口腔过敏综合征小鼠模型的建立与评价

发布时间：2018-04-16 16:29

  本文选题：口腔过敏综合征 + 食物过敏　； 参考：《遵义医学院》2017年硕士论文

【摘要】：目的:建立由花生提取物诱导的口腔过敏综合征小鼠模型,并对该模型进行评价和深入探讨。方法:将20只6~8周龄雌性BALB/c小鼠,按随机原则分为正常对照组和模型组,每组10只。模型组小鼠在乙醚轻度麻醉下将花生粗提取物(Crude peanut extract,CPE)和霍乱毒素(Cholera Toxin,CT)以10:1(W/W)混合致敏液(浸泡在一个棉花球上)直接接触口腔双侧颊部黏膜,每日3次,连续14天;第15天,CPE(CPE 10 mg/只)通过接触小鼠口腔黏膜和灌胃激发。对照组小鼠同时期采用相同体积无菌PBS处理。对激发后的小鼠过敏症状进行评估。4h后处死小鼠,利用苏木素-伊红(Hematoxylin and eosin,HE)或甲苯胺蓝(Toluidine blue,TB)染色法对小鼠的口腔黏膜和空肠组织进行组织染色以及嗜酸性粒细胞(Eosinophils,EOS)和肥大细胞(Mast cell,MC)浸润情况检测,酶联免疫吸附法(Enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)测定血清CPE特异性Ig E(CPE-s Ig E)水平,血清小鼠肥大细胞蛋白酶-1(Mouse mast cell protease-1,m MCP-1)以及脾细胞培养上清液中白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)和干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)水平。结果:1.过敏症状评估:CPE抗原经口腔黏膜接触和灌胃激发小鼠后,小鼠全身过敏反应5~15 min内表现明显,最初的反应主要包括皮肤反应与口腔和嘴唇周围的浮肿,频繁搔抓嘴巴和摩擦鼻子,腹泻,活动减少,呼吸系统如气喘和呼吸困难,而PBS处理小鼠无任何过敏反应。CPE模型组小鼠过敏症状评分显著高于PBS对照组小鼠(p0.001),差异有统计学意义。2.苏木素-伊红染色显示,PBS对照组小鼠口腔黏膜很少见炎症细胞,CPE模型组小鼠口腔黏膜及黏膜下层EOS浸润,微小血管扩张、充血。甲苯胺蓝染色显示,CPE模型组小鼠口腔黏膜出现大量的MC,体积较大,形态不规则,部分MC呈脱颗粒状,PBS对照组则很少看到MC。与PBS对照组相比较,CPE模型组MC、脱颗粒MC、EOS数量均显著增多(p0.01),差异具有统计学意义。3.苏木素-伊红染色显示,CPE模型组小鼠空肠绒毛参差不齐,绒毛脱落或稀疏,结构破坏,黏膜固有层EOS数量明显增多;PBS对照组小鼠空肠黏膜结构完整,层次清晰,肠绒毛排列整齐。CPE模型组小鼠空肠黏膜可见较多的MC,其中有部分MC脱颗粒。与PBS对照组相比较,CPE模型组小鼠空肠MC、脱颗粒MC和EOS计数均增多(p0.05),差异具有统计学意义。4.与PBS对照组相比较,CPE模型组小鼠血清CPE特异性Ig E以及m MCP-1水平均有升高(p0.05),差异有统计学意义。5.与PBS对照组相比较,CPE模型组小鼠脾脏细胞培养上清液IL-4水平升高(P0.05),差异有统计学意义,而CPE模型组小鼠脾细胞培养上清液IFN-γ的表达与PBS组比较(p0.05),差异无统计学意义。结论:成功构建了花生抗原诱导的OAS小鼠模型,其口腔黏膜过敏反应由Ig E介导,同时伴有肠道黏膜过敏反应的发生。该模型模拟了人体OAS的致病过程,符合OAS的免疫学特点。
[Abstract]:The result is 1: 1.
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R-332;R781.2

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