高迁移率族蛋白B1在人牙髓细胞成牙本质分化中的表达

发布时间：2018-02-22 11:19

  本文关键词： 牙髓细胞 高迁移率族蛋白B 成牙本质分化　出处：《口腔医学研究》2015年11期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的:检测人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)诱导矿化过程中高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1,HMGB1)的表达变化,探讨HMGB1在人牙髓细胞损伤修复中的可能作用。方法:组织块法分离培养hDPCs,收集矿化诱导0、3、7、11、14d后hDPCs的mRNA、蛋白质及细胞爬片,实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(western blot)分别检测HMGB1、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的mRNA及蛋白表达水平;并检测ALP活性,免疫荧光检测HMGB1在hDPCs矿化过程中的表达。结果:hDPCs矿化诱导后,DMP1、DSPP、ALP及HMGB1的mRNA表达显著性上调,DMP1、DSPP和ALP的mRNA以及碱性磷酸酶活性在诱导7d、11d和14d后与对照组间差异有统计学意义(P0.05),HMGB1mRNA在矿化诱导11d和14d后与对照组的差异具有统计学意义(P0.05)。蛋白印迹法检测示细胞内各矿化标记的蛋白表达均较对照组上调,而细胞内HMGB1的蛋白表达较对照组下调。免疫荧光结果显示hDPCs矿化过程中,HMGB1逐渐从胞核转移至胞浆。结论:在hDPCs诱导成牙本质细胞分化过程中,HMGB1在mRNA水平上与DMP1、DSPP和ALP的表达变化趋势相似,而细胞内HMGB1蛋白水平表达下调,且HMGB1在hDPCs细胞内出现转位,提示HMGB1与hDPCs的成牙本质分化有关,可能在牙髓细胞损伤修复中发挥作用。
[Abstract]:Objective: to investigate the expression of high mobility group box 1 (HMGB1) in human dental pulp cells (hDPCs) induced by human dental pulp cells. To explore the possible role of HMGB1 in the repair of human dental pulp cells. Methods: hDPCswere isolated and cultured by tissue mass method, and the mRNAs, proteins and cell creeping slices of hDPCs were collected after mineralization induction for 71114d. The expression of HMGB1, dentin sialoophosphoprotein (DSPP), dentin matrix protein 1 (DMP1) and alkaline phosphatase (ALP) were detected by real-time fluorescence quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blot, respectively, and the activity of ALP was detected. Results the expression of DMP1DSPPnALP and HMGB1 mRNA in DMP1 and ALP were significantly up-regulated after mineralization induction of hDPCs by immunofluorescence. The activity of alkaline phosphatase (ALP) and alkaline phosphatase (ALP) were significantly higher than those in control group after 7 days and 14 days of induction. The difference of HMGB1 mRNA between the two groups after 11 days and 14 days of mineralization was statistically significant. The protein expression of various mineralized markers in the cells was up-regulated by Western blotting. The expression of HMGB1 protein in the cells was down-regulated than that in the control group. The immunofluorescence results showed that HMGB1 was gradually transferred from the nucleus to the cytoplasm during the mineralization of hDPCs. Conclusion: during the process of hDPCs induced odontoblast differentiation, HMGB1 is associated with DMP1DSPP and DMP1DSPP at the mRNA level. The change trend of ALP expression was similar. However, the expression of HMGB1 protein was down-regulated and HMGB1 translocated in hDPCs cells, suggesting that HMGB1 might play a role in the repair of dental pulp cell injury.
【作者单位】： 华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心;同济大学附属上海市第十人民医院口腔科;
【基金】：湖北省自然基金资助项目(编号:2010CDB09502)
【分类号】：R78

【参考文献】

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2 易世红;孙陆果;魏成国;黄红兰;;脂多糖刺激对小鼠腹腔巨噬细胞HMGB1表达的影响[J];中国生物制品学杂志;2009年08期

【共引文献】

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6 陈旭;汤玲玲;陈敏;张丹丹;郭艳;;Notch2在人恒牙牙髓及牙乳头中表达研究[J];中国实用口腔科杂志;2012年07期

7 蔡国栋;孔德谦;王俊勤;朱庄臣;张业锋;;LIM矿化蛋白-1与颈椎后纵韧带骨化相关性的实验研究[J];中国矫形外科杂志;2015年07期

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【二级参考文献】

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4 彭彬,樊明文;体外人牙髓细胞的矿化特性[J];中华口腔医学杂志;1997年05期

5 张立天,姚咏明,陆家齐,董宁,于燕,鄢小建,方文慧,盛志勇;脓毒症大鼠高迁移率族蛋白-1基因表达及其与内毒素血症的关系[J];中华普通外科杂志;2002年09期

6 刘辉,姚咏明,盛志勇;脓毒症内分泌调节机制的研究进展[J];中华实验外科杂志;2004年06期

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本文编号：1524277