半导体量子点对舌鳞癌细胞Tca8113生物学行为的影响

发布时间：2020-07-02 05:10

【摘要】： 目的:半导体量子点(Semiconductor quantum dots,QDs)作为一种新型的纳米材料,由于具有独特的光谱特性和良好的光化学稳定性,它提供了对活细胞成像和对活细胞内分子进行长期追踪观察研究的可能,但用量子点标记癌细胞后是否影响其生物学行为是量子点能否用于肿瘤活细胞可视化研究的关键所在。本课题利用半导体量子点[CdSe/ZnS]标记舌鳞癌细胞Tca8113,观察被量子点标记后的Tca8113细胞其生长、浸润、转移等生物学行为的改变情况,为半导体量子点用于活体肿瘤细胞的实时原位“在线”研究提供依据。方法:首先在激光共聚焦显微镜(confocal microscopy,CM)下观察量子点的发光颜色,发光强度和形态,将Tca8113细胞接种在24孔培养板内,细胞贴壁后加入量子点共同培养,然后在相差倒置荧光显微镜(fluorescence microscope,FM)下观察量子点进入细胞内的情况。将生长旺盛的Tca8113细胞,加入不同高浓度(0.1μMol,1μMol,2μMol)的半导体量子点[CdSe/ZnS],观察Tca8113细胞生长的情况,绘制细胞生长曲线。检测量子点标记的Tca8113细胞对其生物学行为的影响,包括:细胞侵袭重建基底膜实验在transwell小室中进行,将穿膜细胞的平均数来表示肿瘤细胞的侵袭能力;Hank’s液轻洗2遍收集未粘附细胞计数,每时间点随机取3孔求平均值,计算不同时间的粘附率。聚碳酸多孔滤膜表面未铺matrigel,其余步骤和方法与侵袭实验相同,以穿膜细胞的平均数来表示肿瘤细胞的趋化运动能力。结果:在激光共聚焦显微镜下量子点为接近圆型的椭圆红色荧光体,最大发射波长为605nm,荧光强度为250。加入量子点40分钟可见量子点开始进入细胞内,80分钟细胞内已有较多的量子点,120分钟已有大量的量子点进入细胞,量子点主要分布在胞浆内。对照组和不同浓度量子点标记的Tca8113细胞在各个时间点生长曲线基本一致。用量子点标记的Tca8113/QDs细胞和未标记的Tca8113细胞,其穿膜细胞均数分别为74.6±3.2、76.5±2.8,两均数间无显著差异(P㧐0.05)。在同一个时间点(30min、60min、90min、120min)量子点标记的Tca8113/QDs细胞和未标记的Tca8113细胞的粘附率没有显著性差别,说明经量子点标记后的Tca8113细胞其粘附能力未发生改变。量子点标记的Tca8113/QDs细胞和未标记的Tca8113细胞侵袭至滤膜下表面的细胞数目分别为83.8±4.1、85.4±3.7,两均数间无显著差异(P㧐0.05),说明经量子点标记后的Tca8113细胞未影响其趋化运动能力。结论:量子点能够以内吞方式进入Tca8113活细胞内,进行细胞成像,从而可用来进行细胞表面标记和细胞内标记,作为活细胞内的标记物进行显像奠定了基础。量子点在激光共聚焦显微镜下量子点表现为接近圆型的椭圆红色荧光体,最大发射波长为605nm,荧光强度为250。在Tca8113活细胞中,量子点主要分布在胞浆内。不同浓度量子点(0.1μMol,1μMol,2μMol)标记的Tca8113细胞对Tca8113细胞的生长没有影响。经量子点标记后的Tca8113细胞的侵袭能力和趋化运动能力没有影响。在同一个时间点(30min、60min、90min、120min)Tca8113/QDs和Tca8113细胞的粘附率没有显著性差异。本实验证明了在Tca8113细胞内标记高密度的[CdSe/ZnS]量子点后对癌细胞的侵袭、粘附及趋化运动能力等生物学行为没有影响,为建立基于半导体量子点为基础的技术平台在活体生理条件下对肿瘤细胞和细胞内分子进行实时动态“在线”研究提供了科学依据。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R739.8
【图文】：

半导体量子点

半导体量子点[CdSe/ZnS]

半导体量子点,荧光显微镜,细胞的

26(C)图 2. 半导体量子点[CdSe/ZnS]对 Tca8113 细胞的标记（倒置相差荧光显微镜下，×200）Fig.2 Semiconductor quantum dots’ mark to Tca8113 cell(Under FM, ×20和(C)分别显示[CdSe/ZnS]在 40 分钟、80 分钟和 120 分钟进入 Tca8113 细nd (C) separately demonstrated the situation when [ CdSe/ZnS ]enters the cell nute, 80minute and 120 minutes

【共引文献】