腺病毒介导TWEAK基因对大鼠骨髓间充质干细胞作用研究

发布时间：2020-05-03 13:04

【摘要】： 各种原因引起的骨组织缺损是较常见的后天畸形,不仅引起功能障碍,而且影响患者的生存质量,常规的自体和异体植骨方法并不能取得令人满意的效果,随着分子生物学技术的发展,血管化组织工程骨有望解决这一问题。在血管化组织工程骨的构建中,种子细胞的增殖和定向分化始终是研究的难点,BMSCs作为种子细胞是理想的骨组织工程细胞,具有较强的增殖和向成骨定向分化的能力。肿瘤坏死因子样弱凋亡因子(TWEAK),是TNF超家族成员,体外实验中显示TWEAK可以促进内皮细胞的增殖和迁移,能提高FGF-2和VEGF-A的活性,调节内皮细胞增殖、迁徙,提示激活TWEAK通路可能对骨组织损伤后血管重建有重要作用。本研究针对血管化组织工程骨构建中血管形成速度较慢,导致骨组织恢复受影响的缺点,根据TWEAK基因具有促进微血管发生和重建的功能,采用同源重组方法,构建Ad5CMV-TWEAK转基因腺病毒载体,将其转染BMSCs,采用多种生物学技术检测TWEAK基因对BMSCs生物学行为和血管发生作用,实验结果显示腺病毒介导TWEAK基因能高效转染BMSCs,外源性TWEAK对BMSCs没有明显的成骨诱导作用,但能诱导BMSCs向血管内皮细胞分化,并能促进血管内皮细胞形成血管结构,实验结果为将来体内实验奠定了理论基础和实验技术基础,有望成为血管化组织工程骨构建的新策略。
【图文】：

4h换液时细胞生长情况（倒置荧光显微镜×200）

2h细胞长满80%瓶底（倒置荧光显微镜×200）
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R78

【参考文献】

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1 路艳蒙,傅文玉,朴英杰,乔东访,安连兵;人骨髓间充质干细胞的超微结构[J];电子显微学报;2002年04期

2 王亭忠,马爱群,蒋文慧,徐正云,席雨涛;大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及GFP转染标记[J];西安交通大学学报(医学版);2005年05期

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本文编号：2647571