CSPG4与EMT转录因子SNAIL、TWIST1在OSCC中的表达的初步研究

发布时间：2020-09-18 15:50

　　 背景:上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、硫酸软骨素蛋白聚糖4(chondrioditin ulfatepro-teoglycans 4,CSPG4),在恶性肿瘤及系统性疾病各领域研究中均有发现且发挥这相应的作用,但在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cells carcinoma,OSCC)中的研究探索相对较少,本实验拟检测EMT相关转录因子SNAIL和TWIST 1及CSPG4在OSCC组织及OSCC癌旁组织的蛋白和mRNA水平,推测EMT相关转录因子SNAIL、TWIST 1以及CSPG4与OSCC的关系,为后期研究CSPG4在OSCC中的具体机制提供理论依据。目的:通过免疫组织化学及RTPCR检测CSPG4、SNAIL、TWIST 1在OSCC组织中的表达,探讨CSPG4、SNAIL、TWIST 1与OSCC的关系,为早期诊断、预防等方面提供理论依据。方法:(1)提取OSCC患者癌组织、癌旁组织中的CSPG4、SNAIL、TWIST 1的RNA,采用实时荧光定量PCR验证mRNA在上述各项中的表达水平,进一步解析CSPG4、SNAIL、TWIST 1在OSCC中的作用机制。(2)采用免疫组织化学技术,检测在OSCC患者的癌组织和癌旁组织中CSPG4、SNAIL、TWIST 1蛋白表达。结果:(1)、CSPG4在OSCC癌组织中大量表达,染色评分较癌旁组织升高(P0.001),在癌组织中,CSPG4蛋白主要表达于癌细胞胞质及胞膜广泛表达,胞膜深染,角化珠不着色,癌旁正常组织CSPG4蛋白于癌旁正常上皮中少量表达。结合病例资料CSPG4的蛋白表达与患者年龄、民族、T分期及OSCC分化程度无关(P0.05),与性别、淋巴结转移及临床分期相关,男性OSCC患者的SCPG4蛋白表达水平比女性高(P0.05),OSCC伴淋巴结转移组较非转移组高(P0.01),临床分期III-IV期较I-II期高(P0.05),在男性患者组、转移组及III-IV期组阳性率较高,染色强度强,女性患者组、非转移组及I-II期组阳性率较低,染色强度较弱。CSPG4 mRNA的表达与患者年龄、民族、T分期及OSCC分化程度无关(P0.05),与性别、淋巴结转移及临床分期相关,男性患者中表达比女性高(P0.05),转移组较非转移组高(P0.05),临床分期III-IV期较I-II期高(P0.05)。(2)、Snail蛋白在OSCC组织中主要表达于癌巢组织,癌细胞胞质及胞膜,胞膜深染,角化珠不着色,在癌旁正常组织中,Snail蛋白主要表达于正常上皮基底层,往浅层方向角化层方向变浅。OSCC组织的Snail蛋白染色评分较癌旁正常组织高(P0.01)。结合临床病例信息,Snail蛋白的表达与患者性别、年龄、民族、T分期及OSCC分化程度无关(P0.05),与淋巴结转移及吸烟、饮酒情况相关(P0.05),应用实时荧光定量PCR法(qPCR)检测Snail mRNA在转录组水平上的表达,Snail mRNA在OSCC组织中的相对表达量较癌旁组织高。SNAIL mRNA的表达与患者年龄、民族、T分期及OSCC分化程度无关(P0.05),与淋巴结转移、吸烟、饮酒相关,转移组较非转移组升高(P0.05)。其中口腔鳞状细胞癌淋巴结转移组较无淋巴结转移组高,吸烟组表达量较不吸烟组高(0.693-4.901),饮酒组表达量较不饮酒组表达量高,其余各组间未见明显统计学差异。(3)、TIWST1蛋白在OSCC组织中主要表达于癌巢组织,胞膜深染,中央角化珠不着色,在癌旁正常组织中,主要表达于正常上皮基底层,往角化层方向逐渐变浅,总体染色较浅,OSCC组织的染色评分较癌旁正常组织高。结合临床病例信息,TIWST1蛋白的表达与患者民族、饮酒、性别、T分期、年龄及OSCC分化程度无关(P0.05),与淋巴结转移及吸烟情况相关(P0.05),实时荧光定量PCR法(qPCR)检测TWIST 1 mRNA在转录组水平上的表达,结合临床病例信息,TWIST 1 mRNA的表达与患者民族、饮酒、性别、T分期、年龄及OSCC分化程度无关(P0.05),与淋巴结转移及吸烟情况相关(P0.05),OSCC癌组织中的表达量较癌旁组织高。结论:(1)、CSPG4在OSCC中的大量表达,表明CSPG4与OSCC之间存在正性调控作用,为OSCC早期诊断、预后等提供了可能,甚至在OSCC的治疗中提供了一个靶向治疗策略。(2)、EMT相关因子SNAIL及TWIST 1在OSCC中高表达,提示EMT与OSCC之间的关系十分密切。(3)、SNAIL及TWIST 1均与OSCC淋巴结转移相关,提示SNAIL及TWIST1甚至是EMT对于OSCC的淋巴结转移起促进的正性调控作用。(4)SNAIL及TWIST 1均与OSCC患者吸烟习惯相关,提示吸烟可能成为EMT的诱因之一。(5)CSPG4作为EMT的上游调控蛋白之一,有可能成为抑制EMT及OSCC发展的重要因素。
【学位单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R739.8
【部分图文】：

