【摘要】：背景和目的： 涎腺肿瘤是头颈部最常见的肿瘤,其发病率在不断上升,特别是涎腺的恶性肿瘤直接危及患者的生命,并影响患者的生存质量。目前,尽管涎腺肿瘤的诊断、治疗方法有了长足的进步,但对某些涎腺肿瘤的诊断及鉴别诊断仍困扰着广大病理医师,临床上也迫切需要判断肿瘤预后及指导治疗的理想肿瘤标记物。 多形性腺瘤(pleomorphic adenoma, PA)是最常见的涎腺肿瘤,占所有涎腺肿瘤的60%。PA主要病理特点：有包膜,由上皮、肌上皮及间叶成分构成。部分PA可见由上皮及肌上皮构成的筛状结构,易与腺样囊性癌混淆,导致鉴别诊断困难,这是广大病理医师长期以来尚未解决的问题。涎腺常见的恶性上皮肿瘤包括粘液表皮样癌(MEC)、腺样囊性癌(ACC)及腺泡细胞癌(ACCa)等。 Tenascin-C (TN-C)是一种细胞外基质高分子糖蛋白,与胚胎的形成、肿瘤的发生与发展、组织的创伤修复和纤维化、细胞的衰老等过程有着密不可分的关系。研究表明TN-C在多种肿瘤中都有不同程度的表达,在正常组织和良性肿瘤中不表达或少有表达。关于涎腺肿瘤,Westernoff用免疫组化法观察了TN-C在涎腺肿瘤中的表达情况,提示TN-C在多形性腺瘤和腺样囊性癌的鉴别诊断中存在一定价值。 CD9是一种白细胞分泌的表面相关蛋白,与细胞的增殖、迁移及肿瘤细胞的转移有密切相关。研究表明CD9的表达在良性肿瘤和正常组织表达相对较高,在恶性肿瘤表达相对较低。有关口腔肿瘤,Kikuo Sakmaoto等用免疫组化法检测了CD9在腮腺肿瘤中的表达,结果证明CD9可作为良恶性腮腺肿瘤的鉴别指标。 本研究旨在探讨TN-C和CD9与涎腺肿瘤发生的关系,同时探讨二者对涎腺肿瘤鉴别诊断的价值,为涎腺肿瘤的发生、鉴别诊断及治疗靶点的寻找提供实验依据。 方法： 1.采用免疫组织化学SP方法检测25例多形性腺瘤、25例腺样囊性癌、20例粘液表皮样癌、10例腺泡细胞癌和10例正常涎腺组织中TN-C和CD9蛋白的表达。 2.采用原位杂交技术检测25例多形性腺瘤、25例腺样囊性癌、20例粘液表皮样癌、10例腺泡细胞癌和10例正常涎腺组织中TN-C和CD9mRNA的表达。 3.统计学处理：应用SPSS 17.0统计学软件处理,率的比较采用χ2检验(chi-square),相关分析采用Spearmen相关分析。检验水准α=0.05。 结果： 1.TN-C蛋白在10例正常涎腺组织中呈阴性表达。在多形性腺瘤中,TN-C蛋白阳性表达主要见于腺上皮,胞质呈棕黄色,阳性率为16%(4/25)；在腺样囊性癌中,TN-C蛋白在癌组织中呈弥漫性表达,部分呈灶状表达,阳性率为64%(16/25)；粘液表皮样癌的表皮样细胞和粘液细胞胞质内均有阳性表达,阳性率为40%(8/20)；在腺泡细胞癌中,TN-C蛋白见于癌细胞胞质,阳性率为50%(5/10)。TN-C蛋白在腺样囊性癌中的阳性表达率显著高于多形性腺瘤,差异具有统计学意义(χ2=12.000,P=0.0010.05),而在腺样囊性癌与粘液表皮样癌、腺泡细胞癌中的表达差异无统计学意义(χ2分别为2.571和0.583,P=0.109和0.445均0.05)。 2.在正常涎腺组织中,CD9蛋白阳性表达主要见于导管上皮和极少数腺上皮,胞质呈棕黄色,阳性率为100%(10/10)；在多形性腺瘤中,CD9蛋白见于腺上皮和鳞状上皮胞质和包膜,表达范围局限,肌上皮未见表达,阳性率为32%(8/25)；在腺样囊性癌中,CD9蛋白在癌组织中呈弥漫性表达,部分呈灶状表达,阳性率为80%(20/25)；粘液表皮样癌的表皮样细胞和粘液细胞胞质内均有阳性表达,阳性率为70%(14/20)；在腺泡细胞癌中CD9蛋白见于癌细胞胞质,阳性率为90%(9/10)。