脐静脉内皮细胞与牙本质浸提液诱导的牙髓干细胞共培养成血管的研究

发布时间：2018-06-10 19:34

  本文选题：牙髓干细胞 + 牙本质　； 参考：《口腔医学研究》2017年05期

【摘要】：目的:探讨共培养牙本质浸提液(dentin extract,DE)诱导的人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)和人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)在成血管方向的潜能。方法:制备人牙本质浸提液,分别诱导培养hDPSCs 7d和14d后,Real-time PCR和Western blot检测诱导后hDPSCs中牙本质涎蛋白(DSP)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)和牙本质基质蛋白1(DMP-1)的表达;血管形成实验共分为5组,分别是:HUVECs组、DE诱导后的hDPSCs组以及按5∶1、5∶5、5∶10比例共培养HUVECs和诱导后hDPSCs组,分别在第3、6、9h检测各组小管形成的相对长度和节点数目。结果:DE诱导的hDPSCs在mRNA和蛋白水平上表达的DSP、DSPP和DMP-1显著提高(P0.05);体外小管形成实验结果示共培养组较早形成稳定的网状结构,在3h时,HUVEc与诱导后hDPSCs比例为5∶1组形成的小管相对长度和相对分支点数明显高于HUVECs组(P0.05),而5∶5组和5∶10组低于HUVECs组(P0.05)。结论:牙本质浸提液诱导后的hDPSCs与HUVECs按一定比例共培养可促进血管结构的形成。
[Abstract]:Aim: to investigate the potential of human dental pulp stem cells and human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) induced by dentin extract in vitro. Methods: human dentin extractions were prepared and cultured for 7 days and 14 days, respectively. Real-time PCR and Western blot were used to detect the expression of dentin sialoprotein (DSPP) and dentin matrix protein 1 (DMP-1) in hDPSCs. The hDPSCs were cultured in the proportion of 5: 1: 5: 5: 10, respectively. The relative length of tubules and the number of nodes in each group were measured at 6 and 9 hours after the induction of HUVECs, and the ratio of 5: 1 to 5: 5: 10 was used to detect the relative length of tubules and the number of nodes in each group. Results the expression of DSPP and DMP-1 on mRNA and protein levels of hDPSCs induced by 1: DE significantly increased P0.05, and the results of tubule formation in vitro showed that stable reticular structure was formed earlier in co-cultured group. At 3 h, the relative length and relative branch points of tubules formed in the 5:1 group were significantly higher than those in the HUVECs group (P 0.05), while those in the 5:5 and 5:10 groups were lower than those in the HUVECs group (P 0.05). Conclusion: the co-culture of hDPSCs and HUVECs induced by dentin extract can promote the formation of vascular structure.
【作者单位】： 哈尔滨医科大学口腔医学院牙体牙髓病科;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(编号:81570963)
【分类号】：R78

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本文编号：2004355