雌激素对去势雌鼠牙周炎模型中HSP27表达的观察研究

发布时间：2020-04-28 07:27

【摘要】：研究目的： 1．在大量查阅国内外文献的基础上，构建SD（Sprague-Dawley）雌鼠实验性牙周炎模型，并在不同的雌激素水平干预下，分别观察大鼠牙周炎的发展；通过HE染色观察大鼠组织形态学的改变，为研究雌激素对牙周炎发展的影响提供前提和实验条件。 2．对不同雌激素水平下大鼠血液指标进行检测，对检测数据进行比较与分析；并对其牙周炎病理变化过程中HSP27的表达及变化状况进行观察，探讨牙周炎发病机制中HSP27所起的作用及意义。研究方法： 1．构建内源性雌激素缺乏的大鼠模型：取健康清洁级雌性SD大鼠33只（由山西医科大学实验动物中心提供），鼠龄26周左右，体重约240g左右，，牙列完整，咬合正常，无龋坏及牙周病。随机分为3组，分别为：SHAM组（11只），OVX组（11只），OVX+E组（11只），在大鼠适应性喂养7d后，对各组行假手术或行双侧卵巢切除手术。OVX+E组在术后第二天皮下注射17β—雌二醇，规格为20μg/kg，三天一次。OVX组在整个实验过程中不以任何形式补充17β—雌二醇。 2．构建SD雌鼠实验性牙周炎动物模型：以上三组在术后第三周行牙周结扎术。使用正畸结扎丝对大鼠左侧上颌第一磨牙进行结扎，打结于腭侧，并将结扎处置于大鼠龈下。右侧大鼠牙齿留作对照，不做处理。于牙周结扎术后第2、4、6周观察各组大鼠牙周炎发展的临床表现，并分别对三组随机抽取3只大鼠行内眦静脉取血后处死。同时取各组大鼠双侧上颌牙槽骨标本。 3．检测阶段：内眦血常规化验雌激素含量，观察雌激素水平的变化；大鼠双侧上颌骨标本经脱钙，包埋，组织切片，H.E染色等过程，在光学显微镜观察牙周组织病理改变，并加入HSP27抗体，在免疫组化染色后电子扫描显微镜观察HSP27的表达范围及强度，并进行分析。研究结果： 1．体重变化结果：本课题三组雌鼠的体重在实验前及手术后一周组间均无显著差异；在假手术或双侧卵巢切除手术后第二周至实验结束每周OVX组大鼠体重的增长值较SHAM组和OVX+E组高，OVX组大鼠体重增长速度快；在假手术或双侧卵巢切除手术后第二周至实验结束SHAM组和OVX+E组每周大鼠体重的增长值无显著差异。 2．本课题成功构建内源性雌激素缺乏的大鼠模型。在牙周结扎术后2、4、6周对三组雌鼠内眦血常规化验，结果表明，OVX组的雌激素水平的降低程度在各个时点差异明显；SHAM组和OVX+E组的雌激素水平组间与组内在各个时点无显著差异； OVX组的雌激素水平与SHAM组和OVX+E组各个时点差异明显。实验结束后大鼠尸解发现OVX组大鼠子宫较SHAM组明显萎缩，也无法找到卵巢，说明卵巢切除术可成功建造雌激素缺乏模型。但OVX+E组子宫较SHAM组有不同程度的增粗与肥大，可见雌激素对子宫有直接作用。并不一定与卵巢存在与否有直接关系。 3．本课题成功构建大鼠实验性牙周炎动物模型。三组雌鼠在牙周结扎术前后饲养环境不变，仍为12h日夜更替，饲料均为大鼠标准饲料，各组大鼠自由饮水。在牙周结扎术后2w、4w、6w观察各组大鼠牙周炎的临床表现，并取标本进行HE染色切片观察。结果表明，在牙周结扎术后2w各组大鼠牙龈略显红色，探诊有轻度出血等状况，各组在2w、4w、6w牙周探诊程度加深，在实验过程中OVX组较SHAM组和OVX+E组牙周炎程度较重。实验表明，本课题成功构建了雌鼠牙周炎模型。 4．HSP27的表达结果：在牙周炎发展的过程中，雌激素的水平对HSP27的表达有着不同程度的影响。牙周炎发展的早、中期各组大鼠牙周组织中HSP27表达高于同体对侧正常水平；牙周炎晚期各组大鼠牙周组织HE切片中HSP27表达与同体对侧正常水平无显著差异。雌激素治疗对HSP27表达的影响表现为，在牙周炎早、中期雌激素水平越低，牙周组织中HSP27表达高于同体对侧正常水平，牙周炎发展的晚期各组大鼠牙周组织中HSP27表达与同体对侧正常水平无显著差异。本课题实验结果提示，雌激素对牙周组织中HSP27表达的影响是通过干预牙周炎的进程为中介的，但起作用机制还有待探讨。结论： 1．雌激素水平的高低会对大鼠的体重会产生影响，随着时间的推移，大鼠雌激素缺乏或水平较低将会会引起大鼠体重的快速增长。 2．雌激素水平高低会影响牙周炎的病理发展过程，大鼠内源性的雌激素缺乏会加重牙周炎的程度。 3．在牙周炎发展的早、中期HSP27的表达与炎症程度呈正相关，与雌激素水平呈负相关。在牙周炎发展的晚期，HSP27的表达趋于正常水平。HSP27表达水平变化的机制有待进一步研究。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R781.42

【参考文献】