尼古丁调控人牙周膜细胞自噬水平的实验研究

发布时间：2018-05-07 14:28

  本文选题：人牙周膜细胞 + 尼古丁　； 参考：《华西口腔医学杂志》2017年02期

【摘要】：目的探讨尼古丁对人牙周膜细胞(hPDLCs)自噬水平的影响。方法选取因正畸治疗而拔除的前磨牙,采用组织块法分离培养hPDLCs。通过Western blot法筛选尼古丁影响hPDLCs自噬的最佳作用时间及浓度,使用透射电子显微镜(TEM)和免疫荧光染色法检测该作用时间及浓度下hPDLCs自噬体形成情况和自噬标志蛋白LC3的表达情况。结果 LC3Ⅱ蛋白表达在尼古丁作用的12 h内持续升高,从而确定12 h为最佳作用时间;LC3Ⅱ蛋白表达上调具有尼古丁浓度依赖性,1×10~(-5) mol·L~(-1)为尼古丁最佳作用浓度。TEM和免疫荧光染色证实尼古丁在此浓度及作用时间下hPDLCs细胞质内自噬体的数量增加,自噬标志蛋白LC3表达升高。结论在一定条件下,尼古丁能够上调hPDLCs自噬水平,为进一步研究细胞自噬与吸烟相关牙周炎的关系奠定了基础。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of nicotine on autophagy of human periodontal ligament cells (hPDLCs). Methods premolars extracted by orthodontic treatment were isolated and cultured by tissue mass method. The best effect time and concentration of nicotine on hPDLCs autophagy were screened by Western blot method. The formation of hPDLCs autophagy and the expression of autophagy marker LC3 were detected by transmission electron microscopy (TEM) and immunofluorescence staining. Results the expression of LC3 鈪，

本文编号：1857285