重组人干扰素α-2b对腭裂术后瘢痕成纤维细胞影响的实验研究

发布时间：2020-03-26 13:06

【摘要】： 目的:先天性腭裂目前主要通过腭裂手术进行修复,但术后患者上颌骨的继发畸形会变得更加严重,影响患者的面容美观。其主要原因是腭裂术后遗留在上颌骨硬腭的裸露骨面瘢痕挛缩所致。要改善这种继发畸形的产生,必须要减少腭裂术后裸露骨面瘢痕形成。成纤维细胞在瘢痕的形成中是主要的效应细胞。本实验将观察重组人干扰素α-2b(rhIFNα-2b)对体外培养的腭裂术后裸露骨面瘢痕来源的成纤维细胞生物学作用的影响,探索rhIFNα-2b影响腭裂术后裸露骨面瘢痕作用的依据。 方法:首先在活体成年大耳白兔上建立腭裂术后裸露骨面瘢痕动物模型;将瘢痕组织切取后,利用体外细胞培养技术进行腭裂术后瘢痕成纤维细胞的原代及传代培养;将细胞因子rhIFNα-2b加入到培养的成纤维细胞中,分别通过MTT法、3H-TdR渗入法、流式细胞术等方法观察、分析rhIFNα-2b对腭裂术后瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响,数据采用方差分析及q检验处理。 结果:(1)MTT比色实验测定结果显示:加入rhIFNα-2b培养48h后,实验组与对照组比较, 4000、6000、8000、10000U/ml浓度组OD值明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。提示rhIFNα-2b抑制腭裂术后瘢痕成纤维细胞生长增殖,并且这种抑制作用呈现出浓度依赖性。(2)3H-TdR掺入法结果显示:加入rhIFNα-2b培养48h后,实验组与对照组比较, 4000、6000、8000、10000U/ml浓度组cpm值明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。提示rhIFNα-2b抑制腭裂术后瘢痕成纤维细胞DNA合成,并且这种抑制作用呈现出浓度依赖性。(3)流式细胞术结果显示:加入rhIFNα-2b作用48h,实验组与对照组比较,4000、6000、8000、10000U/ml浓度组处于G1期的百分比均明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。随着药物浓度加大,DNA合成前期(G1)细胞百分数增多,呈现出浓度依赖性。提示rhIFNα-2b抑制腭裂术后瘢痕成纤维细胞生长增殖。 结论:rhIFNα-2b对腭裂术后瘢痕成纤维细胞的生长趋势及增殖活性具有明显抑制作用,提示rhIFNα-2b是腭裂术后瘢痕成纤维细胞负性调节因子,说明rhIFNα-2b在防治腭裂术后裸露骨面瘢痕的形成中有一定的应用价值。
【图文】：

兔腭裂术后裸露骨面动物模型的建立

组织块法培养腭裂术后裸露骨面瘢痕成纤维细胞
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R782

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本文编号：2601480