新疆博州地区三民族儿童口腔变形链球菌的分布及其与患龋的相关性研究

发布时间：2020-04-16 18:04

【摘要】：目的:研究新疆博州地区3~5岁汉族、维吾尔族、蒙古族儿童口腔内变形链球菌的检出率,分析不同龋敏感儿童口腔中变形链球菌基因型与儿童龋病间的相关性。方法:从新疆博州地区儿童口腔流行病学调查资料样本库中分层随机抽取90名儿童为研究对象,高龋组(龋失补牙数≥5)及无龋组(龋失补牙数=0)各45人,每组中汉族、维吾尔族、蒙古族儿童各15人,收集牙菌斑样本,用轻唾-杆菌肽琼脂培养基和脑心浸液培养基培养变形链球菌,通过革兰染色,生化鉴定和聚合酶链反应等方法进一步鉴定临床分离株,并通过随机引物聚合酶链式反应检测基因型分布。结果:(1)在90名受检儿童中变形链球菌的检出率为75.5%,高龋组变形链球菌的检出率为86.7%,高于无龋组的64.4%(P=0.014)。汉族、维吾尔族、蒙古族比较时,变形链球菌的检出率差异无统计学意义(P=0.457)。(2)本实验共获得549株变形链球菌临床菌株,发现113种不同的基因型。高龋组中61.5%的个体具有两种及两种以上变形链球菌基因型,无龋组中仅有37.9%的个体具有两种及两种以上的基因型,高龋组的变形链球菌基因多态性高于无龋组,差异具有统计学意义(P=0.035)。(3)趋势卡方检验结果表明,三民族儿童口腔内变形链球菌基因多态性与龋敏感度有线性相关关系(趋势χ~2=4.767,P=0.029)。结论:博州地区儿童口腔内变形链球菌在不同龋敏感组间的分布有差异,在民族间无差异,高龋组群体中存在的变形链球菌比无龋组拥有更多的基因型数量,其基因多态性可能与变形链球菌的致龋能力相关。
【图文】：

形态图,变形链球菌,形态,革兰氏染色

1.1 变形链球菌菌落检测和细菌形态学鉴定MSB培养基上菌落肉眼观察结果：圆形，深蓝色，直径约1mm左右，菌落嵌入琼脂中，高度凸起、坚硬、边缘不整齐。（图1A）革兰染色后，油镜下（×100）观察到变形链球菌为革兰阳性小球菌，菌落散在分布，部分菌落为短链或中等长链状。（图1B）图 1 变形链球菌在 MSB 培养基形态(A)及革兰氏染色后的镜下形态(B)（×100）Fig.1 Streptococcus mutans morphology in MSB(A) and Gram stain(B)(×100)1.2 变形链球菌生化鉴定通过细菌微量生化反应管鉴定具有变形链球菌典型形态的临床分离株, 结果如图 2。甘露醇、山梨醇、棉子糖、密二糖的发酵实验阳性显示为黄色，精氨酸阳性呈红色，七叶苷水解阳性则呈深棕色。变形链球菌标准菌株 UA159 生化鉴定结果：甘露醇、山梨醇、棉子糖、密二糖、七叶苷呈阳性结果，，精氨酸为阴性结果；无菌生理盐水反应结果均为阴性。1.3 变形链球菌的 PCR 鉴定使用特异性引物 gtfB 和 gbpB 对变形链球菌标准菌株和临床分离株的基因组DNA 进行扩增，PCR 扩增产物行琼脂糖凝胶电泳，电泳图谱显示变形链球菌临床分离株及阳性对照标准菌株 UA159 的扩增产物均为单一条带

变形链球菌,七叶苷,蜜二糖,棉子糖

图 2 变形链球菌生化鉴定结果Fig.2 Biochemical identification results of Streptococcus mutans甘：甘露醇；山：山梨醇；棉：棉子糖；蜜：蜜二糖；精：精氨酸；七：七叶苷；阳照组变形链球菌UA159；阴：阴性对照组无菌生理盐水；1～14：变形链球菌临床分离
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R788.1

【参考文献】