光滑纯钛片表面抗菌短肽涂层的组装、性能和生物学评价

发布时间：2018-04-11 06:07

  本文选题：抗菌短肽 + 种植体周围炎症　； 参考：《浙江大学》2015年博士论文

【摘要】：随着口腔种植技术的发展,种植修复已逐渐成为牙缺失患者的首选治疗方案,但引起种植手术早期失败的因素很多,种植体颈部周围炎症是主要原因之一。本研究旨在应用层层自组装技术在光滑纯钛表面组装上抗菌短肽涂层,并对改性后的表面进行表征以及对体外细胞学和细菌学等的效应进行评价。 鉴于滥用抗生素可能会引起多种耐药菌株的突变,传统抗菌药物并不能作为首选。在本研究中,选择一种具有广谱抗菌能力的阳离子抗菌短肽Tet13(KRWWKWWRRC),通过sulfo-SMPB与四型胶原相接枝,并重命名为AMPCol。将光滑纯钛片先浸没于带有正电荷的壳聚糖溶液中(5mg/ml, PH=2.8)20分钟,使表面均匀的带上一层正电荷；接着以带有负电荷的透明质酸钠溶液(0.5mg/ml, PH=7.2)和带有正电荷的AMPCol溶液(lmg/ml)为电解质,通过层层自组装技术将两者均匀的组装到钛片表面。X射线光电子能谱仪分析发现在组装有涂层的钛片表面可以检测到Ti,O,N和S元素,并且随着涂层组装数的增加,其表面氮元素含量随之增高,而钛元素含量随之降低。原子力显微镜观察发现钛片表面覆盖有颗粒状和岛状结构的涂层。接触角实验结果表明涂层表面的可湿润性随着AMPCol组装层数的变化而呈现有规律的改变,接触角值在34°-40°之间。石英电子微天平可检测换算得到钛片表面涂层的厚度,与组装层数具有密切相关性。通过检测色氨酸所带有的激发波长,可测定组装有不同层数的涂层的药物缓释情况,发现本涂层可持续释放AMPCol长达一个月。 选择种植体周围炎症的两种主要致病菌,革兰氏阳性的需氧菌(金黄色葡萄球菌)与革兰氏阴性的厌氧菌(牙龈卟啉单胞菌),通过持续抑菌实验和早期抑制细菌生物膜的实验来验证组装有涂层的纯钛片的抗菌抑菌效果。结果显示,以光滑钛片对照组表面生长的菌落数量为100%,持续浸泡带涂层纯钛片长达一个月(29天)的培养基,可抑制99.31%的牙龈卟啉单胞菌和99.56%的金黄色葡萄球菌；组装有7层和10层CS-(HA-AMPCol)n的纯钛片对金葡菌早期生物膜形成的抑制作用最佳。 最后,对抗菌短肽涂层材料作生物安全性检测。通过与HaCaT细胞共培养,检测细胞在表面上的增殖情况,验证其细胞毒性。与人类血液红细胞温育后,测定溶血反应情况和脂质过氧化情况,验证其血液毒性。结果显示,本研究所制备的涂层不会对HaCaT细胞产生不良影响；也不会提高红细胞的溶解率；对红细胞胞膜的脂质过氧化作用与PBS接近,即与体液相似,不会造成脂质过氧化作用；因此本涂层具备良好的生物安全性。 本研究在光滑纯钛片表面制备了一种无细胞毒性、无血液毒性的多层次涂层,并且具有持续抗菌作用,还能抑制早期细菌生物膜的形成。本涂层可在种植体颈部局部形成一个抗菌短肽缓释系统,相比较于传统系统性抗菌治疗,这种治疗方法具有更高的局部药物浓度和更快的杀菌抑菌速度。本研究为非封闭式种植愈合过程中预防种植体周围炎症提出了一种新的更为有效的方法。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R783.6

【共引文献】

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本文编号：1734735