力学刺激对人腺样囊样癌高低转移细胞株粘附、侵袭和增殖的影响

发布时间：2020-04-08 14:08

【摘要】： 本文通过观察周期性双轴力学刺激对腺样囊性癌高转移细胞株ACC-M、腺样囊性癌低转移细胞株ACC-2的E-cad和α-cat、β_cat、γ-cat表达以及ACC细胞和细胞外基质的粘附的影响，研究力学刺激在ACC-M、ACC-2细胞粘附过程中的作用，探讨腺样囊性癌的粘附机制；通过观察周期性双轴力学刺激对ACC-M、ACC-2体外侵袭力以及MMP-9表达的影响，研究力学刺激对ACC-M、ACC-2细胞体外侵袭过程的作用，探讨腺样囊性癌的侵袭机制；通过观察周期性双轴力学刺激对ACC-M、ACC-2增殖的影响，研究力学刺激在ACC-M、ACC-2细胞增殖过程中的作用，探讨腺样囊性癌的增殖机制。从而为进一步探讨肿瘤受到力学刺激后癌细胞的生物学效应机制奠定基础，指导临床工作。实验采用成组设计方法，分别选取频率为3次/min的1000、4000μ应变对ACC-M、ACC-2细胞分别加载，每天定点加载1次，每组加载时间分别为每次1hr、3hrs和6hrs，共加载2次。第3d上午8点收获细胞；同时每次力学加载均在相同培养小室中做静态对照实验。以未受力学刺激的细胞为对照组，受力学刺激的细胞为实验组，并进行比较。细胞在力学刺激后行MMP-9、E-cad和α-cat、β-cat、γ-cat和细胞核免疫荧光双染色，用激光共聚焦显微镜和图象分析软件进行定位观察和定量分析。用MTT法测定ACC-M、ACC-2细胞和ECM的粘附率。用transwell小室行ACC-M、ACC-2细胞体外侵袭力测定，计数每个视野穿透matrigel的癌细胞数目，结果用x±s表示。用流式细胞仪检测ACC-2、ACC-M增殖。结果发现对照组除ACC-2细胞E-cad表达低于ACC-M细胞外，ACC-2细胞α-cat、β-cat、γ-cat表达均高于ACC-M细胞。对照组MMP-9在ACC-M细胞表达明显高于ACC-2细胞，提示MMP-9与ACC的侵袭有密切关系。对照组ACC-2-ECM粘附率高于ACC-M-ECM细胞。对照组ACC-M的增殖水平较ACC-2高。不同大小的力学刺激及作用时间对ACC细胞和ECM的粘附率、增殖活性、侵袭能力、E-cad和α-cat、β-cat、γ-cat、MMP-9表达的影响具有统计学意义，并且这种影响还具有随时间延续而变化的特性。综上所述，ACC-M、ACC-2细胞在力学刺激后出现E-cad和cat复合体表达改变，同时还改变其和ECM的粘附率，，显示力学刺激后细胞粘附发生变化，在肿瘤转移中可能发挥重要的作用。ACC-M、ACC-2细胞在力学刺激后出现侵袭能力的改变，同时还可改变其MMP-9表达，显示力学刺激可以调节肿瘤转移，我们认为有MMP-9之外的蛋白在其中起作用。发现力学刺激对细胞增殖有影响并与力学刺激大小和作用时间相关，对肿瘤细胞施以力学刺激，分析其对肿瘤细胞生长行为的影响，对认识肿瘤增殖的调控有一定意义。
【学位授予单位】：四川大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R739.8

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