WDR26在严重烫伤后大鼠心肌组织中表达的初步研究

发布时间：2017-09-02 11:09

  本文关键词：WDR26在严重烫伤后大鼠心肌组织中表达的初步研究

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【摘要】：目的：初步研究大鼠严重烫伤后WDR26在心肌组织中的表达。 方法：正常2～3月龄大鼠72只，雌雄不限，体重200~250g，其中随机选9只大鼠建立烫伤模型，余63只大鼠随机分为3组：（1）延迟复苏组，n=30，将大鼠用10％水合氯醛(3mL/kg)腹腔注射麻醉后，，再将大鼠背部用10%硫化钠脱毛24h后，将其背部置于94摄氏度（℃）电热恒温水箱热水内，持续时间12s，建立大鼠背部面积30%（根据Meeh Rubner公式计算得出）III度烫伤模型，采用Parkland补液公式进行液体复苏，分别于烫伤后第6h、8h和16h进行补液；（2）立即复苏组，n=30，方法同上，复苏时间为烫伤后即刻、烫伤后第8h和16h；（3）正常组：n=3，将大鼠背部置于37℃电热恒温水箱热水内，持续时间12s，烫伤后不予以复苏。延迟复苏组和立即复苏组每组均设10个检测时相点，分别为烫伤后即刻、1h、3h、6h、7h、8h、10h、14h、18h、22h，每个时相点3只，在大鼠烫伤后分别在各时相点采集大鼠血液离心，取其上层血清，检测各组大鼠的心肌酶值变化。正常组设1个时相点，在烫伤后1h采集血液标本。同时切取各组大鼠心肌组织置于液氮中保存，采用组织病理检查技术、定量聚合酶链式反应(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)、蛋白印迹技术（Western-Blot）及图像分析方法，分别检测大鼠烫伤后不同时相点心脏的病理变化及WDR26的表达规律。 结果：1.大鼠心肌酶值变化：通过检测大鼠肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CKMB)和乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)发现：（1）大鼠延迟复苏组和立即复苏组血清心肌酶值明显高于正常组；（2）延迟复苏组和立即复苏组血清心肌酶值在烫伤后3h和8~10h明显升高，其中延迟复苏组升高更显著。2.大鼠心肌组织病理变化：通过心肌结构和炎症细胞的变化来对心肌组织进行病理观察，结果显示：大鼠严重烫伤后延迟复苏组与立即复苏组各时相点均见心肌组织变性水肿，炎症细胞浸润，其中延迟复苏组心肌损伤更明显，尤其烫伤后3h和7~10h损伤较重。3.大鼠心肌组织WDR26的表达：（1）通过PCR检测WDR26的mRNA表达：大鼠严重烫伤后，延迟复苏组与立即复苏组心肌组织均见WDR26的mRNA表达，其中延迟复苏组的WDR26表达更明显，尤其在烫伤后3h、7h和10h，波动明显，达到峰值，而立即复苏组下降明显。（2）通过Western-Blot技术检测WDR26的蛋白表达：大鼠严重烫伤后，三组心肌组织均见WDR26的蛋白表达，其中延迟复苏组表达更明显，WDR26表达在烫伤后7h和10h波动明显，达到峰值，而立即复苏组变化不明显。 结论：1、94℃热水烫伤大鼠背部12S，成功建立大鼠III度烫伤模型。2、大鼠严重烫伤后可引起心肌损伤，而延迟复苏实施后心肌损伤更明显。3、WDR26在严重烫伤后大鼠心肌组织中有表达且高于正常，而延迟复苏实施后在心肌组织中表达更显著。
【关键词】：WDR26 大鼠 烫伤 心肌
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R644
【目录】：

• 主要英文缩写中英文对照表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-11
• 实验材料11-14
• 第一部分14-16
• 方法14
• 结果14-15
• 结论15-16
• 第二部分16-28
• 方法16-17
• 结果17-25
• 统计分析方法25
• 讨论25-27
• 结论27-28
• 第三部分28-45
• 方法28-37
• 结果37-41
• 统计分析方法41-42
• 讨论42-44
• 结论44-45
• 总结论45-46
• 参考文献46-49
• 综述49-58
• 参考文献54-58
• 论文发表58-59
• 致谢59

【参考文献】

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本文编号：778181