G4 在口腔鳞癌组织（OSCC）和癌旁组织（HC）中的蛋Protein expression of CSPG4 in oral squamous cell s (HC)癌组织中主要表达于癌巢组织，癌细胞胞质，中央角化珠着色不明显。结合临床病理者年龄、民族、T 分期及 OSCC 分化程度结转移及临床分期相关，男性患者中表达较非转移组升高（P＜0.01），临床分期 III-男性患者组、转移组及 III-IV 期组阳性率、非转移组及 I-II 期组阳性率较低，染色SPG4 蛋白主要表达于正常上皮基底层，

男 47 8.772±1.064女 33 8.103±1.258汉族 45 7.507±1.361壮族 35 8.009±1.483T1-T2 64 8.119±1.271T3-T4 16 6.156±0.819移转移 27 8.317±1.244无转移 53 6.567±1.001I-II 期 30 8.112±1.635III-IV 期 50 8.610±1.218高分化 66 7.762±1.521中、低分化 14 7.559±0.890吸烟 26 7.903±1.483不吸烟 54 7.642±1.408喝酒 26 7.961±1.419不喝酒 54 7.614±1.432

因子 SNAIL、TWIST1 在 OSCC 中表达的初步研究 实时荧光定量 PCR 法（qPCR）检测 CSPG达 ， CSPG4 mRNA 在 OSCC 组 织 中02-10.804) ， CSPG4 mRNA 在 癌旁 组织00-1.006)，见表 2 及图 3-1-3.表 2 OSCC 与癌旁正常组织中 CSPG4 mRNA 相对表parison of relative expression of CSPG4 mRNA in OSCC and 组类型 例数 CSPG4 mRNA 相对表达量 SCC 组织 80 5.185(1.502-10.804)旁组织 80 1.001(1.000-1.006)

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 曹丽霞,马有志,杨俊英;应答非生物胁迫的植物转录因子[J];内蒙古农业科技;2005年05期

2 张维山,冷启新;转录因子假结合体的基因治疗作用[J];解剖科学进展;2003年01期

3 苏中启;分子生物学研究的新焦点：转录因子[J];世界科学;1995年08期

4 朱长保;徐辰峰;刘仁梅;林中正;成立瑞;;干旱胁迫下水稻转录因子表达变化[J];中国农学通报;2019年06期

5 周少燕;;转录因子网络与植物对环境胁迫的响应分析[J];南方农业;2016年12期

6 李洁;植物转录因子与基因调控[J];生物学通报;2004年03期

7 吴乃虎,刁丰秋;植物转录因子与发育调控[J];科学通报;1998年20期

8 王传琦;孔稳稳;李晶;;植物转录因子最新研究方法[J];生物技术通讯;2013年01期

9 周晓斌;杨丽霞;;锌指样转录因子2与动脉粥样硬化[J];心血管病学进展;2012年02期

10 李德,何国祥;血管平滑肌细胞增殖相关转录因子的研究进展[J];中国介入心脏病学杂志;2004年03期

相关会议论文 前10条

1 金肆;;基于ELISA技术的转录因子检测方法[A];新观点新学说学术沙龙文集23：新药发现——寻找维护人类健康的武器[C];2008年

2 卢志强;李根涛;张宥Pr;;基于转录因子的靶向基因组法在药物安全评价中的应用[A];中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛论文集[C];2015年

3 易可可;吴忠长;周洁;吴运荣;吴平;;植物耐低磷转录因子研究[A];中国植物生理学会全国学术年会暨成立40周年庆祝大会学术论文摘要汇编[C];2003年

4 朱红文;;转录因子FosB在尼古丁成瘾中的作用[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年

5 姜智;邹士涛;管思琪;吴士良;;转录因子c-jun对β3GnT8基因转录调控机制的初探[A];第七届全国医学生物化学与分子生物学和第四届全国临床应用生物化学与分子生物学联合学术研讨会暨医学生化分会会员代表大会论文集[C];2011年

