脑苷肌肽干预后转基因AD模型小鼠海马的蛋白质组学研究

发布时间：2017-09-16 06:18

  本文关键词：脑苷肌肽干预后转基因AD模型小鼠海马的蛋白质组学研究

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【摘要】：目的:阿尔茨海默病(AD)是一种隐袭起病呈进行性发展的神经系统退行性疾病,与年龄有相关性,严重影响老年人的生活质量,也给照料者造成负担。AD发病机制及影响因素复杂,涉及基因变异、蛋白修饰异常、淀粉样蛋白沉积、神经营养及可塑性改变、氧化应激、细胞凋亡、能量代谢紊乱、细胞结构失衡等。病理研究发现AD患者或动物模型海马神经元有明显损伤,直接影响记忆及空间定位等生理功能,海马是痴呆患者较早发生病理改变的部位。关于AD的治疗,目前临床一线治疗药物也仅限于多奈哌齐和美金刚,而且只能缓解症状,并不能逆转或阻止病情进展。脑苷肌肽因其神经修复作用被广泛应用于各种中枢及周围神经系统损伤性疾病。国内较普遍应用脑苷肌肽治疗阿尔茨海默病,临床观察有一定的疗效,但其作用机制亦不明确。蛋白质组学最初被定义为一个基因组所表达的蛋白质,然而产生蛋白质的细胞组织是动态的,并且容易受到外环境的影响。因而目前认为蛋白质组是一个已知的细胞在某一特定时刻所包括所有亚型和修饰的全部蛋白质。蛋白质组学就是从整体角度分析细胞内动态变化的蛋白质,包括其组成、表达水平与修饰状态,了解蛋白质之间的相互作用与联系,提示蛋白质的功能与细胞的活动规律。鉴于转基因小鼠模型所引起的病理改变相对单一,产生病理变化所经历时间较短,能够更好地模拟AD病理改变和临床特点,已成为目前国内外研究AD病因及发病机制和临床治疗策略较理想的动物模型。本研究通过对正常对照组、模型组及脑苷肌肽干预后APPswe/PS1d E9双转基因AD模型小鼠海马组织进行比较蛋白质组学研究,鉴定差异表达蛋白并分析其生物学功能,帮助我们深入理解阿尔茨海默病的病理机制及脑苷肌肽对脑组织的保护作用机制,为探讨阿尔茨海默病临床诊治的新思路提供实验依据。方法:选取5月龄APPswe/PS1d E9双转基因AD模型小鼠共24只,随机分组:模型组(Tg)、脑苷肌肽干预组(Tg+CEGI-6.6)各12只,同月龄相同遗传背景C57/BL6J小鼠12只作为对照组。脑苷肌肽干预组给予腹腔注射脑苷肌肽6.6m L/kg/d,模型组及对照组给予等剂量的生理盐水。30天后,分别处死动物,取小鼠大脑海马组织,提取蛋白质进行肽段TMT标记,并进行LC-LTQ-MS/MS分析以及质谱数据检索,对所得差异蛋白进行生物学功能分析。结果:1运用TMT定量结合LC-MS/MS技术检测,并采用国际比较流行的常规的分析表达差异蛋白点标准,即1.5倍以上的变化幅度是可信的。得出:脑苷肌肽干预组与模型组比较,得出可信差异蛋白122个,其中表达上调的蛋白有56个(Table1),表达下调的蛋白有66个(Table2);脑苷肌肽干预组与正常对照组比较,得出可信差异蛋白143个,其中表达上调的蛋白有51个(Table3),表达下调的蛋白有92个(Table4)。2 GeneCoDis3分析差异蛋白的生物学过程,脑苷肌肽干预组小鼠大脑海马组织差异蛋白的功能主要涉及细胞结构维持、细胞膜运输、细胞能量代谢、细胞信号转导、脂质代谢、蛋白质转运、蛋白质水解、细胞增殖及凋亡、炎症、氧化应激、免疫反应调节等生物过程。结论:1运用蛋白质组学技术鉴定出APP/PS1小鼠及脑苷肌肽干预后的差异表达蛋白,初步建立APP/PS1小鼠及脑苷肌肽治疗后小鼠海马组织的蛋白质组数据库,这些蛋白质主要涉及细胞结构维持、胞膜运输、细胞能量代谢、细胞信号转导、脂质代谢、蛋白质转运及水解、细胞增殖及凋亡、炎症、氧化应激、免疫反应调节等生物过程。这些过程与神经退行性疾病尤其是AD的发病机制及病理过程密切相关,深入探究有利于我们进一步理解这些疾病的内在本质。2脑苷肌肽对APP/PS1小鼠神经细胞损伤有一定保护作用,其机制可能是通过稳定细胞骨架结构,维持突触稳定性,减缓神经节苷脂退化速度,抑制炎症反应及氧化应激等方面发挥其对神经元的保护作用。
【关键词】：阿尔茨海默病 转基因小鼠 脑苷肌肽 蛋白质组学 LC/MS TMT定量标记
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R-332;R749.16
【目录】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 前言9-11
• 材料与方法11-15
• 结果15-16
• 附表16-26
• 讨论26-36
• 结论36-37
• 参考文献37-43
• 综述 微管相关蛋白与神经退行性疾病43-53
• 参考文献49-53
• 致谢53-54
• 个人简历54

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

1 许玉霞;王洪权;赵红;郭景春;朱粹青;;海马注射β-淀粉样蛋白前体蛋白抗体诱导神经元的退行性变及学习记忆障碍(英文)[J];生物化学与生物物理进展;2011年10期

2 ;Synapse formation and remodeling[J];Science China(Life Sciences);2010年03期

3 POO Mu-Ming;;Progress in neural plasticity[J];Science China(Life Sciences);2010年03期

4 ;Recent progress in neurodegenerative disorder research in China[J];Science China(Life Sciences);2010年03期

5 刘玲玲;盛柏杨;龚锴;赵南明;张秀芳;唐佩福;公衍道;;淀粉样肽Aβ导致线粒体功能紊乱的体内和体外研究[J];生物化学与生物物理进展;2010年02期

6 ;TLR4 signaling induced TLR2 expression in the process of mimic cerebral ischemia/reperfusion in vitro[J];Science China(Life Sciences);2010年02期

7 ;A meta-analysis of oxidative stress markers in schizophrenia[J];Science China(Life Sciences);2010年01期

8 顾兵,张颖冬,胡刚;帕金森病病因学与发病机制及药物研究近况[J];实用老年医学;2003年02期

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本文编号：861365