HIF-1α、OPN在SD大鼠TMJOA髁突软骨中表达变化的实验研究

发布时间：2020-09-03 19:17

　　 [目的]建立SD大鼠TMJOA动物模型,并对髁突组织学改变进行评价。检测HIF-1α、OPN在髁突软骨中的表达变化,探讨HIF-1α、OPN在大鼠TMJOA中的作用,为TMJOA发病机制的研究提供实验依据。[方法]8周龄雄性SD大鼠,随机分为实验组和对照组,通过在大鼠右上第一磨牙牙面粘接正畸丝造成咬合创伤的办法建立TMJOA动物模型。建模后1w、2w、4w、6w、8w、10w分批处死动物(实验组每组5只,对照组2只),取双侧髁突经过固定,脱钙,脱水,包埋后制作石蜡切片。HE及TRAP染色后进行髁突软骨Mankin组织评分,软骨下骨骨形态计量分析以及骨软骨交界处破骨细胞计数;免疫组化染色检测建模后不同时间点SD大鼠髁突软骨中HIF-1α、OPN的表达变化,比较实验组与对照组以及实验侧与非实验侧之间的差别。[结果]1.HE染色结果:Mankin组织评分结果显示实验组中实验侧建模后2w,非实验侧建模后4w出现TMJOA早期病变,表现为软骨细胞弥漫性增多,各层次轻度紊乱,分界不清;软骨表面凹凸不平,增殖层内出现裂隙及无细胞区。软骨下骨组织形态改变:实验侧Tb.Th、Tb.Sp、BV/TV、Tb.N分别在建模后1w、2w、4w、10w高于对照组(P0.05)。非实验侧:BV/TV建模后4w低于对照组(P0.05);Tb.Sp建模后2w高于对照组(P0.05);Tb.Th、Tb.N建模后8w高于对照组(P0.05)。实验组中实验侧与非实验侧在8w、10w差异有统计学意义(P0.05)。2.TRAP染色结果:与对照组相比,实验侧建模后1w,非实验侧建模后2w破骨细胞数量增多(P0.05),8w达最大值。实验侧与非实验侧在1w差异有统计学意义(P0.05)。3.免疫组化结果显示:HIF-1α,OPN主要在肥大软骨层及钙化软骨层细胞核及其胞质中表达。与对照组相比,实验侧HIF-1α阳性表达在建模后2w明显增强(P0.05),4w、8w 降低(P0.05),1w、6w、10w 无统计学差异(P0.05)。非实验侧HIF-1α在建模后2w高于对照组(P0.05),6w降低(P0.05),1w、4w、8w、10w无统计学差异(P0.05)。HIF-1α在建模后2w实验侧高于非实验侧(P0.05),4w低于非实验侧(P0.05)。与对照组相比,实验侧OPN阳性表达在建模后1w明显升高,2w降低,4w、6w升高,8w、10w降低(P0.05)。非实验侧2w降低,4w升高,6w、10w降低(P0.05)。实验侧与非实验侧相比,实验侧OPN表达在6w高于非实验侧,8w低于非实验侧(P0.05)。[结论]1.本实验通过在SD大鼠牙面上粘接正畸丝成功建立了 TMJOA动物模型。髁突软骨及软骨下骨均发生了病理改变,表现为髁突软骨层细胞分层紊乱,软骨裂隙出现,细胞减少及增生性聚集;软骨下骨破骨细胞数量增加,骨改建活跃。2.TMJOA中HIF-1α、OPN主要表达于肥大层及钙化软骨层细胞核及胞质中,参与了髁突软骨的改建。
【学位单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R782.6
【部分图文】：

大鼠,粘接,标记笔,禁水

逡逑图１－１实验材料逦图卜２粘接用正畸丝逡逑Ｉ邋、一＾逦＿逡逑图１－３麻醉后ＳＤ大鼠逦图１－４粘接后情况逡逑％－丨丨．＿邋哪逡逑图１－５粘接模型图逦图１－６粘接完成图逡逑２．２石蜡切片制作逡逑２．２．１取材及固定逡逑分别于建模术后ｌｗ、２ｗ、４ｗ、６ｗ、８ｗ、１０ｗ处死ＳＤ大鼠。实验前一天逡逑大鼠禁食、当天禁水，通过腹腔注射过量１０％水合氯醛处死ＳＤ大鼠。通过开闭逡逑口运动扪触到ＴＭＪ所在位置，用标记笔做标记。消毒术区后用眼科剪从大鼠口逡逑角Ｋ剪开皮肤，沿咬肌区向所标记部位分离解剖，待大鼠ＴＭＪ完全曝露后，逐逡逑层剪开关节周围附着的肌肉和筋膜，分离取出左右两侧髁突。生理盐水冲洗，以逡逑１３逡逑

粘接,大鼠

大鼠,粘接,标记笔,禁水

【参考文献】