诱导骨髓间充质干细胞分化为唾液腺腺泡样细胞以及裸鼠体内移植实验

发布时间：2020-07-06 07:14

【摘要】：唾液腺是人体重要的腺体，是维持食物的摄取、消化、言语等口腔以及消化道正常功能必不可少的外分泌腺，也有内分泌功能。唾液腺损伤甚至缺失，导致口腔干燥、咀嚼及进食障碍、味觉改变、龋齿易感等，很大程度影响了患者的生活质量。组织工程化的唾液腺为这一难题带来希望，其方法是通过将种子细胞接种到生物支架材料上，体内移植以修复受损器官。 本研究通过将SD大鼠骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymalstem cells，BMSCs）诱导为唾液腺腺泡样细胞(Salivary gland acinar-like cells,SGACs)，结合三维支架材料进行裸鼠体内移植，探讨其修复效果。 首先，提取SD大鼠BMSCs，体外培养，纯化及鉴定，通过培养液将BMSCs诱导为SGALCs。然后，采用胶原和壳聚糖按一定比例配置成适合细胞附着的三维支架材料。实验分为两组：①实验组：将诱导成为SGALCs接种于支架材料上；②对照组：将培养的BMSCs接种于支架材料上。最后，将复合细胞的支架材料进行裸鼠皮下移植，1W，2W取材，免疫荧光法检测示踪的两组细胞是否表达唾液腺细胞的特异性蛋白α-淀粉酶（α-amylase，AMY）。结果发现，实验组细胞在移植1W，2W都能表达AMY。而对照组呈阴性。 本实验通过体外构建一个可控的人工诱导环境，利用培养液将SD大鼠BMSCs成功诱导为SGALCs。构建了适合细胞粘附生长的三维胶原-壳聚糖支架材料。同时将诱导成为SGALCs接种于三维胶原-壳聚糖支架材料进行裸鼠体内移植，并取得理想效果。为进一步构建组织工程化的唾液腺提供了实验依据。
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R78
【图文】：

图 1 SD 大鼠颌下腺组织 图 2 SD 大鼠颌下腺组织经 AMY染色呈阳性（×100）图 3 SD 大鼠颌下腺组织经 Ck-8 图 4 SD 大鼠颌下腺组织经 Vimentin染色阳性（×200） 染色阴性（×200）

图 1 SD 大鼠颌下腺组织 图 2 SD 大鼠颌下腺组织经 AMY染色呈阳性（×100）图 3 SD 大鼠颌下腺组织经 Ck-8 图 4 SD 大鼠颌下腺组织经 Vimentin染色阳性（×200） 染色阴性（×200）

SD大鼠颌下腺组织经Ck-8

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本文编号：2743326