鲑降钙素对成牙骨质细胞增殖、分化及矿化影响的体外实验研究

发布时间：2020-04-21 03:18

【摘要】：目的:研究不同浓度的鲑降钙素在不同时间点对鼠源成牙骨质细胞株OCCM-30的增殖、分化、矿化、凋亡及细胞周期的影响,为鲑降钙素是否能够干预牙根吸收及其可能的干预机制提供前期实验研究基础。方法:将体外培养的鼠源成牙骨质细胞株OCCM-30分为6组,加入不同浓度鲑降钙素(0.1IU/L、1IU/L、10IU/L、100IU/L、1000IU/L)培养的OCCM-30作为实验组,只加入培养液的OCCM-30作为对照组。本实验对以下项目进行检测:MTT法在不同的时间(24h、48h、72h)检测细胞的增殖情况;微量酶标法检测不同时间点(48h、72h)OCCM-30的碱性磷酸酶(ALP)活性;茜素红法在第14天测定细胞矿化结节的含量;使用流式细胞仪对培养至第三天的OCCM-30的凋亡及周期进行检测。实验数据利用SPSS 18.0进行统计分析。结果:1.OCCM-30的MTT检测结果:不同浓度的鲑降钙素作用OCCM-30 24h、48h、72h后,各实验组与对照组吸光度值分析结果显示:鲑降钙素作用24h的细胞增殖差异并不显著,仅100IU/L组有统计学意义(P0.05),能够促进OCCM-30的增殖;作用48h,10IU/L、100IU/L、1000IU/L的鲑降钙素对OCCM-30细胞增殖有促进作用;作用72h,仅有0.1IU/L的鲑降钙素对OCCM-30的增殖促进作用不显著,其余浓度(1IU/L、10IU/L、100IU/L、1000IU/L)均明显促进OCCM-30的增殖,且100IU/L促进作用最为明显,差异具有高度统计学意义(P0.01),并且在72小时内,鲑降钙素对OCCM-30的促增殖作用随着时间的延长而增强。2.微量酶标法检测碱性磷酸酶(ALP)活性结果:不同时间点(48h、72h)鲑降钙素对OCCM-30细胞ALP活性呈现促进作用,但低浓度无显著意义,一定浓度(10-1000IU/L)明显促进,其中100IU/L的鲑降钙素对OCCM-30细胞ALP活性的促进作用最为明显,差异具有统计学意义(P0.01)。并且72h的OCCM-30的ALP活性均大于48h,说明OCCM-30的ALP活性随时间增加而提高。3.茜素红染色实验测定矿化实验结果:OCCM-30在经矿化诱导后可以生成矿化结节,但低浓度鲑降钙素(0.1IU/L、1IU/L、10IU/L)的促进作用不明显,差异无统计学意义;高浓度鲑降钙素(100IU/L、1000IU/L)促进矿化的作用具有统计学意义(P0.01),且在100IU/L组达到峰值,表明100IU/L的鲑降钙素是促进OCCM-30矿化的适宜浓度。4.细胞凋亡实验结果:血清饥饿可以引起OCCM-30细胞的凋亡,而加入不同浓度的鲑降钙素可以抑制OCCM-30的凋亡,并且抑制效果随着鲑降钙素浓度升高而升高,1000IU/L鲑降钙素抑制细胞凋亡的效果最为明显,差异具有统计学意义(P0.01)。5.细胞周期实验结果:不同浓度的鲑降钙素(1IU/L、10IU/L、100IU/L、1000IU/L)均能够提高细胞的增殖指数(PI),且100IU/L的鲑降钙素对OCCM-30的增殖指数提高最为明显,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:1.一定浓度的鲑降钙素对OCCM-30的增殖、分化具有促进作用,且随着时间的增加,鲑降钙素的促增殖、促分化作用逐渐增强。2.矿化诱导可以刺激OCCM-30生成矿化结节,且一定浓度的鲑降钙素对OCCM-30的矿化结节生成具有促进作用。3.血清饥饿可以引起OCCM-30的凋亡,鲑降钙素对OCCM-30凋亡的抑制作用呈浓度依赖性。4.不同浓度的鲑降钙素可以影响OCCM-30的细胞周期,上调细胞增殖指数。
【图文】：

鲑降钙素,吸光度

图 1 OCCM-30 镜下图（100×）图 2 OCCM-30 镜下图（200×）鲑降钙素对 OCCM-30 增殖的影响用 MTT 法测定 OCCM-30 的吸光度，将测得的结果计算后，不同时间

鲑降钙素,吸光度

图 1 OCCM-30 镜下图（100×）图 2 OCCM-30 镜下图（200×）鲑降钙素对 OCCM-30 增殖的影响用 MTT 法测定 OCCM-30 的吸光度，将测得的结果计算后，不同时间
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R783.5

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