间歇性、周期性下颌前伸力对髁突软骨Sox9、Ⅱ型胶原表达的影响

发布时间：2020-05-15 13:55

【摘要】：目的:安氏Ⅱ类错牙合是正畸临床中常见的错牙合畸形，约占正畸就诊患者的30%,其不仅影响患者的颜面美观，咀嚼功能及颞下颌关节的健康，甚至还会诱发心理问题。目前临床上常采用功能矫治器矫治青春高峰前期及高峰期骨性下颌后缩，然而，功能矫治器尚存在种种弊端，例如增加患者的痛苦，疗效的不确定性等，因此正畸临床医生一直致力于在现有临床技术的基础上，寻找更快速、高效的方法促进颞下颌关节的改建及下颌骨的生长。目前研究发现周期性机械刺激可以促进软骨细胞合成代谢，并上调细胞外基质的合成，加速软骨细胞增殖。作为软骨增殖分化的重要调控因子及标志物,Sox9及Ⅱ型胶原的表达水平反映了髁突软骨增殖、分化情况，因此本实验拟通过建立动物模型来探讨间歇性、周期性下颌前伸力对大鼠髁突Sox9、Ⅱ型胶原表达的影响。方法:选择5周龄雄性Wistar大鼠28只，随机分为四组，周期性加力组，静止性加力组，功能性矫治器组，对照组（n=7）。功能组动物每天24小时戴用自制统一规格的上颌固定功能矫治器，周期性加力组及静止性加力组大鼠每日上午麻醉后,运用自行研制的下颌前伸装置分别给予周期性下颌前伸力，频率0.5Hz,时间60min，及静止性下颌前伸力，频率为0Hz，时间60min。对照组仅麻醉不给予下颌前伸力。于实验后2周乙醚深度麻醉处死大鼠，取颞下颌关节标本，常规固定脱钙后石蜡切片，进行免疫组织化学染色，观察髁突软骨各层组织形态学变化，运用Image-pro plus6.0软件对各组切片髁突软骨厚度、Sox9及Ⅱ型胶原的阳性表达进行半定量分析。应用SPSS for windows(Version17.0SPSS Inc.)统计分析软件包对各组数据之间利用单因素方差分析LSD法进行两两比较。结果: 1、动态组及功能组Sox9阳性表达细胞数目明显高于对照组，具有显著的统计学意义（P0.001）；静态组Sox9阳性表达细胞数目稍低于对照组，但无明显统计学差异；另外，动态组Sox9阳性表达细胞数目明显高于静态组，具有显著统计学差异（P0.001）。 2、动态组Sox9阳性表达面积明显高于对照组，且有统计学意义（P＜0.01）；功能组及静态组Sox9阳性表达面积低于稍对照组，但无统计学差异；动态组Sox9阳性表达面积数目明显高于静态组，有显著统计学差异（P0.001）。 3、动态组及功能组Ⅱ型胶原阳性表达面积明显高于对照组，且具有显著的统计学意义（P＜0.001）；静态组Ⅱ型胶原阳性表达面积稍高于对照组，但无统计学差异；动态组Ⅱ型胶原阳性表达面积显著高于静态组，具有统计学意义（P0.001）结论: 1、2周后短期间歇性、周期性下颌前伸力（1h）可显著增加Sox9、Ⅱ型胶原的表达，这提示其可促进髁突软骨细胞增殖、分化，引发颞下颌关节适应性改建。 2、短期间歇性静止拉应力的作用与对照组相比并不明显，尚需进一步验证。 3、2周后功能矫治器引导大鼠下颌前伸使髁突软骨厚度、Sox9阳性细胞表达数目及Ⅱ型胶原表达面积均较对照组增加，这提示其在髁突成软骨方面作用显著。
【图文】：

牵引装置,大鼠,静止性,支架上

物实验需要设计、制作了“大鼠下颌前伸牵引分组成(图 3.1.1)。每日上午同一时间乙醚麻体重,以 100mg/kg 的剂量腹腔注射氯胺酮及，仰卧于装置的支架上，将大鼠头部与身体，同时将四肢固定在支架上，将装置的机械节牵引方向与大鼠牙合平面约呈 30 度角进行牵伸位，力值为 100g（图 3.1.3）。周期性下间 60min 周期性下颌前伸力，静止性下颌静止性下颌前伸力。在实验中为避免大鼠上次定期磨短上下切牙。

测量区

干标本周围多余水分，于标本上滴加显色剂各 50μl，显，终止显色反应；木精复染 1min；在 80%酒精Ⅰ、Ⅱ，90%酒精Ⅰ、Ⅱ，，二甲苯Ⅰ、Ⅱ中分别脱水 5min；中性树胶封片。像分析组化图像采集应用光学显微镜，，选取 200 倍放大率，每张上部作为重点观察部位，选取图像。利用 Image-pro plus6，感兴趣区域（Area of Interest, AOI）为以关节盘纤维增殖层开始大小为 400×150μm 的矩形框（图 3.3），对 A)内 Sox9、Ⅱ型胶原的表达进行半定量分析。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R783.5

【共引文献】