醋酸棉酚对人腺样囊性癌ACC-M细胞E-cadherin、p16基因甲基化及mRNA表达的影响

发布时间：2020-06-18 00:46

【摘要】：目的 1、观察体外应用醋酸棉酚(GAA)对人腺样囊性癌ACC-M细胞生长的影响； 2、检测GAA对人腺样囊性癌ACC-M细胞相关抑癌基因甲基化水平的影响； 3、检测GAA对人腺样囊性癌ACC-M细胞相关抑癌基因的mRNA表达的影响,为通过改变抑癌基因的甲基化状态治疗肿瘤提供实验和理论依据。 方法 1、常规培养人腺样囊性癌ACC-M细胞,用GAA处理细胞,显微镜下观察处理前后腺样囊性癌细胞ACC-M的形态学改变； 2、通过MTT法检测不同浓度的GAA对人腺样囊性癌ACC-M细胞生长的影响,并计算GAA作用的IC50值； 3、通过甲基化特异性PCR (MS-PCR)方法检测人腺样囊性癌ACC-M细胞在GAA作用48h、72h后相关抑癌基因甲基化状态的改变情况； 4、通过实时荧光定量PCR (RT-PCR)方法检测人腺样囊性癌ACC-M细胞在 GAA作用24h、48h、72h后相关抑癌基因mRNA的表达变化。 结果 1、MTT法检测显示,GAA作用24h-72h后,药物对人腺样囊性癌ACC-M细胞生长产生抑制作用,在一定剂量范围内具有浓度及时间依赖性。测得24h、48h、72h的IC5o值分别为45.36μmol/L、18.92μmo1/L、9.27μmo1/L； 2、MS-PCR检测显示,人腺样囊性癌ACC-M细胞内存在E-cadherin、p16基因的高甲基化。以终浓度19μmol/L、10μmol/L的GAA分别作用于人腺样囊性癌ACC-M细胞48h、72h, GAA对人腺样囊性癌ACC-M细胞的E-cadherin、p16基因启动子区CpG岛的高甲基化状态产生部分逆转作用； 3、RT-PCR检测显示,45μmol/L、19μmol/L、10μmol/L的GAA分别作用24h、48h、72h后,与对照组相比较,E-cadherin、 p16基因的mRNA表达水平升高(P0.05)。 结论 1、GAA能抑制人腺样囊性癌ACC-M细胞的生长,在一定的范围内,GAA对人腺样囊性癌ACC-M细胞的抑制性具有浓度及时间的依赖性； 2、人腺样囊性癌ACC-M细胞系中存在E-cadherin、p16基因启动子区CpG岛的高甲基化,且一定浓度的GAA能够使人腺样囊性癌ACC-M细胞系E-cadherin、p16基因启动子区CpG岛的甲基化程度降低； 3、一定浓度的GAA能够使人腺样囊性癌ACC-M细胞系E-cadherin、p16基因的mRNA表达水平增高,并在一定范围内与GAA的浓度及作用时间呈正相关。
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R739.87

【参考文献】

相关期刊论文 前6条

1 赖非云;张诠;吴秋良;卿菁;曹云;;E钙粘素在涎腺腺样囊性癌中的表达及其意义[J];癌症;2007年09期

2 史洪淼,周政,田芸,王玲,宿芳,李娜,郝立宏;上皮钙黏附素与肿瘤转移的研究进展[J];大连医科大学学报;2005年04期

3 邢雪荣,金岩,董绍忠,顾晓明;P27蛋白在涎腺腺样囊性癌中的表达及意义[J];第四军医大学学报;2001年14期

4 郭小玲,孙善珍,魏奉才;涎腺腺样囊性癌p16基因失活机制的研究[J];华西口腔医学杂志;2005年05期

5 史宏男,周正炎,顾云峰;涎腺腺样囊性癌细胞株p16基因缺失、突变及表达意义[J];口腔颌面外科杂志;2001年02期

6 黄汉;米磊;张斌;张卓;张辉;;涎腺腺样囊性癌组织中ILK和E-cadherin的表达及意义[J];口腔颌面外科杂志;2011年03期

相关博士学位论文 前1条

1 范小平;涎腺腺样囊性癌细胞中PTEN基因启动子区甲基化状态的研究[D];重庆医科大学;2010年

相关硕士学位论文 前2条

1 付帅;醋酸棉酚对人舌鳞癌Tca8113细胞生长及hMLH1和MGMT基因甲基化水平的影响[D];昆明医学院;2011年

2 柯小亮;涎腺腺样囊性癌转基因治疗研究[D];吉林大学;2009年

本文编号：2718424