姜黄素抑制超抗原TSST-1和猪链球菌诱导的炎症反应的体外研究

发布时间：2017-09-18 06:16

  本文关键词：姜黄素抑制超抗原TSST-1和猪链球菌诱导的炎症反应的体外研究

  更多相关文章： 姜黄素 毒性休克综合征毒素-1 猪链球菌 中毒性休克 促炎性细胞因子

【摘要】：目的 超抗原毒性休克综合征毒素-1（TSST-1）和猪链球菌都能引起促炎性细胞因子的暴发而导致中毒性休克。姜黄素作为一种良好的抗炎物质已被证明在多种刺激引起的炎症反应中发挥作用。姜黄素是否也能降低TSST-1和猪链球菌引起的炎症反应有待研究。因此本实验通过两部分实验观察TSST-1和猪链球菌诱导的小鼠脾细胞促炎性因子的影响，探讨姜黄素在体外炎症模型的抗炎作用，为进一步探讨姜黄素对中毒性休克的作用提供依据。 方法 1.无菌分离小鼠脾脏，分离脾细胞，用含5%胎牛血清（FBS）的RPMI1640培养基制备成脾细胞悬液，调整细胞浓度，接种于24孔细胞培养板，置于37℃、5%CO2的细胞培养箱培养。 2.实验分组 第一部分（1）阴性对照组：单纯脾细胞悬液，未给予任何刺激 （2）TSST-1给毒组：0.1，1，3，5μg/ml TSST-1 （3）TSST-1+姜黄素干预组：1μg/ml TSST-1和1，，6，15，20μmol/L4个剂量的姜黄素共同培养 （4）IL-12抗体阻断实验： IL-12抗体组： LPS组（100ng/ml）；TSST-1组（3μg/ml）；TSST-1（3μg/ml）+姜黄素组（15μmol/L） 无IL-12抗体组：LPS组（100ng/ml）；TSST-1组（3μg/ml）；TSST-1（3μg/ml）+姜黄素组（15μmol/L） 第二部分（1）阴性对照组：单纯脾细胞悬液，未给予任何刺激 （2）猪链球菌组：感染复数（MOI）为100 （3）猪链球菌+姜黄素组：MOI为100+15μmol/L姜黄素 3.实验方法 （1）台盼蓝染色计数，判断脾细胞活力 （2）采用乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测细胞毒性 （3）酶联免疫吸附法（ELISA）检测相关细胞因子 （4）用流式细胞术检测脾细胞内TNF-α情况 结果 （1）所选剂量TSST-1、猪链球菌和姜黄素均未发现有明显细胞毒作用; （2）TSST-1诱导脾细胞产生了大量的IFN-γ和IL-2，产生了少量的TNF-α，未能诱导出IL-1β、IL-6和IL-12; （3）IL-12抗体未能完全阻断TSST-1诱导的IFN-γ; （4）姜黄素在15μmol/L时显著减少IFN-γ和TNF-α，但对IL-2无显著抑制作用; （5）猪链球菌诱导脾细胞产生了促炎性细胞因子IL-6、TNF-α、IL-12和较高剂量的IFN-γ以及少量的IL-1β，同时也产生了抗炎因子IL-10; （6）姜黄素对猪链球菌诱导的促炎因子都有抑制作用同时降低了促炎因子与抗炎因子的比例。 结论 （1）小鼠的抗原提呈细胞对TSST-1不敏感; （2）与LPS不同TSST-1诱导的Th1细胞因子产生不完全依赖于IL-12; （3）姜黄素能显著降低TSST-1和猪链球菌促炎细胞因子的产生，但对TSST-1诱导的T细胞增殖无明显抑制作用; （4）姜黄素在体外炎症模型中能降低促炎细胞因子的产生推测姜黄素可以缓解TSST-1和猪链球菌导致的中毒性休克。
【关键词】：姜黄素 毒性休克综合征毒素-1 猪链球菌 中毒性休克 促炎性细胞因子
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R459.7
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 常用缩写词中英文对照表9-10
• 第一部分 姜黄素对超抗原中毒性休克综合征毒素-1 诱导的炎症因子的体外干预研究10-33
• 前言10-12
• 第一章 材料与方法12-22
• 第二章 结果22-28
• 第三章 讨论28-30
• 结论30-31
• 参考文献31-33
• 第二部分 姜黄素抑制猪链球菌诱导的炎症反应的体外研究33-44
• 前言33-34
• 第一章 材料与方法34-35
• 第二章 结果35-39
• 第三者讨论39-41
• 结论41
• 展望41-42
• 参考文献42-44
• 综述44-52
• 参考文献49-52
• 攻读学位期间发表文章情况52-53
• 致谢53-54
• 个人简历54

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本文编号：873855