自体PRP、PDLSCs联合HA修复小型猪牙周骨组织缺损的实验研究

发布时间：2020-05-05 20:03

【摘要】：目的：研究小型猪自体富血小板血浆、牙周膜干细胞联合羟基磷灰石修复牙周骨组织缺损的作用。方法：全麻下采集贵州小型猪静脉全血，二次离心法制备PRP，测定其中TGF-β1和PDGF-AB的含量。采用组织块法获得小型猪牙周膜干细胞(PDLSCs)，用免疫荧光法检测STRO-1进行鉴定。取第3代小型猪PDLSCs接种在羟基磷灰石支架材料上并加入PRP复合培养，分别在第1、3、7天用扫描电镜观察细胞在羟基磷灰石上的生长情况。建立小型猪牙周骨缺损模型：以骨缺损部位加入移植材料的不同分组，A组，牙周骨缺损区植入PRP/PDLSCs/HA；B组，牙周骨缺损区植入单纯HA支架材料；C组，牙周骨缺损区不处理，直接缝合。术后4、8、12周处死动物，分别从大体、影像学、组织学方面进行观察。结果：原代培养的小型猪牙周膜干细胞生长良好，STRO-1免疫荧光染色阳性。扫描电镜观察结果表明，PDLSCs在羟基磷灰石上生长良好。实验组A组、B组在术后4、8、12周均有不同程度的骨组织再生，A组优于B组，而空白对照组只有少量成骨。结论：小型猪牙周膜干细胞可以在体外用组织块法成功的分离培养，并在羟基磷灰石支架材料上良好的生长，应用PRP作为内源性生长因子、PDLSCs作为种子细胞、HA作为支架材料联合构建的组织工程骨修复骨缺损的效果良好，为牙周骨组织修复和牙周组织工程研究提供了实验依据。
【图文】：

1.1 血小板计数结果见表 1 血小板计数可以看出通过二次离心法制备获得的 PRP 中的血小板含量为全血中血小板数量的 5 倍左右，差异具有统计学意义，P＜0.05。表 1 小型猪全血和 PRP 血小板计数（n＝6，×109）Tab.1 The platelet count of miniature swine’s venous blood and PRP样本 1 样本 2 样本 3样本 4 样本 5样本 6 x s全血 193 184 195201 192210 191.33±6.83PRP 910 937 10201250 9741352 1073.83±182.671.2 瑞氏染色PRP 组镜下可见较多的淡紫色着色的血小板散在分布，其在 1000×光镜下可见其表现为有一个中央致密的颗粒区和周边浅色的明亮区。全血组 1000×光镜下可见大量的红细胞，，偶有散在的深染细胞为淋巴细胞，可见淡紫色着色的血小板少量分布，见图 1。

进入快速增长期，传代后的细胞和原代一致，细胞图 6。型猪牙周膜原代细胞培养第 9 天（箭头所示为牙周膜组织riodontal ligament cells isolated from periodontal ligament cultured for 9 d (×100)
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R783.4

【参考文献】

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本文编号：2650683