CD9蛋白在腺样囊性癌中的阳性表达率显著高于多形性腺瘤,差异具有统计学意义(χ2=11.688,P=0.0010.05),而在腺样囊性癌与粘液表皮样癌、腺泡细胞癌中的表达差异无统计学意义(χ2分别为0.602和0.503,P=0.438和0.478均0.05)。 3. TN-CmRNA在10例正常涎腺组织中呈阴性表达；在多形性腺瘤中,TN-CmRNA主要见于瘤细胞,胞质为深蓝色,阳性率为12%(3/25)；在腺样囊性癌中,TN-CmRNA在癌组织呈弥漫性表达,阳性率为56%(14/25)；粘液表皮样癌的表皮样细胞和粘液细胞胞质内均有阳性表达,阳性率为35%(7/20)；在腺泡细胞癌中CD9蛋白见于癌细胞胞质,阳性率为40%(4/10)。TN-CmRNA在腺样囊性癌中的阳性表达率显著高于多形性腺瘤,差异具有统计学意义(χ2=10.784,P=-0.0010.05),而在腺样囊性癌与粘液表皮样癌、腺泡细胞癌中的表达差异无统计学意义(χ2分别为1.969和0.732,P=0.161和0.392均0.05)。 4.在正常涎腺组织中,CD9mRNA阳性表达主要见于导管上皮,胞质为深蓝色,阳性率为100%(10/10)；在多形性腺瘤中,CD9mRNA主要见于瘤细胞,胞质为深蓝色,阳性率为20%(5/25)；在腺样囊性癌中,CD9mRNA在癌组织呈弥漫性表达,阳性率为72%(18/25)；粘液表皮样癌的表皮样细胞和粘液细胞胞质内均有阳性表达,阳性率为70%(14/20)；在腺泡细胞癌中CD9mRNA见于癌细胞胞质,阳性率为80%(8/10)。CD9mRNA在腺样囊性癌中的阳性表达率显著高于多形性腺瘤,差异具有统计学意义(χ2=13.607,P0.001),而在腺样囊性癌与粘液表皮样癌、腺泡细胞癌中的表达差异无统计学意义(χ2分别为0.022和0.239,P=0.883和0.625均0.05)。 5.80例涎腺肿瘤中TN-C蛋白与TN-CmRNA表达的同时阳性率为37.5%(30/80),同时阴性率为40%(32/80),表达一致率为88.8%。相关性分析显示二者之间具有极显著性正相关(r=0.734 P=0.03)；80例涎腺肿瘤中CD9蛋白与CD9mRNA表达的同时阳性率为68.7%(55/80),同时阴性率为12.5%(10/80),表达一致率为88.8%。相关性分析显示二者之间具有极显著性正相关(r=0.676P=-0.03)。 结论： 1.TN-C在正常涎腺组织中为阴性表达,而在涎腺肿瘤中都有不同程度的表达,提示TN-C可能与涎腺肿瘤的发生有一定相关性；TN-C对涎腺肿瘤之间的鉴别诊断有一定意义。 2.CD9在正常涎腺组织中的阳性表达率为100%,高于在涎腺肿瘤中的表达,提示CD9可能与涎腺肿瘤的发生有一定相关性；CD9对涎腺肿瘤之间的鉴别诊断有一定意义。 3.在4种涎腺肿瘤中TN-C蛋白、CD9蛋白与TN-CmRNA、CD9mRNA之间具有显著相关性；提示TN-C、CD9在基因和蛋白水平均对涎腺肿瘤发生发展起调控作用。
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R739.8
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