rhIGF-1对大鼠正畸牙移动过程中破骨细胞数量及其c-Src表达的影响

发布时间：2020-07-19 20:17

【摘要】： 破骨细胞(osteoclast)是骨吸收的效应细胞。它参与牙槽骨的改建,对正畸牙牙齿的移动有着重要的影响。胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1.IGF-1)可调节成骨细胞和破骨细胞的分化及功能活性,与骨改建过程密切相关。c-Src是整合素介导的细胞信号传导通路的重要环节的激酶,对于破骨细胞募集、黏附以及细胞骨架的重组发挥着重要的作用。本实验拟从蛋白水平探讨关于IGF-1促进牙周改建及其对正畸牙移动过程中破骨细胞功能活性的机制。 目的:利用大鼠正畸牙动物移动模型.观察注射外源性rhIGF-1后对正畸牙牙齿移动的影响、牙周组织中破骨细胞数量及其c-Src表达变化,为正畸临床使用IGF-1来加速牙齿移动提供可靠的理论依据。 方法:于SD大鼠上颌左侧第一磨牙和上切牙间安放矫治装置并施以50g力,建立大鼠上颌磨牙近中移动模型。将80只模型大鼠随机分为对照组(A组)和实验组(B组),每组40只,再按观察时间不同(1d、4d、7d、10d、14d)将A组和B组各分五个亚组(A1/B1、A4/B4、A7/B7、A10/B10和A14/B14),每组8只。实验组从动物模型建立开始每2天于左侧上颌第一磨牙颊侧粘膜处注射400ng的rhIGF-1,注射体积0.1ml,对照组注射相同体积PBS。观察1d、4d、7d、10d、14d(从加力的第1天计算)处死大鼠,多聚甲醛透心灌注固定。分别于实验前后对左上颌磨牙区取模,超硬石膏灌注模型,用YR-MV1.0显微图像测量软件测量模型中正畸牙移动的距离。取大鼠左侧上颌第一磨牙牙周组织进行组织学观察,采用TRAP组织化学法观察破骨细胞数量,免疫组织化学方法观察破骨细胞内表达c-Src的变化。 结果:1、压力侧破骨细胞数量的变化:①在加力后压力侧牙周膜中破骨细胞的数量逐渐增多:②在各观察时间点,B组压力侧破骨细胞的数量均大于A组;破骨细胞的数量A组在第7天时达最高峰,B组是第4天,A、B两组在最高峰时的破骨细胞数量差异有统计学意义(P＜0.001)。③除B1与B4组组内比较差异无统计学意义(P＞0.05),其余各组组内比较差异均有统计学意义(P＜0.001)。2、牙齿移动距离测量:①随着时间的增加,加力后牙齿移动的距离增加:②注射rhIGF-1后大鼠正畸牙移动距离在各观察的时间点均大于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);③注射1天时,正畸牙移动距离A、B两组间无统计学差异(P＞0.05);而其他时间点均有明显差异(P＜0.001)。3、破骨细胞中c-Src的表达:c-Src在压力侧破骨细胞中表达呈现一定的规律,加力后破骨细胞中c-Src表达迅速升高,A组在第7天达到高峰,B组在第4天达到高峰,随之缓慢下降。B组中压力侧破骨细胞内c-Src的表达均明显高于A组(P＜0.01)。 结论:①外源性rhIGF-1可增加正畸牙牙周组织中破肯细胞的数量,增强其吸收功能,促进正畸牙牙周组织的改建。②IGF-1能上调破骨细胞中c-Src的表达,促进骨吸收,加速了正畸牙的移动。
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R783.5
【图文】：

以利于结扎丝固定。上领两切牙联扎固定作为支抗牙，将一根镍钦螺旋拉簧按509力值设计，固定于上切牙与第一磨牙之间形成一个加力装置，使左侧上领第一磨牙近中移动，同时磨短下前牙，防止加力装置被咬断(图1)。定期监测矫治器，若有损坏和脱落，及时安装。所有动物在初戴矫治器两天内辅以软食，之后自由摄食。 2.3SD大鼠随机分为两个大组将80只模型大鼠随机分为对照组(A组)和实验组(B组)，每组40只，再按加力后观察时间(ld、4d、7d、10d、14d)不同将A组和B组各分五个亚组(Al忍1、A4旧4、A7忍7、A10忍10天和A14旧14)，每组8只。B组从动物模型建立开始每2天于左侧上领第一磨牙颊侧粘膜处注射40Ong的rhIGF一1，注射体积0.lml，A组注射相同容量的PBS。图1大鼠正畸骨改建试验模型加力装t Fig.1TheorthodontiesaPPlianee2.4制备大鼠左上领第一磨牙牙周组织石蜡标本(1)在加力1d，4d

.J，’图2.压力侧破骨细胞组织学观察(x400) Fig.2Histologlealobservationsofos俪 clastseellsineompressionside(x400)Al:对照组第1天;Bl:实验组第1天;A4:对照组第4天;B4:实验组第4天;A7:对照组第7天;B7:实验组第7天;A10:对照组第10天;B10:实验组第10天;A14:对照组第14天;B14:实验组第14天;.峥所指为破骨细胞从图2中可见，加力第1天，实验组和对照组均出现少量破骨细胞，细胞形态较小，细胞内含的细胞核较少;加力第4天后，B组较A组破骨细胞的数量增多，细胞体积增大，胞核数量增多，染色深;牙槽骨上出现明显的骨吸收陷窝;加力第7天，B组较A组破骨细胞的数量增多，牙槽骨上出现明显的骨吸收陷窝;第10天至第14天

窝;第10天至第14天，破骨细胞数量变化不大，骨陷窝较平。阳性对照:在HE染色的阳性对照中可见牙槽骨表面有不规则的骨陷窝，其表面的可见多核嗜酸性巨细胞(蓝色箭头所指，图3左图)。阴性对照:对照组孵育的TRAP试剂中不加蔡酚AS一BI磷酸钠溶液，压力侧可见细胞核蓝染，但胞浆未见着色(图3右图)。I公一了迄、今夕矛，·、、洲~‘’一丫一:;J‘万、:一心..，图3大鼠正畸牙压力侧破骨细胞的HE染色阳性对照切片(左侧)(x400)大鼠正畸牙压力侧破骨细胞的TR^p染色阴性对照切片(右侧)(x400) Fig.3OsteoelastsstainedwithHEonthePressuresideofPositiveeontrol(left)(x400) TRAPnegativeosteoclastsonthePressureside(right)(x400)

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本文编号：2762913