透明质酸合酶-2在癌相关成纤维细胞促进舌癌细胞侵袭中的作用
本文选题:透明质酸合酶 + 癌相关成纤维细胞 ; 参考:《南京医科大学学报(自然科学版)》2014年02期
【摘要】:目的:检测透明质酸合酶2(hyaluronan synthase 2,HAS2)在正常成纤维细胞(normal zone fibroblasts,NFs)及癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)中的表达,并探讨其在CAFs介导的舌鳞癌细胞系Cal27侵袭行为中的作用。方法:分别从同一舌癌患者手术切除标本的癌组织及癌旁组织获取CAFs和NFs。免疫细胞化学、Western blot法鉴定细胞表型。实时定量RT-PCR及Western blot检测透明质酸合酶在两种细胞中的表达。利用Transwell小室共培养模型,观察CAFs及NFs对舌癌细胞系Cal27侵袭能力的影响。利用siRNA抑制CAFs中的HAS2,并分析其对Cal27侵袭能力的影响。结果:α-SMA表达于CAFs,NFs中几乎无表达。Cal27在CAFs组中的侵袭力显著高于NFs组及空白对照组(P0.01)。实时定量RT-PCR结果显示HAS2在CAFs中的表达是NFs的7倍(P0.01),蛋白水平则为NFs的3倍(P0.01);Cal27在HAS2干扰组的侵袭力显著低于CAFs组及无关序列组(P0.01)。结论:CAFs具有促进舌癌细胞侵袭能力的作用,高表达HAS2可能是其作用机制之一,抑制肿瘤微环境中CAFs的HAS2功能可能是一条新的抗肿瘤侵袭转移的途径。
[Abstract]:Aim: to detect the expression of hyaluronic acid synthase (2(hyaluronan synthase 2) in normal zone fibroblast cells (NFS) and cancer-associated fibroblasts (Cafs), and to investigate the role of hyaluronic acid synthase (HAS2) in the invasion of tongue squamous cell carcinoma cell line Cal27 mediated by CAFs. Methods: CAFs and NFS were obtained from the cancer tissues and adjacent tissues of the same tongue cancer patients. The phenotypes of the cells were identified by immunocytochemistry and Western blot. The expression of hyaluronidase was detected by real-time quantitative RT-PCR and Western blot. The effects of CAFs and NFs on the invasiveness of tongue cancer cell line Cal27 were studied by using Transwell chamber co-culture model. SiRNA was used to inhibit HAS2 in CAFs and its effect on Cal27 invasion was analyzed. Results: the invasiveness of 伪 -SMA in CAFs group was significantly higher than that in NFs group and control group (P 0.01). The results of real-time quantitative RT-PCR showed that the expression of HAS2 in CAFs was 7 times of that of NFs, and the protein level was 3 times that of NFs. The invasiveness of HAS2 in HAS2 interference group was significantly lower than that in CAFs group and unrelated sequence group (P0.01). Conclusion the high expression of HAS2 may be one of its mechanisms, and inhibiting the HAS2 function of CAFs in tumor microenvironment may be a new way of anti-tumor invasion and metastasis.
【作者单位】: 南京医科大学口腔医学院;
【基金】:江苏高校优势学科建设工程资助项目
【分类号】:R739.86
【共引文献】
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,本文编号:1947280
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