骨碎补柚皮苷和三七总皂苷对人牙周膜细胞分化和超微结构的影响

发布时间：2020-05-19 21:50

【摘要】：目的研究骨碎补柚皮苷和三七总皂苷作用于人牙周膜细胞后，细胞分化和超微结构的影响，为进一步探讨其对人牙周膜细胞的作用提供实验基础。方法（1）体外分离培养人牙周膜细胞，运用组织块法；观察原代培养的人牙周膜细胞和传代培养的人牙周膜细胞形态特征，免疫组化检测细胞表面标志物，对人牙周膜细胞进行鉴定；（2）采用MTT法检测不同浓度骨碎补柚皮苷、三七总皂苷、骨碎补柚皮苷和三七总皂苷联合作用于人牙周膜细胞后，细胞增殖情况；（3）采用酶动力法检测骨碎补柚皮苷、三七总皂苷、骨碎补柚皮苷和三七总皂苷联合作用于人牙周膜细胞后，碱性磷酸酶活性的变化；（4）采用Western blot法检测骨碎补柚皮苷、三七总皂苷、骨碎补柚皮苷和三七总皂苷联合作用于人牙周膜细胞后，细胞碱性磷酸酶表达；（5）观察骨碎补柚皮苷、三七总皂苷、骨碎补柚皮苷和三七总皂苷联合作用于人牙周膜细胞后超微结构的变化运用透射电镜。结果（1）组织块法培养所得细胞经过表型免疫组化鉴定：波形丝蛋白在人牙周膜细胞内表达阳性，角蛋白在人牙周膜细胞内表达阴性。（2）实验组细胞增殖显著高于对照组，骨碎补柚皮苷增殖最明显的质量浓度为1mg.L~(-1)，三七总皂苷以1mg.L~(-1)质量浓度下增殖最明显，骨碎补柚皮苷和三七总皂苷联合作用后，较其余药物组增殖明显。（3）骨碎补柚皮苷、三七总皂苷、骨碎补柚皮苷联合三七总皂苷均能促进碱性磷酸酶活性增强，活性作用增强最明显为骨碎补柚皮苷联合三七总皂苷组。（4）骨碎补柚皮苷、三七总皂苷、骨碎补柚皮苷联合三七总皂苷作用于人牙周膜细胞后，碱性磷酸酶表达优于对照组，表达作用最明显为两药联合用药组。（5）骨碎补柚皮苷、三七总皂苷、骨碎补柚皮苷和三七总皂苷联合作用下，核糖体、粗面内质网较对照组明显增多，联合用药组最明显。结论骨碎补柚皮苷和三七总皂苷联合作用于人牙周膜细胞，对其成骨分化和超微结构具有协同作用。
【图文】：

骨碎补,柚皮苷,药物浓度

以 P<0.05 为差异有统计学意义。比较不同时间点药物质量浓度组细胞光密度值的差别，不同药物组与对照组之间的 ALP 活性差异，作析因设计的方差分析及SNK-q 检验。比较不同药物组与对组之间 ALP 表达差异，作单因素方差分析及 SNK-q检验。2结果2.1 骨碎补柚皮苷、三七总皂苷药物浓度筛选2.1.1骨碎补柚皮苷药物浓度筛选经 MTT 法检测所得，骨碎补柚皮苷作用于人牙周膜细胞药物浓度筛选最终为0.01、0.1、1、10 mg.L-1；与对照组比较，1、10 mg.L-1在第 3、5 天时 MTT 的光密度值均有统计学意义（P<0.05），经 SNK-q 检验发现 1 mg.L-1组与其他各组测量值差异具有显著性。（图 2.1）

三七总皂苷,骨碎补,最佳浓度,柚皮苷

经 SNK-q检验发现 1 mg.L-1组与其他各组测量值差异具有显著性。（图2.2）图 2.2 三七总皂苷对 hPDLCs 生长的影响Fig2.2 Effect of PNS on the growth of hPDLCs注：*与对照组比较 P<0.052.1.3骨碎补柚皮苷联合三七总皂苷骨碎补柚皮苷最佳浓度 1mg/L、三七总皂苷最佳浓度 1mg/L、骨碎补柚皮苷最佳浓度 1mg/L 联合三七总皂苷最佳浓度 1mg/L 作用后，与对照组比较，，均有促进作用（P＜0.05），经 SNK-q 检验以两者联合作用效果最佳。（图 2.3）
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R285.5;R780.2

【参考文献】