miRNA-361在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其对细胞功能影响的研究

发布时间：2020-08-13 15:28

【摘要】：第一部分miRNA-361在口腔鳞癌组织中的表达及意义目的:通过实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative Polymera se Chain Reaction,q RT-PCR)技术检测口腔鳞癌组织及正常口腔粘膜组织中miRNA-361的表达水平,分析其表达与口腔鳞癌患者临床特征之间的关系,探讨mi RNA-361在口腔鳞癌发生、发展中的作用。方法:1采用实时荧光定量PCR检测miRNA-361在口腔鳞癌组织及正常口腔粘膜组织中的表达水平。研究其表达水平与患者年龄、性别、临床分期、颈淋巴结转移之间的相关性。2应用SPSS21.0统计软件对实验数据进行统计学分析,采用两组独立样本比较的t检验及独立样本配对t检验,比较各组实验数据之间的差异,取P0.05,认为差异有统计学意义。结果:1.mi RNA-361在口腔鳞癌组织和正常口腔粘膜组织中的表达量分别为10.93±3.32、13.68±2.47,miRNA-361在口腔鳞癌组织中的表达量低于正常口腔粘膜组织,差异有统计学意义(P0.05)。2.mi RNA-361在临床分期中Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期的相对表达量分别为12.31±3.14、9.00±2.57,临床分期中Ⅰ、Ⅱ期中miRNA-361的表达量高于Ⅲ、Ⅳ期,差异有统计学意义(P0.05)。mi RNA-361在颈淋巴结转移组与无颈淋巴结转移组中的相对表达量分别为9.66±2.88、12.21±3.30,颈淋巴结转移组的表达量低于无颈淋巴结转移组,差异有统计学意义(P0.05)。与患者年龄、性别无关(P0.05)。小结:miRNA-361在口腔鳞癌中的表达低于口腔正常粘膜组织,其表达量与临床分期和颈淋巴结转移相关,mi RNA-361在口腔鳞癌中可能起抑癌基因的作用,并参与了口腔鳞癌的发生、发展及转移过程。第二部分miRNA-361对口腔鳞癌细胞株TCA-83生物学行为的影响目的:建立体外细胞研究模型,检测miRNA-361对口腔鳞癌细胞株TCA-83增殖、迁移功能的影响,为深入研究miRNA-361的分子机制奠定理论基础。方法:1选取口腔鳞癌细胞株TCA-83进行培养,在细胞中转染miRNA-361 minics,将转染miRNA-361 minics作为实验组,同时设立转染阴性对照试剂的阴性对照组及空白对照组,转染后24小时测定三组细胞中miRNA-361的表达水平。2 MTS比色分析法检测1d、2d、3d、4d、5d时段的OD值,绘制细胞生长曲线。3平板克隆形成实验观察转染mi RNA-361 minics后口腔鳞癌细胞TCA-83集落形成情况。4 Transwell实验检测miRNA-361对口腔鳞癌细胞株TCA-83迁移能力的影响。5应用spss21.0软件对数据进行统计分析,数据以均数±标准差表示。两组间配对样本选择t检验,两组间独立样本采用Mann-Whitney检验。结果:1.转染24h后,实验组口腔鳞癌细胞TCA-83中miRNA-361的表达明显高于阴性对照组及空白对照组。2.实验组在转染后1d、2d、3d、4d、5d的OD值均低于阴性对照组和空白对照组。在3d出现显著差别,实验组、阴性对照组、空白对照组的OD值分别为0.432±0.017、0.634±0.019、0.661±0.022,m iRNA-361实验组与阴性对照组和空白对照组相比,差异有统计学意义(P㩳0.05)。3.实验组、阴性对照组、空白对照组穿透基底膜细胞数分别为101.33±3.06、194.33±8.08和202.67±11.15,与阴性对照组、空白对照组相比,miR-361实验组迁移能力明显减弱,差异有统计学意义(P㩳0.05)。4.实验组、阴性对照组及空白对照组的细胞克隆形成率分别为3.42%±0.17%、7.36%±0.209%和7.70±0.23%。实验组口腔鳞癌细胞TC A-83克隆形成能力明显低于阴性对照组及空白对照组,差异有统计学意义(P㩳0.05)。小结:上调的mi RNA-361可抑制口腔鳞癌细胞株TCA-83的增殖和迁移功能,推测miRNA-361在口腔鳞癌的增殖和迁移过程中可能作为抑癌基因发挥作用。结论:miRNA-361在口腔鳞癌组织中表达下调,其表达量的改变能够影响口腔鳞癌细胞TCA-83增殖、侵袭等生物学行为。推测miRNA-361在口腔鳞癌的发生、发展和迁移过程中可能作为抑癌基因发挥作用,并可能成为口腔鳞癌诊断、治疗新的生物学标志物。
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R739.8
【图文】：

扩增曲线

QRT-PCR扩增曲线

溶解曲线

QRT-PCR溶解曲线

3 miRNA-361 在口腔鳞癌组织与口腔正常粘膜组织中的相达量.3 The relative expression level of miRNA-361 in normal anal squamous cell carcinoma

【参考文献】