抑制粘着斑激酶表达对口腔鳞癌细胞生物学特性的影响

发布时间：2020-05-25 17:06

【摘要】：目的:研究抑制粘着斑激酶的表达对于口腔鳞癌细胞CAL27生物特性的影响,并初步探究在粘着斑激酶表达被抑制的情况下X射线辐照对于口腔鳞癌细胞的杀伤能力是否增强,为今后口腔鳞癌临床治疗方案的选择上提供一定的理论依据。材料和方法:用粘着斑激酶抑制剂FAK Inhibitor 14处理口腔鳞癌细胞系CAL27细胞,X射线辐照由中科院兰州分院近代物理研究所辐照终端提供。将实验分为正常对照组(C)抑制剂处理组(I)、X射线处理组(X)和抑制剂加X射线处理组(I+X)。分别用Western Blot蛋白印迹法检测相关蛋白的表达,用实时无标记细胞分析系统、克隆形成实验和Ki-67免疫荧光染色技术检测各实验组细胞的增殖活性,用Transwell迁移实验和划痕实验检测细胞的迁移能力,用Annexin V/PI双染法流式细胞技术检测各实验组细胞的凋亡情况,用鬼笔环肽荧光染色和原子力显微镜检测细胞骨架及细胞的力学性能变化。结果:粘着斑抑制剂处理CAL27细胞后,相较于正常对照组细胞,其增殖活性降低、迁移能力受到显著抑制,与正常对照组相比杨氏模量增加,细胞骨架变少且不规则。加入X射线照射后,抑制剂组显示出更高的凋亡率。抑制剂加X射线照射组的增殖、迁移能力均为各组最低值。结论:无论是否添加X射线辐照,经过粘着斑激酶抑制剂处理,均能有效降低CAL27口腔鳞癌细胞的增殖活性和迁移能力,经过抑制剂干扰的CAL27细胞比未经处理的对照组细胞在X射线辐照下更易发生凋亡。
【图文】：

图 2.4.1 Western Blot 检测正常对照组（C）、X 射线辐照组（X）、抑剂处理组（I）以及抑制剂处理加上 X 射线辐照组（IX）的 FAK 蛋白及 Pax蛋白的表达水平。2.5 讨论从实验结果图中我们可以清晰地看到经过 FAK Inhibitor 14 的作用，CA细胞的 FAK 蛋白表达量被明显下调，证明本次实验选取的该抑制剂能够有效制所选的研究对象细胞 CAL27 的粘着斑激酶 FAK 的表达，为后续实验的变量制可靠性提供了充足的证据。同时我们从桩蛋白（Paxillin）的表达情况可以看辐照组和正常组在桩蛋白的表达量上差异不太明显，单纯添加 FAK 抑制剂可下调桩蛋白的表达，，但是经过 FAK 抑制剂处理后再进行辐照能显著减少桩蛋的表达，提示 FAK 被抑制的情况下，辐照对口腔鳞癌细胞 CAL27 的杀伤作用为显著可能与桩蛋白有着不可忽略的联系。

图 3.4.1 实时无标记细胞分析系统检测正常对照组（C）、X 射线辐照组（X制剂处理组（I）以及抑制剂处理加上 X 射线辐照组（I+X）的细胞增殖情况图可以看出和正常对照组细胞相比，抑制剂处理组、X 射线处理组及抑制剂 射线处理组细胞的增殖速率和总量依次降低。.4.2 克隆形成实验
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R739.8

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 徐文品;焦琨;张伟;;长链非编码RNAs在口腔鳞癌中的研究进展[J];实用肿瘤学杂志;2018年03期

2 刘X;南欣荣;;口腔鳞癌中黏蛋白15和表皮生长因子受体的表达及意义[J];中国药物与临床;2017年09期

3 王敬旭;廖贵清;;透明质酸酶在口腔鳞癌组织中的表达及其临床意义[J];口腔疾病防治;2017年10期

4 田彩平;姚伯程;王芳;张莉芹;;人类疱疹病毒6型在口腔鳞癌组织中的表达[J];甘肃医药;2015年01期

5 成洲;;口腔鳞癌中VEGF和PCNA的表达相关性研究[J];滨州医学院学报;2014年05期

6 邓荣欣;严明;徐殠;陈万涛;张萍;;侧群细胞相关分子标志物在口腔鳞癌中的表达及临床意义[J];中国口腔颌面外科杂志;2013年03期

7 陈卫民;王岩;;口腔鳞癌中HIF-1α和MMP-2的表达及其相关性[J];河南大学学报(医学版);2008年04期

8 王世霞;王元银;周健;陈乔尔;张娟;黄擎;朱坤;胡超;;HIF-1α与口腔鳞癌生物学行为的关系[J];安徽医科大学学报;2007年04期

9 夏刚;叶明华;刘海涛;卢新华;;平阳霉素术前诱导化疗对口腔鳞癌的疗效分析[J];实用医技杂志;2007年22期

10 韩泽广;;为研究口腔鳞癌发生发展的机制建立实验平台[J];中华口腔医学杂志;2006年01期

相关会议论文 前10条

1 吕晓智;;lncRNA AC007271.3可能是口腔鳞癌新的候选癌基因[A];第十四次中国口腔颌面外科学术会议论文汇编[C];2018年

2 王莎莎;张美;庞欣;吴敬飚;余祥华;汤亚玲;梁新华;;人巨噬细胞移动抑制因子对口腔鳞癌侵袭转移的影响及其分子机制初探[A];2018口腔病理年会暨第十二次全国口腔病理学术会议论文集[C];2018年

