利拉鲁肽对大鼠实验性牙周炎骨效应及炎症效应的影响

发布时间：2020-05-31 02:05

【摘要】：研究背景牙周炎是由牙菌斑生物膜刺激牙周组织导致的一种慢性感染性疾病,造成牙齿支持组织(牙龈、牙周膜、牙槽骨和牙骨质)的破坏,是导致我国成年人牙齿丧失的首位原因。利拉鲁肽(Liraglutide,LIRA)是目前临床上治疗2型糖尿病的新型药物,有研究发现,LIRA不仅有控制血糖的作用,同时具有抗炎和骨保护作用,研究还发现LIRA的抗炎症作用和骨保护作用并不依赖于其降血糖的作用。因此我们推测LIRA可能对牙周炎这种慢性炎症性疾病发挥其抗炎症及骨保护作用。目的通过建立大鼠实验性牙周炎模型模拟牙周炎环境,体内分析LIRA对牙周炎炎症效应及骨效应的影响。方法实验分为四组,分别是:空白对照组(Control组,不建立牙周炎模型,不给药,正常饲养);LIRA组(不建立牙周炎模型,给予LIRA 300μg/kg/天,腹腔注射);牙周炎+生理盐水组(PD+Nacl组,建立牙周炎模型,给予等量生理盐水,腹腔注射);牙周炎+LIRA组(PD+LIRA组,建立牙周炎模型,给予LIRA 300μg/kg/天,腹腔注射)。实验动物选用雄性Wister大鼠。PD+Nacl组和PD+LIRA组通过在Wister大鼠左上颌第一臼齿龈沟周围放置结扎线及正畸结扎丝建立牙周炎模型。结扎1 m后去除结扎线给予LIRA 1 m,过量麻药处死大鼠。测量大鼠左上颌第一臼齿的牙龈指数(Gingival indexGI)、牙周袋深度(Pocket probing depth,PPD)、牙齿松动度(Tooth mobility,TM);采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定大鼠血清炎症因子TNF-α和IL-1β、IL-6的表达水平;通过组织学分析(HE染色)观察炎症细胞浸润、牙周组织结构的完整性等情况;通过Micro-CT扫描测量大鼠上颌骨牙槽骨丢失量、骨矿物质密度(Bone mineral density,BMD)、骨体积分数(Bone volume fraction,BV/TV)、小梁数(Trabecular number,Tb.N)、小梁厚度(Trabecular thickness,Tb.Th)、小梁分离(Trabecular separation,Tb.Sp)等骨微结构参数的变化;免疫组化染色检测RANKL,OPG的蛋白水平。结果1.通过结扎法成功建立了大鼠实验性牙周炎模型;2.LIRA给药1 m后,与空白对照组及LIRA组相比,PD+Nacl组的GI、TM、PPD显著增加(P0.01),LIRA治疗组显著改善了GI、TM指数(P0.05),牙周破坏程度减少。3.ELISA结果:与空白对照组及LIRA组相比,PD+Nacl组的血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度显著增加(P0.05),但是与PD+Nacl组相比,PD+LIRA组促炎细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6浓度降低(p0.05)。4.Micro-CT结果:与空白对照组及LIRA组相比,PD+Nacl组的牙槽骨吸收量(牙槽嵴顶至釉牙骨质界的距离)增加(P0.01),但是与PD+Nacl组相比,PD+LIRA组牙槽骨吸收量没有统计学差异;与空白对照组及LIRA组相比,PD+Nacl组BMD、BV/TV、Tb.N和Tb.Th减少(P0.01),Tb.Sp数值增加(P0.01),与PD+Nacl组相比,PD+LIRA组BMD、BV/TV、Tb.N增加,Tb.Sp减少(p0.05)。5.HE染色结果:光学显微镜下观察大鼠左上颌第一臼齿以及第二臼齿之间的区域发现:与空白对照组和LIRA组相比,PD+Nacl组牙周韧带破坏,牙骨质不完整,牙槽骨嵴破坏,不连续,炎症细胞浸润增加。在PD+LIRA组中,与PD+Nacl组相比,牙周韧带及牙槽骨破坏减少,炎症细胞浸润减少,牙槽骨和牙骨质完整。6.免疫组化结果:与空白对照组及LIRA组相比,实验性牙周炎PD+Nacl组牙周组织对RANKL高表达,OPG染色适度增加。PD+LIRA组大鼠牙周组织OPG染色高于PD+Nacl组,RANKL染色强度降低。即LIRA治疗降低了大鼠牙周组织RANKL的表达,增加了OPG的表达。结论LIRA可促进实验性牙周炎大鼠的牙槽骨成骨,抑制炎症反应,提示LIRA的全身给药是减少牙周病中炎症和骨质流失的潜在治疗方法,为LIRA用作治疗牙周炎的潜在药物提供了依据。
【图文】：

