粪肠球菌对大鼠实验性根尖周炎TRAF-6的表达影响研究

发布时间：2020-03-28 09:55

【摘要】：目的:研究粪肠球菌在大鼠根尖周炎过程中,对肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)的表达影响。方法:选取成年雄性SD大鼠39只,以右下颌第一磨牙为研究对象,将36只鼠随机均分成两个实验组,A组将牙合?面开髓,髓腔直接暴露于口腔环境中;B组牙合面开髓后,封入粪肠球菌悬液。余下3只鼠不做任何处理,为健康对照组。A、B两组再分别分为2W、4W、6W三个亚组,每组6只。分别在术后2W、4W、6W时拍摄X线片和CBCT;在2W、4W、6W三个时间点,每组取3只鼠,以心内灌流固定法处死大鼠,取下颌第一磨牙及其近远中的根尖周牙槽骨,制作冰冻切片,进行HE染色、免疫组化染色及酶组化染色;同时,取每组另外3只鼠,刮取下颌第一磨牙根尖周组织,提取组织总RNA,进行RT-PCR反应。对实验结果利用SPSS统计软件进行t检验和方差分析。? 结果: 1.X线片及CBCT结果 A、B组术后2W,X线片及CBCT均未见根尖周牙槽骨异常;术后4W及6W,X线片及CBCT显示根尖周牙槽骨吸收,根尖周阴影明显,确认成功建立大鼠根尖周炎模型。对照组未见根尖周阴影。 2. HE染色结果 A、B组术后2W时,根管内牙髓全部坏死,根尖周区域可见大量巨噬细胞和中性粒细胞浸润;术后4W时,淋巴细胞浸润增多,在根尖周的牙槽骨区域出现Howship陷窝,术后6W时淋巴细胞浸润更多,且根尖周牙槽骨出现脓腔。对照组根尖周的牙槽骨区域未见异常。 3.免疫组化染色结果术后2W、4W、6W,TRAF-6在A组、B组的根尖周牙槽骨区域的破骨细胞中均呈阳性表达;并且TRAF-6阳性表达,分别在A组、B组的2W、4W、6W三个亚组中,逐渐降低,差异具有统计学意义(P0.05)。同时,TRAF-6阳性表达,在术后2W、4W、6W三个时间点,均是B组高于A组,差异具有统计学意义(P0.05)。 4.酶组化染色结果 A组与B组术后2W,第一磨牙根尖周区域的牙槽骨内可见大量TRAP染色阳性的破骨细胞;术后4W,破骨细胞数量迅速下降;术后6W,仅见少量破骨细胞;对照组根尖周区域的牙槽骨仅可见少量的破骨细胞。A组与B组术后2W与4W、2W与6W、4W与6W之间破骨细胞的表达有明显差异,具有统计学意义(P0.05)。且B组破骨细胞数量大于A组,有明显差异,具有统计学意义(P0.05)。 5.RT-PCR结果 A组、B组在术后2W时,TRAF-6的mRNA表达都高于4W及6W,差异有统计学意义(P0.05);但4W组与6W组之间差异无统计学意义(P0.05) 结论: 1.肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)参与了根尖周炎的整个过程,TRAF-6的表达情况与根尖周炎密切相关。 2.肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)与粪肠球菌感染为主的根尖周炎其密切相关;粪肠球菌可能使TRAF-6的表达高于常规的由髓腔直接暴露引起的根尖周炎过程中TRAF-6的表达。 3.在以粪肠球菌感染为主的根尖周炎过程中,粪肠球菌可能加快了破骨细胞的分化,也促进了根尖周骨吸收的进程。
【图文】：

下颌第一磨牙,根尖,牙周膜,观察图

12图1 术后4W X线片观察图1显示大鼠右侧下颌第一磨牙牙周膜明显增宽，近远中根尖区均出现明显阴影。图2 术后4W CT观察图2显示术后4W，右侧下颌第一磨牙近远中根尖区可见一类圆形低密度影，大小约1cm×1cm，边界清晰，所示其他骨质未见异常；左侧为正常对照组，，下颌第一磨牙根尖区无阴影出现，所示骨质未见异常。图3 髓腔直接暴露组与根管内封入粪肠球菌组不同时间点TRAF-6的表达变化* P<0.05，差异有统计学意义TRAF-6阳性细胞在各组（2W、4W、6W）之间差异均有统计学意义。

下颌第一磨牙,根尖,观察图,低密度

图1 术后4W X线片观察图1显示大鼠右侧下颌第一磨牙牙周膜明显增宽，近远中根尖区均出现明显阴影。图2 术后4W CT观察图2显示术后4W，右侧下颌第一磨牙近远中根尖区可见一类圆形低密度影，大小约1cm×1cm，边界清晰，所示其他骨质未见异常；左侧为正常对照组，下颌第一磨牙根尖区无阴影出现，所示骨质未见异常。图3 髓腔直接暴露组与根管内封入粪肠球菌组不同时间点TRAF-6的表达变化* P<0.05，差异有统计学意义TRAF-6阳性细胞在各组（2W、4W、6W）之间差异均有统计学意义。
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R781.34

【参考文献】