外源性硫化氢对正常大鼠皮肤成纤维细胞增殖的影响
发布时间:2017-08-14 23:26
本文关键词:外源性硫化氢对正常大鼠皮肤成纤维细胞增殖的影响
【摘要】:目的探讨H2S对体外培养大鼠皮肤成纤维细胞增殖的影响。 方法将大鼠皮肤成纤维细胞培养到对数生长期时制成单细胞悬液,其浓度为1×106/ml,以每孔1ml细胞悬液接种于12孔培养板中培养48h,用无胎牛血清DMEM培养基换液,培养24h使细胞同步化。将细胞分为空白组对照组(B组细胞悬液),实验对照组(C组生理盐水),NaHS(N1,N2,N3组),PPG(P1,P2,P3组),每组设三个复孔,分别加入200L含相应浓度药物的DMEM培养基给予干预,孵育24小时后制成单细胞悬液,计数调整浓度,固定、染色以标准程序用流式细胞仪检测,结果用细胞周期拟合软件ModFit分析。计量资料以均数±标准差(x±s)表示,采用单因素方差分析(one-wayANOVA),检验水准取α=0.05。 结果24hS期细胞百分比(%)N1、N2和N3组与实验对照组和空白对照组均无明显差异(45.49±1.60、48.10±2.09、44.67±0.89%vs46.12±1.02%均p0.05);24h细胞百分比(%)S期P1、P2和P3组与实验对照组和空白对照组均无明显差异(47.43±0.60,,47.79±1.26,40.22±1.30%vs46.12±1.02%均p0.05);NaSH组、PPG组分别与实验对照组和空白对照组比较S期细胞百分比均无明显差异(p0.05);。 结论外源性H2S对体外培养的大鼠皮肤成纤维细胞无增殖效应。
【关键词】:硫化氢 成纤维细胞 细胞增殖 细胞周期
【学位授予单位】:青海大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R644
【目录】:
- 摘要4-5
- Abstract5-6
- 目录6-8
- 主要符号对照表8-9
- 第1章 引言9-11
- 1.1 研究背景和意义9-10
- 1.2 国内外研究进展10
- 1.3 选题依据、研究内容和目标及论文结构10-11
- 第2章 材料与方法11-19
- 2.1 技术路线图11-12
- 2.2 实验条件12
- 2.3 主要仪器(见表 1)12-13
- 2.4 主要试剂13
- 2.5 主要溶液配置13-14
- 2.6 操作步骤14-17
- 2.6.1 细胞换液、传代、计数14-15
- 2.6.2 实验分组及药物浓度梯度15-16
- 2.6.3 测定原理16
- 2.6.4 细胞干预16-17
- 2.6.5 细胞上流式细胞仪检测17
- 2.7 统计学方法17-19
- 第3章 结果19-22
- 3.1 结果19
- 3.2 流式细胞仪分析图19-22
- 第4章 讨论22-24
- 第5章 结论24-25
- 参考文献25-27
- 致谢27-28
- 附录 A 实验相关图片28-29
- 附录 B 综述29-32
- 参考文献31-32
- 个人简介32
【参考文献】
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本文编号:675282
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