兰州大学硕士学位论文 利拉鲁肽对大鼠实验性牙周炎骨效应及炎症效应的影食量及进水量减少，活动少，毛色暗淡。30 d 后去除结扎丝及结扎线检查模型建立情况。将牙周炎模型建立成功20 只大鼠随机分为 2 组（牙周炎+生理盐水组，牙周炎+ LIRA 组），没有建模型的 16 只大鼠随机分为 2 组（空白对照组，单纯 LIRA 组）。每组大鼠使苦味酸进行编码标记。2.3 实验结果2.3.1 成功建立大鼠牙周炎模型建模 30 d 天后适量乙醚吸入麻醉大鼠，观察到建模组大鼠左上颌第一臼周围结扎线及结扎丝仍存在，龈缘周围有食物残渣堆积，口腔卫生状况较未建者差。建模组大鼠牙龈组织肿胀，轻探出血，牙龈炎症明显；牙周袋探诊深度对照组增加，左上颌第一臼齿出现不同程度的松动。

图 3-1 A：1% 亚甲蓝染色后使用数码相机拍摄左上颌骨的照片。从大鼠左上颌颊腭侧床照片可以看出建立牙周炎模型导致左上颌第一臼齿周围的牙槽骨显著吸收，而 LIRA30 d 后改善了牙槽骨的吸收（图 A 上排为大鼠左上颌颊侧照片，图 B 为腭侧照片）；GI，TM，PPD 显示 PD + Nacl 组的得分显着高于对照组，而相比 PD + Nacl 组，，LIRA显著降低了 PD + LIRA 组的 GI，TM 得分，然而，在 LIRA 给药后 PPD 没有显著改代表 PD+Nacl 组及 LIRA 组与 Control 组相比；#代表 PD+LIRA 组与 PD+Nacl 组相比
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R781.42

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 陈铁楼;实验性牙周炎的形成[J];国外医学.口腔医学分册;1994年04期

2 陈铁楼,周以钧,吴织芬,赵瑞芳;固齿膏抑制大鼠实验性牙周炎形成的初步研究[J];牙体牙髓牙周病学杂志;1993年03期

3 张璇;王凯;;实验性牙周炎动物模型的研究进展[J];中国医药指南;2016年11期

4 廖旭辉;顾为望;徐君逸;;实验性牙周炎动物模型的微生物研究[J];广东牙病防治;2007年02期

5 黄世光;王晓歌;潘倩茹;黄博;吕芳丽;叶秀华;杨云珍;郭柳婷;练楚文;;慢性心理应激对大鼠实验性牙周炎及血清乳酸脱氢酶1的影响[J];中国病理生理杂志;2012年05期

6 唐华;宫苹;;人骨保护素质粒转染抑制大鼠实验性牙周炎骨吸收的研究[J];中国口腔种植学杂志;2009年02期

7 龚斌;徐立平;欧炯光;李启艳;;实验性牙周炎动物模型牙龈组织一氧化氮含量检测与分析[J];医学研究杂志;2007年08期

8 孟祥娇;于新波;邓婧;;氢饱和水对大鼠实验性牙周炎抗炎作用的初步观察[J];齐鲁医学杂志;2012年04期

9 李婧;娄晋宁;徐宝华;;实验性牙周炎动物模型的研究进展[J];中日友好医院学报;2013年01期

10 陈铁;黄世光;;尼美舒利对大鼠实验性牙周炎防治作用的评价[J];中国病理生理杂志;2007年05期

相关会议论文 前10条

1 唐华;宫苹;;人骨保护素质粒转染抑制大鼠实验性牙周炎骨吸收的研究[A];第六届全国口腔种植学术会议论文汇编[C];2009年

2 李春年;徐秀娟;;厚朴酚对大鼠实验性牙周炎骨吸收抑制作用的研究[A];中华口腔医学会第六次全国口腔药学学术会议论文汇编[C];2017年

3 许杰;朱可;曹敏;郑亚飞;刘青;;穿心莲内酯对实验性牙周炎小鼠T淋巴细胞活化的影响[A];中华口腔医学会口腔药学专业委员会第二次全国口腔药学学术会议论文汇编[C];2013年

4 毕良佳;李虹;张瑞敏;林江;姜云涛;于洋;邓卜师;;实验性牙周炎合并咬合性外伤时牙周膜的变化[A];中华口腔医学会第二次全国会员代表大会暨第七次全国口腔医学学术会议论文汇编[C];2001年

5 金惠姣;薛毅;陈光;吴仲寅;;辅酶Q_(10)对大鼠实验性牙周炎的影响[A];中华口腔医学会口腔药学专业委员会第二次全国口腔药学学术会议论文汇编[C];2013年

6 丁鳌;张志宏;王勤涛;;IL-17抗体在动物实验性牙周炎中作用的研究[A];第十次全国牙周病学学术会议论文摘要汇编[C];2014年

7 蒋春梅;陈武;朱庆萍;;内源性H2S对大鼠实验性牙周炎的影响[A];第十三次全国老年口腔医学学术年会论文汇编[C];2018年

8 赵倩;胡e

本文编号：2689096