VEGF-C上调电压门控钠通道Nav1.5表达促进口腔鳞癌细胞增殖、侵袭和迁移

发布时间：2020-07-27 16:02

【摘要】：研究背景及目的口腔癌是发生于人口腔颌面部区域内的肿瘤,其中口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)最多见、恶性程度较、晚期经常发生淋巴结或者远处转移,因此OSCC治疗起来比较困难并且致死率高。目前急需要对其具体的转移机制进行研究从而降低OSCC的死亡率。电压门控钠通道(voltage-gated sodium channels,VGSC)是一种跨膜蛋白,可以控制离子流动穿过细胞膜。它们是可兴奋组织中动作电位的关键离子通道,具有重要的生理功能。VGSCs的功能异常将导致机体功能障碍并引发多种生理疾病。越来越多的文献报道,电压门控钠离子通道在多种转移性癌细胞及癌组织中存在异常的高表达,如前列腺癌、乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌等,并且能促进癌细胞的侵袭和转移等行为,另外阻断VGSC的通道活性也可明显减少肿瘤细胞的转移,从而推测VGSC与癌细胞的转移等恶性行为有着一定的联系。另外多项研究还发现了一些调节VGSC表达和功能的分子机制,如生长因子和激素。其中,血管内皮生长因子C(Vascular endothelial growth factor,VEGF-C)可诱导血管生成,促进淋巴管生成和扩张,这与肿瘤转移密切相关。并且,VEGF-C的表达水平在多数侵袭性肿瘤中较高,且与癌症患者的预后不良紧密相关。本实验探讨VEGF-C是否可以通过上调电压门控钠通道亚型Nav1.5的表达以促进口腔鳞癌细胞HSC-3的增殖、侵袭及转移。为口腔鳞状细胞癌转移的分子标志物和治疗靶点的临床开发提供了新的思路和初步的理论依据。方法1、采用Western blot方法检测VEGF-C对口腔鳞癌细胞HSC-3中Nav1.5蛋白表达水平的影响。2、采用q RT-PCR方法检测VEGF-C对口腔鳞癌细胞HSC-3中Nav1.5 m RNA表达水平的影响。3、使用Transwell实验检测VEGF-C和Nav1.5对HSC-3细胞迁移和侵袭的作用。4、使用CCK-8实验检测VEGF-C和Nav1.5对HSC-3细胞增殖的作用。结果1、VEGF-C可以上调HSC-3细胞中Nav1.5 m RNA和蛋白的表达水平;2、VEGF-C以剂量依赖的方式促进HSC-3细胞的增殖、迁移和侵袭;3、VGSC抑制剂TTX阻断了VEGF-C对HSC-3细胞增殖、迁移和侵袭的促进作用。结论血管内皮生长因子VEGF-C可以通过上调Nav1.5表达促进口腔鳞癌细胞HSC-3的增殖、迁移和侵袭能力。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R739.8
【图文】：

结果-C 上调 HSC-3 细胞中 Nav1.5 蛋白和 mRNA 的表达同浓度的 VEGF-C（50、100、200 ng/l） 处理 HSC-3 细胞蛋白和 RNA。使用 Western blot 法检测处理后细胞中 Nav1.5 50、100、200 ng/l VEGF-C 刺激 HSC-3 细胞后，Nav1.5 蛋（图 1）。用 qRT-PCR 方法检测结果显示 50、100、200 ng 细胞后，与对照组 A 组相比，细胞中 Nav1.5 mRNA 水平计学意义（F=49.10,P<0.001）（图 2）。这些结果表明 VEG诱导 HSC-3 细胞中 Nav1.5 的表达。

图 2 不同浓度的 VEGF-C 处理细胞后 Nav1.5 mRNA 水平ression of Nav1.5 mRNAafter treatment with different concen处理组；B：50 ng/LVEGF-C；C：100 ng/LVEGF-C；D：**P<0.01，*** P<0.001 处理促进 HSC-3 细胞的迁移、侵袭ll 法检测细胞的迁移和侵袭，结果显示用 50、100、胞 24h 后，以剂量依赖的方式显著增强了 HSC-3 细、D 组与 A 组对比）和侵袭能力（图 4 中的 B、C、-C 上调 Nav1.5 的蛋白和 mRNA 表达的趋势一致。使异有统计学意义，迁移实验（F=249.0,P<0.0001），

以剂量依赖的方式显著增强了 HSC-3 细胞的迁移能力（图3 中的 B、C、D 组与 A 组对比）和侵袭能力（图 4 中的 B、C、D 组与 A 组对比），并与 VEGF-C 上调 Nav1.5 的蛋白和 mRNA 表达的趋势一致。使用方差分析检验结果显示，差异有统计学意义，迁移实验（F=249.0,P<0.0001），侵袭实验（F=479.8，P<0.0001）。

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本文编号：2772058