6 魏海明;田志刚;;转录因子对Th1/Th2分化的调控作用[A];第七届全国肿瘤生物治疗学术会议论文集[C];2001年

7 赵存友;Jiyoung Park;Jae Bum Kim;唐宏;;一种新的抑制HIV转录因子的研究[A];首届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文摘要集[C];2002年

8 邓静;Phoebe Lu;Yuhong Zhang;Heather Harding;Donalyn Scheuner;Randy Kaufman;Nahum Sonenberg David Ron;;蛋白质转译水平的调控影响转录因子NF-kappaB基因表达能力[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年

9 应明;陈波;田毅浩;商璇;孙晋华;程汉华;周荣家;;人类雄性特异转录因子DMRT1入核机制的研究[A];湖北省遗传学会、江西省遗传学会2006年学术年会暨学术讨论会论文摘要集[C];2006年

10 刘树强;罗昊澍;崔胜;;LIM家族转录因子在垂体细胞系中的表达及相关功能的研究[A];全国动物生理生化第十次学术交流会论文摘要汇编[C];2008年

相关重要报纸文章 前6条

1 记者 张盖伦;植物应答干旱胁迫新路径揭示[N];科技日报;2017年

2 白毅;UXT蛋白可增强转录因子NF—κB活性[N];中国医药报;2007年

3 记者 宋喜群 通讯员 刘晓倩 张发起;发现调控杨树抗病性关键转录因子[N];光明日报;2015年

4 本报见习记者 卜叶 程唯珈;为什么植物越冬后才开花[N];中国科学报;2019年

5 仇逸;我国医学家发现胶质瘤中转录因子异常[N];大众科技报;2001年

6 本报驻加拿大记者 冯卫东;基因组中的“征服与被奴役”[N];科技日报;2015年

相关博士学位论文 前10条

1 段梅;脂锚定转录因子MfNACsa响应干旱胁迫的分子机制研究[D];中国农业大学;2016年

2 吴波;Desulfovibrio vulgaris Hildenborough的销酸盐适应机制及抗压全局转录因子功能研究[D];华中农业大学;2016年

3 潘阳露;番茄转录因子SlbZIP38响应干旱和高盐胁迫的功能研究[D];西南大学;2018年

4 赵盼盼;番茄R2R3MYB转录因子家族鉴定及SlMYB41和SlMYB64基因功能研究[D];山东农业大学;2017年

5 周泉;小鼠组织器官及NCI60癌症细胞系转录因子蛋白质组学研究[D];军事科学院;2018年

6 何莉;转录因子CTCF的功能研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年

7 王雪根;以转录因子为靶的抗肿瘤药物DECOY寡聚核苷酸研究[D];南京工业大学;2003年

8 张洪博;ERF转录因子TSRF1的功能分析[D];中国农业大学;2005年

9 于新凤;转录因子c-Jun/AP-1对食管鳞癌分化相关基因转录调控机理研究[D];中国协和医科大学;2006年

10 周洁;水稻低磷胁迫相关转录因子OsPHR1和OsPHR2的功能研究[D];浙江大学;2007年

相关硕士学位论文 前10条

1 夏世涛;大肠杆菌全局转录因子Cra对琥珀酸生物合成的调控机制研究[D];湖北工业大学;2015年

2 任旭洋;四个滨海耐盐油菜转录因子（BnNF-YA2/3/9/12）的耐逆功能分析[D];南京农业大学;2017年

3 王平;产酶溶杆菌OH11中转录因子LetR调控次生代谢产物HSAF合成的机制研究[D];南京农业大学;2017年

4 陈洪福;产酶溶杆菌中与全局性调控因子Clp蛋白互作的转录因子的鉴定与功能研究[D];南京农业大学;2017年

5 覃浩;CSPG4与EMT转录因子SNAIL、TWIST1在OSCC中的表达的初步研究[D];广西医科大学;2019年

6 尹晓月;发菜MAAs的结构及其合成调控的转录因子研究[D];华中师范大学;2016年

7 刘博欣;抗逆转录因子基因的克隆、功能分析及筛选[D];西北大学;2014年

8 赵恒伟;调控三七皂苷生物合成转录因子的克隆与功能研究[D];昆明理工大学;2014年

9 雒晓鹏;苦荞黄酮合成相关MYB转录因子的基因克隆及其功能鉴定[D];四川农业大学;2017年

10 叶淘智;水稻OsWRKY97转录因子的克隆与分析[D];四川农业大学;2017年

本文编号：2821853