3 蒲玉梅;王志勇;泥艳红;胡勤刚;;肿瘤浸润方式对口腔鳞癌预后的影响及其术前评估[A];第十四次中国口腔颌面外科学术会议论文汇编[C];2018年

4 赵鹏;;口腔鳞癌人群相对生存率的分析[A];2017全国口腔颌面——头颈肿瘤外科学术研讨会论文集[C];2017年

5 王旭霞;赵作勤;薛立伟;;肿瘤转移相关基因在口腔鳞癌中的表达及其临床意义[A];第八次全国口腔颌面—头颈肿瘤会议论文汇编[C];2009年

6 刘曙光;廖楚航;王大章;赵建江;郑俊发;;三联化疗在口腔鳞癌综合治疗中的临床应用及疗效评价[A];第一届全国口腔颌面部肿瘤学术会议论文汇编[C];2001年

7 张志光;何一青;张萌;;口腔鳞癌中端粒酶活性表达的临床意义[A];第一届全国口腔颌面部肿瘤学术会议论文汇编[C];2001年

8 王新红;陈新明;;口腔鳞癌浸润前沿E-钙粘素的表达与临床病理的关系——免疫组化和RT-PCR方法分析[A];中华口腔医学会第七届全国口腔病理学术会议论文摘要汇编[C];2006年

9 张恩礁;卢利;;应用流式细胞术检测口腔鳞癌颈淋巴结隐匿性转移[A];第五次全国口腔颌面—头颈肿瘤学术研讨会论文汇编[C];2006年

10 曲昌锋;孙长伏;;Ⅰ型蛋白激酶A在口腔鳞癌中的表达及活性研究[A];第五次全国口腔颌面—头颈肿瘤学术研讨会论文汇编[C];2006年

相关重要报纸文章 前4条

1 何增寿;口腔鳞癌化疗可首选VM－26[N];中国医药报;2003年

2 仇 逸 祖 亮;研究证实：病毒感染可导致口腔鳞癌[N];中国高新技术产业导报;2001年

3 仇逸 陈祖亮;砒霜能抑制口腔鳞癌[N];江苏科技报;2002年

4 李华虹　乔蕤琳 记者　 吴天飞;哈市专家攻克肿瘤有新招[N];哈尔滨日报;2007年

相关博士学位论文 前10条

1 汤根兄;TROP2对口腔鳞癌恶性生物学行为的影响及分子机制研究[D];南京医科大学;2019年

2 李智;TN14003对人口腔鳞癌细胞增殖凋亡和侵袭的机制研究[D];天津医科大学;2018年

3 蒲玉梅;切缘状态、浸润方式和肿瘤相关中性粒细胞的关系及其对口腔鳞癌预后的影响[D];南京大学;2017年

4 邓润智;凝溶胶蛋白在口腔鳞癌中的表达及作用[D];南京大学;2013年

5 王霞;Beclin1调控口腔鳞癌自噬与凋亡及对顺铂敏感性的作用研究[D];山东大学;2018年

6 杜若鸿;叶酸受体介导的磁性纳米给药系统的构建及用于肿瘤诊治的实验研究[D];中国科学技术大学;2017年

7 李明贺;GRIM-19的亚细胞定位及在口腔鳞癌治疗中作用的研究[D];吉林大学;2017年

8 张桂荣;口腔鳞癌端粒酶活性的表达及其生物学调控的实验研究[D];中国医科大学;2005年

9 王宇;口腔鳞癌与部分生物因子相关性的临床、实验研究[D];复旦大学;2005年

10 赵洪伟;植物激素对口腔鳞癌诱导分化作用的实验研究[D];四川大学;2005年

相关硕士学位论文 前10条

1 曾传贵;IL-8介导的中性粒细胞FOXP3表达的下调促进口腔鳞癌进展[D];广西医科大学;2019年

2 李月洁;口腔鳞癌CD133~+肿瘤干样细胞与淋巴管生成关系的初步研究[D];西南医科大学;2019年

3 李瑞萍;Trop-2在不同分化程度口腔鳞癌中的表达及新型IL-13重组腺病毒对口腔癌疗效的研究[D];兰州大学;2019年

4 唐晓;GDF15与口腔鳞癌TPF诱导化疗敏感性的机制研究[D];上海交通大学;2017年

5 李果;抑制粘着斑激酶表达对口腔鳞癌细胞生物学特性的影响[D];兰州大学;2019年

6 孙文文;口腔鳞癌ANXA1表达与TPF诱导化疗疗效的机制研究[D];上海交通大学;2017年

7 史慧洁;PD-1、TIM-3在口腔鳞癌组织和外周血T细胞表达的相关性研究[D];郑州大学;2019年

8 刘晓静;EGFR介导的信号通路影响口腔鳞癌对BRD4蛋白抑制剂的敏感度[D];山东大学;2018年

9 陈希彦;YAP基因对口腔鳞癌细胞系CAL27增殖凋亡的影响及机制研究[D];山东大学;2018年

10 邵智文;miRNA-361在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其对细胞功能影响的研究[D];河北医科大学;2018年

本文编号：2680467