轻度增厚，肺泡腔较B组增大，炎细胞浸润减少，肺泡淤血水肿减轻，肺损伤轻于内毒素组。 5.免疫组化方法测定TREM-1表达结果：A组中未见明显TREM-1表达；B组肺泡间隔、中性粒细胞可见大量深棕色颗粒；C组肺泡间隔、中性粒细胞可见深棕色颗粒较致伤组明显减少。 6.免疫组化方法测定MPO表达结果：A组肺组织中MPO几乎无表达；B组致伤组的阳性表达产物为棕黄色，多分布在肺泡壁、肺泡间隔及中性粒细胞的细胞膜中，C组中棕黄色产物减少。 7.免疫组化方法测定TNF-α表达结果：A组肺泡腔内可见少许淡黄色片状或颗粒状产物轻度表达；致伤组阳性产物呈棕黄色或深棕色，多分布在肺组织的中性粒细胞、巨噬细胞的细胞质中。C组阳性表达产物较B组减轻。 8.免疫组化方法测定ICAM-1表达的结果：A组正常肺组织中无明显ICAM-1表达；B组致伤组ICAM-1明显表达,肺泡间隔、血管内皮细胞胞浆中均可见大量深棕色颗粒；C组可见数量不等的棕黄色颗粒，但数量较致伤组明显减少。 9.免疫组化方法测定AQP-1表达结果：A组肺组织中无AQP-1表达；B组阳性产物呈棕黄色，主要在肺泡间隔及肺泡上皮细胞的胞浆中表达，C组肺泡腔中可见少许炎性细胞浸润，棕黄色表达产物减少，AQP-1表达减弱。 10.免疫组化方法测定VEGF表达结果：A组肺组织中的VEGF水平处于低表达状态；而B组肺组织中表达明显，表达产物呈棕黄色，多分布于血管内皮细胞、肺泡上皮细胞的胞膜或胞浆中；C组肺泡间隔增厚减轻，棕黄色表达产物减少，VEGF表达减弱。 结果判定:不着色为阴性,淡黄色为弱阳性(+),深棕色为强阳性(+++),中度阳性介于弱阳性与强阳性之间(++)。 结论: 1.一次性静脉注射LPS(720ug/kg)可以建立兔ARDS动物模型。 2. ARDS时炎症反应失控，促炎反应和抗炎反应平衡失调。 3.内毒素致伤组肺组织出现内皮细胞肿胀、炎性细胞浸润、微循环障碍等一系列病理生理变化。 4.免疫组化方法测定TREM-1、MPO、TNF-α、ICAM-1、AQP-1、VEGF各项指标在LPS致伤组均有明显表达，在复方苦参注射液保护组表达较前减弱。 5.复方苦参具有抗炎、抗应激、提高免疫力作用，对血管内皮细胞的黏附具有抑制作用，通过降低内皮细胞的通透性，维护内皮细胞的完整性，对受损肺组织起一定的保护作用。
【关键词】：急性呼吸窘迫综合征 内毒素 免疫组化 苦参素
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R563.8
【目录】：

• 中文摘要5-8
• Abstract8-12
• 前言12-15
• 材料和方法15-19
• 结果19-33
• 讨论33-42
• 全文总结42-43
• 参考文献43-48
• 综述48-58
• 参考文献54-58
• 英文缩写58-59
• 致谢59-60
• 攻读硕士学位期间发表和撰写论文情况60-61

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 陈海松,刘维俊;抗内毒素药物的研究进展[J];国外医药(抗生素分册);2002年04期

2 黄河颂;蒋慧;孔祥龙;刘婷婷;谭志平;陈平;罗红;;细胞间黏附分子-1基因K469E多态性与慢性阻塞性肺疾病的相关性[J];中南大学学报(医学版);2012年01期

3 范丽丽;于湘友;;乌司他丁对体外循环患者细胞黏附分子浓度影响及对肺损伤保护作用[J];中华实用诊断与治疗杂志;2010年02期

4 马希刚;曹相原;;慢性阻塞性肺疾病不同时期细胞间黏附分子-1和E-选择素的表达及意义[J];医学研究生学报;2007年10期

5 薛庆亮,汪建新,江宏;内毒素致兔急性肺损伤及1,6-二磷酸果糖保护性作用的研究[J];军医进修学院学报;2005年01期

本文编号：550166