光动力疗法对早期根面龋抑制作用的研究

发布时间：2018-10-30 14:08

【摘要】：目的：根面龋是危害老年人口腔健康的常见慢性细菌感染性疾病,随着我国老年人人口数量的逐年上升,根面龋的发病率也呈明显上升趋势。根面龋发展速度快,能在较短时间内发展成牙髓炎或根尖周炎,也是造成老年人牙折、牙齿丧失的重要原因,严重影响了老年人的日常生活。如何有效防治老年人根面龋已经成为一个社会性问题。附着在牙根面的菌斑生物膜是根面龋发生的根本原因,预防的关键在于清除这部分菌斑生物膜。光动力疗法(photodynamic therapy, PDT)是利用特定波长的光激活光敏剂产生光化学效应,从而杀伤病原微生物或病变组织的一种新疗法。近年来,光动力疗法在治疗感染性疾病方面的作用越来越受到重视,它可选择性杀伤病原微生物而不伤及周围正常组织。本研究首先利用波长532nm的半导体激光器和光敏剂血卟啉单甲醚(hematoporphyrin monomethylether, HMME)对三种主要根面龋致病菌粘性放线菌、变形链球菌、乳酸杆菌混悬液进行光动力作用,筛选出光动力疗法的最佳效应参数,然后在体外建立早期根面龋模型,通过观察光动力疗法对菌斑生物膜的杀伤、钙离子溶出量及根面龋表面形态影响,探讨其对早期根面龋的抑制作用,为临床应用光动力疗法抑制早期根面龋提供实验依据。方法： 1.粘性放线菌(A.viscosus ATCC19246)、变形链球菌(S.mutans UA159).乳酸杆菌(L.acidophilus ATCC4356)复苏厌氧培养48h,调整浓度制备成1×108CFU/mL的混合菌悬液。 2.波长532nm、功率密度0.14W/cm2半导体激光器分别照射30s、60s、90s与不同浓度光敏剂血卟啉单甲醚(hematoporphyrin monomethylether, HMME)20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml进行组合,对混合菌悬液进行作用,选择出光动力疗法的最佳效应参数。 3.收集因正畸拔除的前磨牙25颗及全唾液,利用以上三种致龋菌体外构建早期根面龋模型。用光动力疗法最佳效应参数进行作用,菌落计数,评价光动力疗法对早期根面龋表面菌斑生物膜的杀伤作用。 4.原子吸收分光光度计测定光动力疗法作用后早期根面龋的钙离子溶出量,评价光动力疗法对早期根面龋的抑制作用。 5.扫描电子显微镜观察光动力疗法对根面牙骨质表面形态影响。结果： 1.在本实验条件下,光动力疗法的最佳效应参数为：光敏剂HMME浓度40μg/ml；波长532nm、功率密度0.14W/cm2半导体激光器连续照射时间为60s。 2.光动力疗法对早期根面龋表面菌斑生物膜的杀伤实验结果显示,与生理盐水阴性对照组相比：单纯光敏剂组根面致龋菌数量无显著性差异(P0.05),杀菌率仅为1.23%；激光照射组和洗必泰组均能使根面致龋菌数量减少(P0.05),杀菌率分别为56.96%和60.62%,但二者之间无显著性差异(P0.05)；PDT组可使根面致龋菌数量显著减少(P0.05),杀菌率高达98.70%。 3.原子吸收分光光度计测定钙离子溶出量结果显示,在48小时内,各组钙离子溶出量(ug/mL)随时间的延长而增加。与生理盐水阴性对照组相比：单纯光敏剂组各时间点的钙离子溶出量无显著差异(P0.05)；单纯激光照射组与洗必泰阳性对照组均能使钙离子溶出量减少(P0.05),但二者之间无显著性差异(P0.05)；PDT组各时间点的钙离子溶出量均显著减少(P0.05)。PDT组与单纯激光照射组相比各时间点的钙离子溶出量仍显著减少(P0.05)。 4.扫描电子显微镜图像显示,光动力疗法组牙骨质表面结构完整,无细菌粘附,裂隙及陷窝减少,并有裂隙愈合痕迹,周围见微小钙化物沉积。进而表明,光动力疗法对早期根面龋菌斑生物膜中致病菌有很好的杀菌效果,不但阻止了根面牙骨质继续脱矿,而且促进了根面牙骨质的再矿化。结论： 1.在光敏剂HMME浓度40μg/ml；波长532nm、功率密度0.14W/cm2半导体激光器连续照射60s参数下,光动力疗法对体外游离的根面龋致病菌有很好的杀灭作用。 2.光动力疗法可有效杀灭牙根表面菌斑生物膜中的致龋菌,可减少早期根面龋的钙离子溶出量,不但阻止了根面牙骨质继续脱矿,而且促进了根面牙骨质的再矿化。光动力疗法可有效抑制早期根面龋,在根面龋的预防中具有广泛的临床应用前景。
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【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R781.1

【参考文献】