严重烧伤大鼠血清对大鼠骨髓间充质干细胞迁移的影响及初步机制研究

发布时间：2017-10-04 17:33

  本文关键词：严重烧伤大鼠血清对大鼠骨髓间充质干细胞迁移的影响及初步机制研究

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【摘要】：第一部分严重烧伤大鼠血清对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、迁移能力的影响目的：用严重烧伤大鼠血清培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),模拟烧伤后的体内环境,观察严重烧伤大鼠血清对BMSCs增殖、迁移能力的影响。方法：建立严重烧伤大鼠模型,并制备严重烧伤后大鼠血清。实验分组：正常培养组(含10%胎牛血清)、烧伤血清组(含10%烧伤大鼠血清),MTT法检测各组BMSCs增殖能力；Transwell小室检测烧伤组不同时间点BMSCs迁移情况。结果：烧伤血清处理24h后,BMSCs增殖比正常培养组快(P0.01)；烧伤血清作用0、1、3、6、12、24 h时,BMSCs细胞迁移数量分别为0、1.0±0.7、14.6±4.6、45.0±6.4、82.8±8.3、122.2±11.4个,3 h时BMSCs出现迁移增多,6、12、24h时BMSCs迁移数量多于3h(P0.01)。结论：严重烧伤大鼠血清对BMSCs增殖和迁移有促进作用。第二部分严重烧伤大鼠血清处理后大鼠骨髓间充质干细胞的p38和Akt磷酸化水平变化目的：观察严重烧伤大鼠血清处理后骨髓间充质干细胞(BMSCs)胞内的p38和Akt磷酸化水平变化。方法：建立严重烧伤大鼠模型,制备烧伤后大鼠血清。用体积分数10%的严重烧伤大鼠血清刺激BMSCs不同时间后,Western blot检测BMSCs内磷酸化p38(p-p38)和磷酸化Akt (p-Akt)表达水平。结果：烧伤血清作用0、1、3、6、12、24 h时,BMSCs胞内p-p38表达分别为1.02±0.50、1.11±0.17、1.04±0.23、1.02±0.20、1.16±0.22、1.0±0.19,在各时间点p-p38蛋白表达变化趋势不明显,差异无统计学意义(P0.05)；而p-Akt表达分别为0.59±0.08、0.65±0.06、0.83±0.22、1.10±0.21、1.22±0.19、1.62±0.30,6、12、24 h时p-Akt蛋白表达较作用O h时(加入血清后即刻)水平明显增高(P0.05)；12、24 h时较3 h时明显增高(P0.05)。结论：严重烧伤大鼠血清可增高BMSCs的Akt磷酸化水平。第三部分严重烧伤大鼠血清促进大鼠骨髓间充质干细胞迁移的机制探讨目的：探讨PI3K/Akt信号通路在严重烧伤大鼠血清促进大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)迁移中的作用。方法：实验随机分为4组：正常培养组(含10%胎牛血清)、烧伤血清组(含10%严重烧伤大鼠血清)、烧伤血清+抑制剂组(含10%严重烧伤大鼠血清+10μmol/L的LY294002)、烧伤血清+激动剂组(含10%严重烧伤大鼠血清+200 ng/mL的IGF-1), Transwell小室检测各组BMSCs的迁移情况；激光共聚焦显微镜观察各组BMSCs微管结构的变化。结果：各组培养24 h后,烧伤血清组BMSCs微管结构出现解聚,细胞迁移数量较正常培养组增多(P0.01)。与烧伤血清组比较,烧伤血清+激动剂组BMSCs微管结构解聚增多,细胞迁移数量增多(P0.01),烧伤血清+抑制剂组细胞微管结构变化不明显,但BMSCs迁移数量明显减少(P0.01)。结论：严重烧伤大鼠血清可促进BMSCs迁移,可能与烧伤血清中细胞因子IGF-1激活PI3K/Akt信号通路相关,进而引起BMSCs微管结构变化,促进BMSCs迁移。
【关键词】：严重烧伤 骨髓间充质干细胞 微管 迁移 PI3K/Akt信号通路
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R644
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-15
• 前言15-19
• 参考文献17-19
• 第一部分 严重烧伤大鼠血清对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、迁移能力的影响19-24
• 1 材料与方法19-21
• 2 结果21-23
• 3 讨论23-24
• 第二部分 严重烧伤大鼠血清处理后大鼠骨髓间充质干细胞的p38和Akt磷酸化水平变化24-31
• 1 材料与方法24-28
• 2 结果28-29
• 3 讨论29-31
• 第三部分 严重烧伤大鼠血清促进大鼠骨髓间充质干细胞迁移的机制探讨31-38
• 1 材料与方法31-33
• 2 结果33-35
• 3 讨论35-38
• 全文小结38-39
• 参考文献39-43
• 文献综述43-51
• 参考文献47-51
• 致谢51-52
• 攻读硕士学位期间发表的论文52

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本文编号：971943