茶多酚联用奥硝唑对牙周可疑致病菌的体外抑菌活性研究

发布时间：2020-06-12 06:21

【摘要】：背景牙周病是人类最常见的口腔感染性疾病，在我国发病率呈不断上升趋势，高达70%以上，已成为牙列缺损和牙列缺失的首要原因。目前认为牙周病发病的主导因素为细菌感染及其引发的宿主免疫反应，始动因子则是菌斑中的微生物及其产物。研究表明牙周可疑致病菌主要包括卟啉单胞菌属(Porphyromonas)、放线杆菌属(Actinomyces)、梭杆菌属(Fusobacterium)、普雷沃菌属(Prevotella)等，此类致病菌一方面通过细菌本身及其毒性产物对牙周组织产生直接破坏，即直接致病作用；另一方面为间接致病作用，主要通过引发宿主的炎性反应和免疫反应，间接影响牙周组织重建。目前认为：治疗牙周病的关键点包括清除致病因子和阻断牙周病的发展，治疗的首选方法为牙周机械治疗。除此之外，药物治疗作为机械治疗的重要辅助手段，在抑制或杀灭致病微生物，调节宿主防御功能，阻断疾病发生和发展，促进组织愈合等方面显示出越来越重要的作用。由于牙周病是多种因子共同作用，多种细菌共同参与的感染性疾病，单独使用一种抗厌氧菌药物无法达到预期疗效，两种抗菌药物联合使用的方法成为牙周药物治疗的主流。因此，寻求一种有效可行的抗菌药联用方案成为牙周病治疗领域的研究热点。茶多酚(Tea polyphenols，TP)是指一类从绿茶中提取而出的结构复杂的混合物，其主要成分包括儿茶素、花色素、黄酮醇、酚酸及其缩酚酸等多酚类化合物。其对牙周主要致病菌有着较强的抗菌活性，其主要功能除具有抗菌作用外，还具有抗变态反应、清除自由基，促进牙周组织重建的作用。奥硝唑（ornidazole,ONZ）是第三代硝基咪唑类抗菌药物，它比第一代该类药物甲硝唑和第二代产品替硝唑的抗厌氧菌作用更强且副作用更轻。目前已有较多文献报道将奥硝唑与其他抗菌药物联合使用的情况，但奥硝唑与中药提取物联用治疗牙周病的报道相对较少。目的本研究选取6种常见的中药提取物和奥硝唑对9种牙周可疑致病菌进行体外药敏实验，为选择抗菌药物提供理论支持。再通过配伍稳定性实验和配伍药敏实验探讨茶多酚和奥硝唑联合使用的可行性,为两种药物的配伍使用提供依据。材料和方法1.实验药物的体外抗菌活性采用厌氧菌药物敏感实验琼脂稀释法，分别检测六种中药提取物（茶多酚、厚朴酚、黄芩甙、大黄素、五倍子提取物和黄连素）以及奥硝唑对9种牙周可疑致病菌：即牙龈卟啉单胞菌(Porphynomonas gingivalis)ATCC33277和381、牙髓卟啉单胞菌(Porphyromonas endodentalis)ATCC34506、中间普雷沃菌(Prevotella intermedius)ATCC25611、人体普雷沃菌(Prevotellacorporis)ATCC33547、具核梭杆菌(Fusobacteriumnucleatum)ATCC25586、多形拟杆菌(Bacteriodes thetaiotaomicron)CDC1041-A、龋齿放线菌(Actinomyces odontolyticus)ATCC17929、粘性放线菌(Actinomycesviscosus)ATCC15987的MIC和MBC。 2.实验药物配伍试验：通过肉眼观察和测量pH值的变化情况来检测茶多酚和奥硝唑联用后的理化变化，然后使用紫外分光光度仪采用酒石酸亚铁比色法观测茶多酚联用奥硝唑吸收值及吸收曲线的变化情况，以此判断有无新物质生成。 3.实验药物联用的相关性评价：通过琼脂棋盘稀释法，采用FIC值为指标，分别检测茶多酚联用奥硝唑对牙龈卟啉单胞菌ATCC33277和381、牙髓卟啉单胞菌ATCC34506、中间普雷沃菌ATCC25611、具核梭杆菌ATCC25586等7种细菌抑菌作用的相互关系。结果1.通过琼脂稀释法发现：奥硝唑对9种供试菌的抗菌活性较佳。六种中药提取物中，茶多酚对9种供试菌的MBC和MIC值较低，提示茶多酚对9种实验细菌较其他5种中药提取物有着更强的抑菌能力；其次为厚朴酚和五倍子提取物，而大黄素、黄连素和黄芩甙相对较差。 2.茶多酚和奥硝唑供试液混合后，测得混合液在0,1,2,3,4h时点外观和pH值无明显变化，且紫外分光光度仪测得其吸收值和吸收曲线基本相同。 3.通过琼脂棋盘稀释法测得茶多酚联用奥硝唑对供试菌FIC值为0.508～1.000。结论(1)在六种中药提取物之中，茶多酚对9种牙周病原菌均有一定的抗菌活性，奥硝唑对该类厌氧菌抗菌效果更佳。(2)茶多酚和奥硝唑无配伍禁忌。(3)对牙周可疑致病菌而言，茶多酚和奥硝唑联用的抗菌效果为相加作用。
【图文】：

茶多酚,化学结构

图 2.1 茶多酚化学结构Fig 2.1 Tea polyphenols chemical structure活性受到溶液 pH 值、环境温度、底物浓度多酚抑菌活性的影响较大。在酸性和中性条持久稳定，当 pH 值为 7～8 时抗菌活性达，茶多酚的抗菌能力反而呈现下降趋势。性无明显变化，研究表明较长时间的低温处的抗菌活性无影响。司在上世纪 70 年代发明了第三代硝基咪唑1991 年收录于捷克药典。其外观为白色或味苦，水中溶解度约 2.6%。当奥硝唑作用氧环境和较低的氧化还原电位下，电子传递用的氨基，，通过破坏 DNA 的双螺旋结构或
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R781.4

【参考文献】