二烯丙基化三硫体外抗粪肠球菌生物膜作用的研究

发布时间：2020-03-26 02:38

【摘要】：目的：观察大蒜素对照品二烯丙基化三硫(dially trisulfide,DATS)体外对生物膜中粪肠球菌的杀灭或抑制作用。 方法：1、采用倍比稀释法测定DATS和盐酸多西环素对粪肠球菌标准菌株最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。2、采用MTT法测定不同时间点的粪肠球菌活性,绘制细菌生长曲线；在96孔细胞培养板上培养细菌,形成不同生长周期的细菌生物膜,MTT法测定不同浓度的DATS或盐酸多西环素对不同时期细菌生物膜的抑菌率。3、在牙本质片上培养细菌,激光共聚焦显微镜(CLSM)观察细菌生物膜形成过程中的形态特点；CLSM观察不同浓度的DATS或盐酸多西环素对不同生长周期细菌成熟生物膜的抗菌效果。 结果：1、实验组DATS对粪肠球菌的最小抑菌浓度(MIC)为1280μg/ml,最小杀菌浓度(MBC)为2560μg/ml;盐酸多西环素对粪肠球菌MIC为80μg/ml,MBC为160μg/ml。2、1280μg/ml DATS对对数期和饥饿期生物膜中粪肠球菌抑菌率约71%,显著高于对稳定期生物膜中粪肠球菌的抑菌率58%,其差异具有统计学意义(P0.05);2560μg/ml DATS和5120μg/ml DATS抗生物膜粪肠球菌效果显著优于1280μg/ml DATS,其差异具有统计学意义(P0.05);5120μg/ml DATS对饥饿期生物膜粪肠球菌的抑菌率达97%,显著高于其他浓度的DATS对各期生物膜粪肠球菌的抑菌率或该浓度DATS对其他两期的抑菌率,结果均具有统计学差异(P0.05)；对照组盐酸多西环素的浓度增高时抑菌率增大,80μg/ml的盐酸多西环素抗对数期或饥饿期生物膜粪肠球菌的抑菌率与5120μg/ml DATS比较,差异性不具有统计学意义(P0.05),但该浓度盐酸多西环素对稳定期生物膜粪肠球菌的抑菌率优于DATS组,差异性具有统计学意义(P0.05)。3、粪肠球菌生物膜具有立体空间结构,生物膜由红染区(死细菌)与绿染区(活细菌)组成。对数期、稳定期、饥饿期生物膜均经历粘附、发展、成熟三个阶段,从粘附期至成熟期生物膜厚度增加,更结实致密；相同阶段生物膜,饥饿期较对数期、稳定期细菌密度低,结构疏松,表面粗糙。实验组DATS和对照组多西环素均能使粪肠球菌生物膜的激光共聚焦显微影像红染面积增加,即能杀灭或抑制生物膜粪肠球菌；且随浓度增加,红染面积增大,细菌生物膜更分散疏松。 结论：1、DATS对生物膜中的粪肠球菌具有明显杀灭或抑制作用。2、DATS能破坏粪肠球菌的生物膜结构,杀灭生物膜内部的细菌。3、DATS对饥饿期粪肠球菌生物膜杀灭作用良好。
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R780.2

【参考文献】

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本文编号：2600824