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骨形态发生蛋白9促进小鼠颅骨间充质祖细胞成骨分化的实验研究

发布时间:2018-07-18 09:07
【摘要】:目的研究腺病毒载体介导的骨形态发生蛋白9(BMP-9)对小鼠永生化颅骨间充质祖细胞(i CAL)成骨分化的诱导作用。方法以i CAL为模型,设置绿色荧光蛋白(GFP)对照组和BMP-9诱导组,于诱导后的3、5、7 d对早期成骨分化指标碱性磷酸酶(ALP)活性进行定性和定量检测;于诱导后的14 d通过茜素红染色检测骨钙结节形成;荧光定量PCR法和Western印迹检测成骨细胞分化标志基因Runx2、OCN表达情况。结果 BMP-9诱导组细胞内ALP活性高于GFP对照组,差异具有统计学意义(P0.05);BMP-9诱导组形成较多的钙盐结节沉积;荧光定量PCR检测结果显示诱导组中Runx2、OCN的mRNA表达量明显上调,差异具有统计学意义(P0.05),Western印迹检测3 d Runx2蛋白表达上调,5 d OCN蛋白表达上调。结论 BMP-9促进小鼠永生化i CAL成骨分化。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of adenovirus mediated bone morphogenetic protein 9 (BMP-9) on osteogenic differentiation of mouse immortalized skull mesenchymal progenitor cells (iCAL). Methods using iCAL as model, green fluorescent protein (GFP) control group and BMP-9 induction group were used to determine the activity of alkaline phosphatase (ALP) in early osteogenic differentiation index (ALP) on the 7th day after induction. Bone calcium nodule formation was detected by alizarin red staining on the 14th day after induction, and the expression of the osteoblast differentiation marker gene Runx2OCN was detected by fluorescence quantitative PCR and Western blotting. Results the intracellular ALP activity of BMP-9 induced group was higher than that of GFP control group, the difference was statistically significant (P0.05). The difference was statistically significant (P0.05). Western blot analysis showed that the expression of Runx2 protein was up-regulated on day 3 and OCN protein was up-regulated on day 5. Conclusion BMP-9 promotes osteogenic differentiation of immortalized iCAL in mice.
【作者单位】: 重庆医科大学附属口腔医院 口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室;重庆医科大学口腔医学院 重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室;
【基金】:国家自然科学基金资助项目(81301551) 重庆市基础科学与前沿技术研究专项资助项目(cstc2013jcyj A10022) 重庆高校创新团队建设计划资助项目(KJTD201304)
【分类号】:R782

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本文编号:2131428

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