在实验性牙移动伤害感受中的作用

发布时间：2020-05-03 12:58

【摘要】：疼痛是正畸治疗中常见的问题之一。通常在加力后几小时出现，持续几天后消失。目前对正畸致痛机制的研究大多局限于牙周组织内的神经改变，而对初级感觉神经元胞体及其中枢末梢端改变的研究很少。传导口颌面部疼痛的初级感觉神经元位于三叉神经节(TG)，其外周突伸向外周组织，感受外周刺激；中枢突将外周信息传至三叉神经脊束核尾侧亚核(Vc)，在此中继后传至上位脑中枢，完成初级感觉信息的传递。因此，探讨在正畸加力状态下，这些神经元上特异表达的受体、通道或信号转导分子发生的可塑性变化，有助于我们阐明正畸疼痛的发病机制。 其中，CGRP是极为重要的疼痛兴奋性递质。其在初级感觉神经元合成、表达和释放的增加是神经元兴奋性增高、致敏的标志，也是机体产生慢性疼痛的主要机制。因此，观察正畸加力后TG及其周围突和中枢突CGRP的变化，能明确正畸加力是否发生了初级中枢的敏化现象，有助于了解正畸致痛的机制。 另外，大量研究显示神经生长因子(NGF)在痛觉过敏及异常疼痛中发挥重要作用。损伤局部区域内的NGF通过与支配该区域感觉神经末稍上的高亲合力受体TrkA结合后，逆转运至神经元胞体，导致神经元发生可塑性改变，合成神经肽增加，从而使初级感觉神经元致敏，导致痛觉过敏。而有关牙周膜内NGF高亲合力受体-TrkA的报道很少。 针对上述研究现状，我们设计本实验： 第一部分： 实验性牙移动cGRP在初级感觉神经元的改变 目的：观察实验性牙移动后，初级感觉神经元兴奋性递质CGRP的合成、外周及中枢端末梢释放的状况。分析正畸疼痛时，初级感觉神经元痛信号发生、传导以及敏感化机制。 解放军军医进修学院博士论文 中文摘要 方法:制备大鼠实验性牙移动动物模型，采用Rl’- pCR方法观察不同时间 点三叉神经节CGR卫mRNA表达的变化。采用免疫组织化学染色方法，观察 牙髓、牙周膜、TG及vc内CGRP免疫阳性结构的改变。 结果: (1)实验性牙移动后牙髓、牙周膜内CGRP一ir神经纤维染色强度先减少而 后增加。实验侧牙髓及牙周膜内CGRP一i:神经纤维在加力后6H、24H组明 显少于对照组;3D组较对照组增多;lw组增多最为明显;ZW组逐渐恢复 至对照组水平。 (2)实验性牙移动后6H组实验侧TG CGRP一ir节细胞少于对照组;3D组、 IW组，实验侧CGI理一ir细胞多于对照组，其中3D组增多最为明显;ZW组， 恢复至对照同一水平。 (3)实验性牙移动后6H，实验侧TG CG即mRNA的表达没有明显改变;、 24H组、3D组、IW组，实验侧TG CGR卫mRNA的表达强于对侧;ZW组， 左右侧TG表达CGRP mRNA无明显差异。 (4)实验性牙移动加力后6H、24H实验侧vc内CGRP一ir结构小于对照 侧;加力后3D组CGRp一ir结构面积大于对照侧，但无统计学意义;IW组实 验侧V。内CGRP一ir结构面积明显大于对照侧;加力后ZW，实验侧与对照侧 vc内CG即一ir结构面积相近。 结论:实验性牙移动后，初级感觉神经元中痛感受兴奋性神经递质CGRP 的合成、表达以及外周端和中枢端释放增加。表明实验性牙移动影响了初级 感觉神经元痛信号的发生、传导，使之致敏。分析初级神经元敏感性增加， 伤害感受器致敏，为正畸致痛的原因之一。 第二部分: 实验性牙移动TG内TrkA的改变 目的:观察实验性牙移动时，NGF受体一TrkA在TG内的改变，及其与 解放军军医进修学院博士论文 中文摘要 CGRP改变的关系。 方法:采用RT-PCR及免疫荧光方法研究实验性牙移动后，TG内TrkA n1RNA及其免疫阳性细胞的改变。 结果: (l)实验性牙移动加力6H组实验侧TrkA一ir神经元与对照组相比无明显 差别;24H组、3D组、lw组，实验侧TG实验侧TrkA一i:神经元增多，并大 于对照组;其中，24H组实验侧TrkA.ir神经元最多;ZW组，实验组TG TrkA一ir神经元与对照组相比无明显差异。 (2)实验性牙移动后6H，实验侧TrkA mRNA的表达没有明显改变;24H、 3D组，IW组实验组TG内TrkA mRNA的表达强于对照组;ZW组，实验侧 TrkA mRNA的表达恢复至正常水平。 结论:实验性牙移动时，TG内TrkA的表达升高，TI，kA一ir神经元也增多。 其增多的变化趋势和时间与CGRp的变化相似，但略早于TrkA。提示其二者 之间存在相关性。由于NGF与TrkA结合后可以促进感觉神经元表达神经肤SP 和CGRp，我们分析TrkA可能通过调控CGRP的表达而间接的参与实验性牙移 动时的痛觉传递以及牙周组织的骨改建。 第三部分: 神经生长因子在牙周组织中的表达 目的:研究牙周组织中是否存在NGF的表达。 方法:采用Rl’- pCR方法研究培养的人牙周膜成纤维样细胞(hPDLF) 是否表达NGF InRNA;采用hPDLF条件培养基与PclZ细胞共培养的方法研 究hPDLF是否分泌具有活性功能的NGF。 结果: (1)通过RT-PCR技术，在培养的hPDLF中扩增出NGF mRNA阳性产物。 (2)在hPDLF条件培养基中培养的PC12细胞长出突起，向神经元样细胞 解放军军医进修学院博士论文 中文摘要 分化。对照组及NGF抗血清培养的PC12细胞仅有少量长出突起。 结论:本研究通过离体研究初次显示培养的人牙周膜成纤维样细胞 (hPDLF)表达NGF mRNA并分泌NGF蛋白，提?
【图文】：

2.(a)HE染色(x50)。(b)张力侧牙周间隙增宽，牙周膜纤维排列紊乱，血管，充血(火200)。(c)在压力侧牙周组织受到挤压而紧缩，牙周间隙变窄，相应的骨出现蚕食状的吸收陷窝(x200)o

4.(a)正常大鼠牙周膜内的cGRI，一:神经纤维为单个的轴突或呈束状位于牙周膜内牙槽骨侧。伪).加力后6小时牙周膜内CGR卫一ir神经纤维明显少于对照组，仅牙根少量cGRP一ir纤维。(c).3D组压力侧CGRP一ir神经纤维较对照组略有增多。(d)l压力侧牙周膜CGRP一ir神经纤维较对照组增多，神经纤维排列紊乱，出现较多分支曲。B，牙槽骨;PDL，牙周膜;v，血管;D，牙本质;P，牙髓。箭头所指为CG即一经纤维。(xZoo)
【学位授予单位】：中国人民解放军军医进修学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R783.5

【参考文献】

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3 刘可群,邓燕,谈友萍,姜威;正畸施力初始(24小时)牙髓中神经肽P物质变化的实验研究[J];口腔正畸学;1997年04期

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本文编号：2647565