CNTF在咬合创伤致大鼠咬肌损伤中的保护作用研究

发布时间：2018-03-15 09:36

  本文选题：咬合创伤　切入点：CNTF　出处：《山东大学》2014年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的：研究注射外源性睫状神经营养因子(Ciliary neurotrophic factor, CNTF)前后咬合创伤大鼠咬肌组织中CNTF、睫状神经营养因子α受体(Ciliary neurotrophic factor receptor α, CNTFRα)、结蛋白的表达变化规律以及咬肌组织微观结构的改变,探究CNTF、CNTFRα与咬肌损伤之间的相关性,进一步探讨咬合创伤致咀嚼肌功能紊乱的病因机制,为临床治疗提供新的靶点和治疗思路。 方法：选取健康雄性Wistar大鼠36只,用随机数字表法将大鼠分为1天、3天、7天、14天、28天及对照组(其中1天、3天、7天、14天、28天组为实验组)。实验组大鼠右下第一磨牙粘接厚约1mm的铸造冠,于术后1天、3天、7天、14天、28天取创伤侧(即右侧)及非创伤侧(即左侧)咬肌；对照组大鼠模拟粘冠操作后取双侧咬肌。再次选取健康雄性Wistar大鼠24只用随机数字表法将大鼠分为咬合创伤+生理盐水(Normal saline, NS)组、咬合创伤+CNTF组、正常+NS组、正常+CNTF组；咬合创伤+NS组及咬合创伤+CNTF组用相同的建模方法建立咬合创伤动物模型,正常+NS组、正常+CNTF组模拟相同的操作,正常+CNTF组及咬合创伤+CNTF组大鼠每天于双侧咬肌注射重组CNTF (3mg/kg),正常+NS组及咬合创伤+NS组每天注射同等剂量的NS,于注射14天后取双侧咬肌。应用免疫组织化学法测定组织中CNTF、CNTFRα的表达；用免疫荧光检测组织中结蛋白的表达；用荧光定量PCR (real-time PCR)法检测组织中CNTFmRNA、 CNTFRamRNA、结蛋白nRNA的相对表达量；制作超薄切片,透射电镜下观察咬肌组织超微结构的变化。 结果： 1)7天组创伤侧、14天组创伤侧及非创伤侧咬肌CNTF、CNTFRα及CNTFmRNA、CNTFRαmRNA的表达量明显高于对照组(p0.01),其中7天组创伤侧、14天组创伤侧明显高于非创伤侧(p0.05)；14天组创伤侧及非创伤侧咬肌CNTF、CNTFRα及CNTFmRNA, CNTFRαmRNA的表达量明显高于其他各组相应侧(p0.05)。咬合创伤+NS组创伤侧及非创伤侧咬肌CNTF及CNTFmRNA的表达量明显高于正常+NS组、咬合创伤+CNTF组及正常+CNTF组(p0.01),且创伤侧明显高于非创伤侧(p0.05)；咬合创伤+CNTF组双侧咬肌CNTFRα及CNTFRαmRNA明显高于咬合创伤+NS组(p0.01),后者又明显高于正常+NS组及正常+CNTF组(p0.01)。 2)3天组创伤侧、7天组及14天组双侧咬肌结蛋白的表达量明显低于对照组(p0.01),3天组、7天组、14天组创伤侧明显低于非创伤侧(p0.05),且14天组创伤侧及非创伤侧结蛋白的表达量明显低于其他组同侧；3天组创伤侧、7天组及14天组双侧咬肌结蛋白mRNA的表达量明显高于对照组(p0.01),3天组、7天组、14天组创伤侧明显高于非创伤侧(p0.05),7天、14天组创伤侧结蛋白mRNA的表达量明显高于明显高于于其他组(p0.01),14天组非创伤侧结蛋白的表达量明显高于其他组非创伤侧；咬合创伤+NS组创伤侧及非创伤侧咬肌结蛋白mRNA的表达量明显高于正常+NS组、咬合创伤+CNTF组及正常+CNTF组(p0.01),且创伤侧明显高于非创伤侧(p0.05)。 3)透射电镜观察咬合创伤不同阶段咬肌的超微结构变化,包括：咬肌纤维排列紊乱,粗细不均无萎缩或断裂,肌横纹模糊或消失,肌内血管增生、扩张等。 结论：咬合创伤可以通过降解结蛋白,破坏细胞骨架,导致咬肌损伤,在透射电镜下可观察到咬肌细胞的超微结构变化。CNTF作为重要的神经营养因子在咀嚼肌的损伤恢复中起重要作用,其表达下降可能参与咬肌细胞骨架的破坏,为临床上治疗咬合创伤引起的咀嚼肌功能紊乱提供新的理论依据。
[Abstract]:Objective: To study the injection of exogenous ciliary neurotrophic factor (Ciliary neurotrophic, factor, CNTF) CNTF in rat masseter muscle before and after occlusal trauma, ciliary neurotrophic factor receptor alpha (Ciliary neurotrophic factor receptor CNTFR alpha, alpha), desmin expression changes and microstructure changes of masseter muscle tissue, explore CNTF, correlation between CNTFR alpha and masseter muscle injury, to further explore the pathogenesis of occlusal trauma caused by masticatory muscle dysfunction, provide new targets and ideas for clinical treatment.
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本文编号：1615460