牙龈卟啉单胞菌感染的动脉粥样硬化患者调节性T细胞的分布特征

发布时间：2020-07-27 13:44

【摘要】：牙周致病菌p.gingivalis的感染与AS的发病具有紧密的联系,且日益受到医学界的关注。Treg在AS自身免疫应答中起到关键作用,然而,在AS的发生中,P.gingivalis的感染与Treg的关系还鲜有报道,不同遗传型的P.gingivalis与AS发病之间的关系也仍不清楚。本实验通过检测P.gingivalis特异性IgG抗体临床筛选p.gingivalis感染患者,分析P.gingivalis感染与Treg水平和功能的关系,从而探讨感染免疫机制在牙周炎与AS关系中的作用。 第一部分牙龈卟啉单胞菌感染动脉粥样硬化患者外周血调节性T细胞分布 目的：分析P.gingivalis感染的AS患者Treg分布情况。 材料与方法：通过临床检查及实验室检测,筛选出40例P.gingivalis感染的AS患者列为Pg-AS组、32例单纯Pgingivalis感染而无AS罹患者为Pg组、29例健康志愿者为HC组,采集患者及健康志愿者外周静脉血,淋巴细胞分离液提取外周血单个核细胞,通过CD4,CD25,FOXP3流式抗体标记并流式细胞仪检测CD4-CD25+T细胞及CD4+CD25+FOXP3+Treg含量,ELISA方法检测患者血浆中TGF-β1浓度,非参数检验统计分析三组患者CD4+CD25+T细胞及CD4+CD25+FOXP3+Treg含量差异及TGF-b1浓度差异。 结果：Pg-AS组外周血中CD4+CD25T细胞含量为4.27%(1.55-10.95%),Pg组为4.85%(1.49-10.80%),HC组为4.56%(1.30-10.60%),各组间无统计学差异。Pg-AS组CD4+CD25+FOXP3+Treg占CD4+T细胞含量为1.95%(0.67-4.43%),比Pg组3.38(1.43-7.10)及HC组3.14%(0.78-5.40%)均减少,且差异具有统计学意义,而Pg组与HC组间无统计学差异。Pg-AS组血浆TGF-β1浓度比Pg组及HC组均降低。TGF-β1浓度与之间CD4+CD25+FOXP3+Treg占CD4+T细胞数目之间存在正相关(r=0.615,P0.001)。 结论：Pg-AS患者外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg数量及功能均降低,AS患者Treg下降与P.gingivalis感染相关。 第二部分牙龈卟啉单胞菌FimA遗传型与调节性T细胞分布的关系 目的：分析P.gingivalis感染的AS患者FimA遗传型与Treg分布的相关性,筛选与AS患者Treg下降相关的优势遗传型菌株。 材料与方法：采集Pg-AS组及Pg组患者龈下菌斑,提取细菌基因组DNA,利用特异性引物,使用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)方法,检测P.gingivalis菌毛蛋白FimA基因型,分析各遗传型在龈下菌斑的检出率。由于遗传型Ⅱ型P.gingivalis检出率最高,统计学分析患者P.gingivalis Ⅱ型菌毛感染与CD4+CD25+FOXP3+Treg分布的关系。 结果：Ⅰ-V和Ⅰb型P.gingivalis在Pg-AS组及Pg组患者龈下菌斑的检出率各不相同,其中Ⅱ型在两组中的检出率均最高,分别为65%和59.4%。Pg组中,Ⅱ型P.gingivalis患者CD4+CD25+FOXP3+Treg含量与其他基因型者无差异。Pg-AS组中,Ⅱ型P.gingivalis患者CD4+CD25+FOXP3+Treg含量为1.82%(0.87-3.78%),较其他基因型的患者2.65%(1.17-4.43%)明显减低,两者差异具有统计学意义。 结论：慢性牙周炎龈下菌斑中的P.gingivalis主要是Ⅱ型,Ⅱ型遗传型可能是P.gingivalis与AS患者Treg降低关系中的主要遗传型。 综上所述,本研究筛选Pg-AS患者、Pg患者及HC者,比较三组患者外周血中Treg的含量及功能因子TGF-βi浓度的差异,并分析龈下菌斑P.gingivalis分型与Treg的关系,结果表明AS患者对P.gingivalis的免疫反应较强,AS患者Treg数目及功能降低与P.gingivalis感染相关,且Treg的降低可能与Ⅱ型菌毛基因型密切相关。
【学位授予单位】：南京大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R781.4

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本文编号：2771918