Shh信号通路在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

发布时间：2020-06-22 14:08

【摘要】：目的：研究Shh信号通路主要分子Shh、Ptch、Gli-1在口腔鳞状细胞癌（oralsquamous cell carcinoma，OSCC）及正常口腔黏膜中的表达及相关性，并分析其表达与口腔鳞状细胞癌生物学特性之间的关系，探讨Shh信号通路在口腔鳞癌中发生、发展、转移过程中临床意义，为OSCC的治疗及预后提供理论依据。方法：1．采用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）方法对10例口腔鳞癌和5例正常口腔黏膜标本中Shh、Ptch、Gli-1的表达进行基因水平的检测。2．使用免疫组织化学的方法从蛋白水平检测Shh、Ptch、Gli-1在40例口腔鳞状细胞癌组织和30例正常口腔黏膜组织中的表达。并分析这三种蛋白的表达与OSCC发生、发展、生物学行为及预后的关系。结果：1．RT-PCR结果显示，ShhmRNA、PtchmRNA和Gli-1mRNA在口腔鳞状细胞癌中分别有6例、5例和7例表达阳性。在口腔鳞癌及正常口腔黏膜中，ShhmRNA的相对表达量分别为0.8756和0.2220，两组之间的相对表达量差异有统计学意义（P0.05）。PtchmRNA的相对表达量分别为1.0933和0.7079，两组之间的相对表达量差异有统计学意义（P0.01）。Gli-1mRNA的相对表达量分别为0.8984和0.6108，两组之间的相对表达量差异有统计学意义（P0.01）。可见，在部分口腔鳞状细胞癌组织中的ShhmRNA、PtchmRNA和Gli-1mRNA表达明显高于正常口腔黏膜组织，差异具有统计学意义（P0.05）。 2．免疫组织化学方法结果显示，在30例正常口腔黏膜Shh、Ptch、Gli-1三种蛋白均不表达，在40例OSCC组织中Shh、Ptch和Gli-1分别有25例、24例、和26例表达阳性。其中Shh在细胞质中表达阳性，Ptch、Gli-1主要定位于细胞质中，仅有少数在细胞核内表达。 3．Shh和Gli-1的表达与肿瘤的T分期、N分期及临床分期呈明显相关性（P0.05），而与肿瘤的分化程度无明显相关性。Ptch在OSCC中的表达与肿瘤分化程度无明显相关性（P0.05），在T分期、临床分期高的组织Ptch的表达升高，但无统计学意义（P0.05），而Ptch蛋白的表达与N分期有显著相关性（P0.05㖞，差异有统计学意义。 4．在口腔鳞癌组Shh表达阳性的患者，Ptch、Gli-1的表达水平亦高，我们应用等级相关性分析，结果表明，Shh、Ptch、Gli-1的表达呈正相关龴rs=0.527，0.406，0.578，P＜0.05㖞。结论：1．在口腔鳞状细胞癌组织中Shh信号通路关键分子Shh、Ptch和Gli-1高表达，提示在口腔鳞状细胞癌组织中Shh信号通路被激活。 2．Shh和Gli-1的阳性表达与口腔鳞癌的T分期、N分期、临床分期有一定关系，Ptch的阳性表达也与N分期显著相关，说明Shh信号通路的激活可能参与口腔鳞状细胞癌的发生、发展和转移。 3．在口腔鳞状细胞癌中Shh、Ptch和Gli-1两两之间的表达呈正相关龴rs=0.527，0.406，0.578，P＜0.05㖞，三者之间相互协调共同促进口腔鳞癌的发生、发展、转移，Shh信号通路的激活可以作为判断口腔鳞癌生物学行为的重要参考指标。 4．Shh、Ptch和Gli-1作为Shh信号通路的关键分子有望成为口腔鳞状细胞癌评价预后和靶向治疗的新方法。
【学位授予单位】：蚌埠医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R739.8
【图文】：

口腔鳞癌,表达差异,正常组织

图 I:ShhmRNA 在口腔鳞癌及配对正常组织中的表达差异。3.Ptch 的 PCR 扩增结果（1）Ptch 在口腔鳞状细胞癌中的表达同样的方法对 Ptch 进行扩增时发现，在 DNA Ladder290bp 处出现明暗相交的条带，即为目的基因 Ptch；在 113bp 出现的明暗相交的条带即为内参 GAPDH。如图 3，可以看出该目的基因在 OSCC 组织中较正常口腔黏膜组织中明显高表达。10例口腔鳞癌中有 5 例出现高表达。（2）PtchmRNA 在 OSCC 及其对照组正常口腔黏膜组织中的差异PtchmRNA 在 OSCC 组织的表达强度（1.0933±0.01936）比口腔正常黏膜组织中的表达强度（0.7079±0.0836）存在明显差异（图Ⅱ），并且经统计学分析差异有统计学意义。见下表 3表 3.PtchmRNA 在口腔鳞状细胞癌组织及配对正常组织中的差异

电泳图,电泳图

总RNA电泳图

【参考文献】