海风藤提取物对激活的小胶质细胞IL-1β和TNF-α表达的影响

发布时间：2017-06-26 14:17

  本文关键词：海风藤提取物对激活的小胶质细胞IL-1β和TNF-α表达的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的 探讨在基因水平上不同聚集状态的Aβ1-42对小胶质细胞炎性反应的激活及其海风藤提取物对激活的小胶质细胞表达炎性因子白细胞介素1β(IL-1p)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的抑制作用；研究制备寡聚体p淀粉样蛋白(Aβ)_(1-42)的方法。 方法 1.体外培养小鼠小胶质细胞株BV2；2.制备寡聚体和纤丝状Aβ_(1-42)并分别使用透射电镜鉴定。3.将细胞随机分为4组：空白对照组、无Aβ_(1-42)干预组、寡聚体Aβ_(1-42）组和纤丝状Aβ_(1-42)组,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的海风藤提取物对BV2细胞活力的影响；4.分别采用寡聚体Ap1--42、寡聚体Aβ_(1-42~+)海风藤提取物、纤丝状Aβ_(1-42)、纤丝状Aβ_(1-42~+)海风藤提取物,干预小胶质细胞48h,并设空白对照组,应用实时荧光定量PCR测定各组IL-1β和TNF-α的表达水平 结果 1.寡聚体Aβ_(1-42)4℃孵育2周后,在电镜下观察以单体存在,呈球形或颗粒形,直径在15-30nm之间,大小较均一,未发现纤丝状物质形成；纤丝状Aβ_(1-42)37℃孵育1周后,电镜下观察到大部分Aβ_(1-42)呈纤丝状交聚,少量呈单体存在。2.MTT结果显示,海风藤提取物在10-80g/L范围内对细胞活性无影响。3.实时荧光定量结果显示,4个实验组的小胶质细胞表达IL-1β和TNF-α的水平均高于空白对照组,而寡聚体Ap1-42组表达IL-1β和TNF-α的水平高于纤丝状Aβ_(1-42)组；寡聚体Aβ_(1-42~+)海风藤提取物组IL-1β和TNF-α的表达水平低于寡聚体Ap1-42组,纤丝状Aβ_(1-42~+)海风藤提取物组IL-1β和TNF-α的表达水平低于纤丝状Aβ_(1-42)组。 结论 1.不同聚集状态的Aβ_(1-42)均能在基因水平上激活小胶质细胞,而寡聚体状态的Aβ_(1-42)诱导小胶质细胞产生的炎性反应更为活跃。2.海风藤提取物对寡聚体和纤丝状Aβ_(1-42)激活的小胶质细胞在基因水平上释放炎性因子都有较明显的抑制作用。3.成功制备稳定存在的寡聚体Aβ_(1-42)
【关键词】：海风藤提取物 小胶质细胞 阿尔茨海默病 β淀粉样蛋白 白细胞介素1β 肿瘤坏死因子α
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R749.16;R285
【目录】：

• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-12
• 前言12-14
• 材料与方法14-22
• 结果22-23
• 讨论23-35
• 结论35-36
• 附表36-38
• 附图38-40
• 参考文献40-46
• 致谢46-47
• 攻读硕士学位研究生期间参与课题及发表的论文47-48
• 学位论文评阅及答辩情况表48

【参考文献】

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本文编号：486453