胶原蛋白海绵对拔牙创愈合过程中基因表达的影响

发布时间：2020-03-31 22:49

【摘要】：拔牙创愈合是一个涉及从血凝块形成,血凝块机化、肉芽组织形成,上皮覆盖拔牙创,最后骨组织开始形成的复杂的骨愈合过程。在这个过程中,拔牙创的愈合及牙槽骨的骨量维持对于种植义齿修复极为关键。目前文献中报道的促进拔牙创愈合的方法因手术方式复杂,价格昂贵,患者心理拒绝等因素很难在临床普及应用。因而,探索一种简便操作,可有效减少骨吸收,缩短修复等待时间的方法极为迫切。胶原蛋白海绵有良好的生物相容性、较强的止血效果及吸附功能,便于局部沉积钙离子和磷酸根离子,能为拔牙后骨腔的血块凝集提供足够的立体空间,可有效地促进成骨。目前临床中普遍采用胶原蛋白海绵填塞颌骨囊肿手术后的骨腔及埋伏牙骨腔取得良好的止血效果,同时囊腔成骨速度也明显提高。关于胶原蛋白海绵促进牙槽窝愈合的实验研究相继被报道,但缺乏基因水平研究。本实验旨在研究胶原蛋白海绵植入对于牙槽窝组织中碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)基因、Osterix基因、Runt相关转录因子-2(runt-related transcription factor-2,Runx2)基因、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,Vegf)基因早期表达水平变化的影响,为探索胶原蛋白海绵促进成骨的机制研究提供了初步的参考资料,进而从分子水平为胶原蛋白海绵的临床应用提供实验依据。研究目的探索胶原蛋白海绵植入对牙槽窝组织成骨相关基因的表达水平变化的影响。研究方法1.建立大鼠拔牙模型:用10%水合氯醛将SD大鼠麻醉后,仰卧位固定于手术台上,术区采用碘伏消毒,分离右侧上颌第一磨牙牙龈,用口腔探针的三弯端从上颌第一磨牙腭侧插入根分叉,轻轻撬动,直至牙齿松动脱位,将胶原蛋白海绵放入牙槽窝,至骨水平,缝合固定。左侧为对照侧,同法拔除上颌第一磨牙,复位缝合,缝线均采用5-0可吸收缝线,均缝合一针。注意观察大鼠呼吸,避免窒息。老鼠术后复苏良好,饮食活动正常。分别在术后1周、2周、4周、8周各处死老鼠4只,取老鼠拔牙窝的牙槽骨及肉芽组织,进行基因检测。2.运用实时定量PCR检测成骨相关基因表达:按照试剂盒操作步骤,对样本进行RNA提取,反转录后得到cDNA,置于冰箱,-20℃保存。之后运用实时定量PCR法测定相关基因表达情况。采用2-△△CT法计算实验组与对照组相关基因的表达差异。研究结果1.ALP基因、Osterix基因、Runx2基因、Vegf基因在实验侧组织及对照侧组织中均有表达,且在术后1周、2周、4周、8周,实验侧组织各基因表达水平显著高于对照侧。2.实验侧组织中,ALP基因表达高峰出现在术后第2周,Osterix基因、Runx2基因、Vegf基因表达高峰出现在术后第4周。结论1.ALP基因、Osterix基因、Runx2基因、Vegf基因在实验侧组织及对照侧组织中均有表达,胶原蛋白海绵填塞拔牙创能够在一定程度上调这些基因的表达水平。2.胶原蛋白海绵填塞拔牙创后ALP基因、Osterix基因、Runx2基因、Vegf基因的表达量随时间推移呈现先上升随后下降的趋势。
【图文】：

术后第1周

术后第2周
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R782.11

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本文编号：2609676