血硒对重症急性一氧化碳中毒大鼠脑组织损伤的研究

发布时间：2017-07-17 22:05

  本文关键词：血硒对重症急性一氧化碳中毒大鼠脑组织损伤的研究

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【摘要】：目的分析血硒对重症急性一氧化碳中毒大鼠脑组织损伤产生的影响，探讨硒是否对重症急性重度一氧化碳中毒大鼠有辅助治疗作用。 方法 1.107只大鼠，体重450±20g，经Morris水迷宫训练淘汰2只，余随机抽出10只为空白对照组（BC组），剩95只采用纯品CO气体分次腹腔注射的方法建立大鼠急性CO-P模型，将造模后存活并恢复饮食活动者45只平均分为三组低剂量硒治疗组（LSe组）、高剂量硒治疗组（HSe组）、染毒组（CO-P组）。 2.每三日一次Morris水迷宫实验测试，评估神经行为学改变，记录逃匿潜伏时间。 3亚硒酸钠注射液：LSe组动物每日0.1μg/g/d肌注，HSe组动物0.2μg/g/d肌注。对照与染毒组各肌注相当量生理盐水。 4每日采各组三份尾血0.5ml监测血清硒及全血谷胱甘肽－过氧化物酶活性的动态变化。 5染毒后第21天取大鼠脑组织，观察脑组织结构及神经细胞形态采用苏木素-伊红(HE)染色;观察脑白质髓鞘结构及细胞形态采用Luxol氏坚牢蓝焦油紫(LFB)染色；神经细胞凋亡采用Tunnel末端转移酶法染色。6免疫组织化学（Immunohistochemistry,IHC）※染色观察海马区髓鞘碱性蛋白1（myelinbasicprotein,MBP）的含量，阳性信号为棕黄色，在10×20高倍镜下每张切片选取海马区3个视野，阳性部位平均累计光密度值（Intergral optical density,IOD） image-pro plus6.0图像分析软件测定，取其均数作为统计分析数据。 7.统计学方法:应用SPSS13.0软件进行统计分析；定量资料采用X S，各时间点各组之间的比较采用重复测量的方差分析；四组之间两两比较检验：方差齐：LSD，方差不齐：Dunnett’s T3及Kruskal-Wallis秩和。检验水准：α0.05表示差异有统计学意义。 结果 1.大鼠急性重度CO-P模型建立：维持COHB浓度＞65%16小时后，全部昏迷经灌饮灌饲48小时后大鼠49.5%存活,49.4%可恢复饮食活动。 2.神经行为学评估：采用Morris水迷宫实验测试，重复测量的统计学方差分析，BC组潜伏逃匿时间逐渐缩短，CO-P组潜伏逃匿时间逐渐延长，LSe组、HSe组潜伏逃匿时间先缩短后延长，各组间大鼠潜伏逃匿时间差异均有统计学意义(P0.001)。 3.血硒动态变化结果:各组大鼠血硒水平的比较采用统计学两两比较，方差齐使用LSD检验，方差不齐则用Dunnett’s T3检验。两治疗组水平高于染毒组，，低剂量硒治疗组第20天达到空白对照组水平，高剂量硒治疗组的15天达到空白对照组水平，各组间每日平均血硒水平差异均有统计学意义(P0.001)。 4GSH－PX活性变化监测结果各组大鼠GSH－PX活性的四组之间两两采用统计学比较，方差齐：LSD，方差不齐：Dunnett’s T3。空白对照组水平高于各组，两治疗组第4-8天接近空白对照组水平，大鼠GSH－PX活性水平在不同组之间/各时间点/随时间变化的趋势，差异均有统计学意义(P0.001)。 5. pearson相关性分析低硒治疗组酶活力（r=0.755，p0.05）、高硒治疗组酶活力r=0.841，p0.01）与血硒水平在中毒后补硒的前8日内呈现正相关关系。 6. HE染色:染毒组大鼠脑组织重度水肿变性表现,两治疗组与染毒组镜下改变一致,损伤程度较轻。 7. Luxol氏坚牢蓝焦油紫(LFB)染色可见中毒后大鼠脑白质脱髓鞘病变，LSe组与HSe组较轻。 8. Tunnel末端转移酶法染色大鼠中毒后海马细胞凋亡，除海马区外，小脑部表现也较明显，两治疗组病变类似，程度较染毒组无明显区别。 9免疫组化染色 9.1镜下可见中毒大鼠海马区脑组织MBP阳性区域神经纤维分布缺失，神经细胞坏死、变性改变。镜下病理形态三组无明显差别； 9.2经四组间IOD值方差不齐（F=10.271，P0.001），经Kruskal-Wallis秩和检验，四组间的IOD值差别有统计学意义（H=21.753，P0.001）；两两比较低硒治疗组和高硒治疗组与空白对照组的IOD值有差异，与染毒组的IOD值的差别也有统计学意义，但其两组IOD值的差别无统计学意义。 结论 提高大鼠血硒水平，可增加谷胱甘肽过氧化物酶的活性，减轻重症急性一氧化碳中毒大鼠脑损伤。
【关键词】：急性一氧化碳中毒 一氧化碳中毒迟发脑病 血硒 谷胱甘肽过氧化物酶缺血-再灌注 自由基 碱性脱髓鞘蛋白
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R595.1
【目录】：

• 缩略语6-7
• 中文摘要7-10
• Abstract10-14
• 前言14-17
• 材料和方法17-25
• 结果25-36
• 讨论36-39
• 结论39-40
• 参考文献40-46
• 综述46-52
• 参考文献49-52
• 附录52-53
• 攻读学位期间发表论文情况53-54
• 致谢54-55
• 个人简介55

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：554821