ApoE4对HEK293细胞线粒体形态和功能的影响

发布时间：2020-01-17 20:38

【摘要】：背景介绍:载脂蛋白E4（ApoE4）是现在所知的阿尔茨海默氏症（Alzheimer’sdisease, AD）的最主要的发病因素。ApoE4携带者患阿尔茨海默氏症的风险高达60%。有研究结果提示ApoE4可影响线粒体功能，但是没有实验直接研究ApoE4对线粒体形态的影响。由于线粒体的形态对其功能的维持具有重要意义，本实验研究了ApoE4对HEK293线粒体形态变化的影响，，并在后续实验中证明这些形态和数目的变化伴随着线粒体功能的损伤。目的：研究ApoE4对线粒体形态、数目和功能的影响。方法：以pEGFP N1为载体构建ApoE的三种基因多态型ApoE2，ApoE3和ApoE4的绿色荧光质粒，转染人胚肾细胞株（HEK293），用线粒体特异性的染料在转染了ApoE绿色荧光质粒的HEK293细胞上进行免疫细胞荧光实验。在共聚焦显微镜下观察转染了ApoE4的HEK293细胞中的线粒体形态和数目等方面的变化。并使用JC-1检测试剂盒检测线粒体膜电位的变化，用ATP检测试剂盒检测细胞中ATP生成量的变化，以检测ApoE4对线粒体膜电位和ATP生成的影响。 结果： （1）ApoE4能够显著引起线粒体的数目减少，弯曲形态线粒体数目增多； （2）ApoE4引起线粒体膜电位降低； （3）ApoE4引起ATP生成量减少； （4）转染ApoE4的细胞中内质网应激相关标志物GADD153/CHOP和BiP表达量降低。 结论： ApoE4导致细胞中线粒体数目减少，呈弯曲形态线粒体数目增多，同时形态和数目的变化伴随着线粒体膜电位的降低和ATP生成量的减少；ApoE4对内质网应激相关蛋白表达无影响。提示ApoE4可直接并特异影响线粒体的形态和功能。
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R749.16

【共引文献】

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本文编号：2570742