小鼠Sema3A基因过表达慢病毒载体的构建与鉴定

发布时间：2017-10-21 12:04

  本文关键词：小鼠Sema3A基因过表达慢病毒载体的构建与鉴定

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【摘要】：目的构建小鼠Sema3A基因过表达慢病毒载体。方法通过体外合成小鼠全长Sema3A c DNA,采用Gateway技术将其基因插入到p Down-m Sema3A-IRES/EGFP质粒中,再交换重组获得重组质粒p LV/EXPNZ-puro-m Sema3A-IRES/EGFP,经过测序鉴定后,包装与浓缩慢病毒载体p LV(Exp)-Puro-CMV-m Sema3A-IRES/EGFP,最后重组慢病毒载体转染293T细胞获得病毒液。结果重组慢病毒载体11 538 bp,测序结果证实Sema3A基因共2 319 bp正确插入带有EGFP的载体中,成功构建小鼠Sema3A基因过表达载体。结论成功构建小鼠慢病毒载体p LV(Exp)-Puro-CMV-m Sema3A-IRES/EGFP,为该基因在特定细胞内过表达株的筛选奠定基础。
【作者单位】： 辽宁省口腔医学研究所口腔正畸学研究室 中国医科大学附属口腔医院正畸科;辽宁省口腔医学研究所口腔颌面外科学研究室 中国医科大学附属口腔医院口腔颌面外科;
【关键词】： SemaA 慢病毒载体
【基金】：辽宁省科技厅(2012225015)
【分类号】：R783.5
【正文快照】： 正畸牙移动离不开张力侧牙槽骨增生为主和压力侧牙槽骨吸收为主的骨改建过程,而这一过程中如何维持成骨过程与破骨过程的动态平衡的骨稳态十分重要。在骨组织改建的过程中,一些细胞因子和分泌蛋白通过作用于成骨或者破骨的不同环节而具有一定的骨保护功能,如转化生长因子β[1]

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本文编号：1073225