体外不同动态张、压应力刺激调控人牙周膜成纤维细胞功能和结构的实验研究

发布时间：2020-09-30 00:25

　　牙齿受外力作用的大小对其本身及支持组织的健康至关重要，在临床修复和正畸加力过程中，恢复适当的咬合力和选择大小适宜的矫治力尤显重要。当牙齿受力时，外力通过牙周膜传递和分散至颌骨，从而引发牙周组织对外力作用的生理应答。牙周膜成纤维细胞是构成牙周膜的主体细胞，在牙周组织的改建过程中发挥极其重要的作用，研究应力对HPDLF功能和结构的影响及应力在HPDLF的信号转导途径具有重要意义。目的：本研究采用Forcel四点弯曲加力装置，构建人牙周膜成纤维细胞体外培养—力学刺激模型，对人牙周膜成纤维细胞施加不同动态张、压应力刺激，观察机械力刺激对Ⅰ型胶原、纤连蛋白和整合素β1mRNA及蛋白表达的影响以及细胞骨架的变化。探讨人牙周膜成纤维细胞在机械力作用下的生物学行为变化，为进一步阐明牙周膜在咬合力、矫治力作用下的适应性改建机理和机械力信号在细胞内的转导机制提供理论依据。方法：(1)采用刮取牙根中1／3牙周膜组织的取材方法，采用Ⅰ型胶原酶消化+组织块贴附法进行hPDLF原代培养，通过传代对细胞分离纯
【学位单位】：四川大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2006
【中图分类】：R78
【部分图文】：

四点弯曲,细胞变形,变形量,加力装置

3加力采用华西口腔医院正畸科与成都电子科技大学联合开发的Focrel四点弯曲加力装置(图2.1.1)，对接种了细胞的加力板加力，频率.0SHz，位移.05们n们n，加力板变形量1000ps恤ni(细胞变形量0.1%)，，位移In匡们n，加力板变形量2000pSartni(细胞变形量.02%)，位移2们n们n，加力板变形量4000“S如ni(细胞变形量.04%)

基线,交点,反应管,示意图

四川大学华西口腔医学院博士学位论文验分别采用55℃30see作为退火期。45次循环的扩增反应结束后，统将采集到的每一循环反应时的各反应管的荧光强度增长指(D助)进行分析，绘制每一反应管的扩增动力学曲线。根据动力线确定每个样品管中荧光强度增加到某一特定阐值(threshofd)扩增循环数(Ct值，图2.L2)，根据ct值与标准模板初始拷贝的值作图，得到该样品的标准曲线(图2，L3)。

电泳图,总RNA提取,电泳图

图2.1.4对照及加力组总RNA提取物电泳图规pRc结果图2.1.5所示为I型胶原3%琼脂糖凝胶电泳结果，p清晰亮度不同条带，说明引物设计合成无误，I型模板可用于定量反应。琼脂糖电泳图中我们可以看出目的基因在图中的亮，表明其含量在对照组和加力组中有差异，但是由于PCR反应平台期的问题，使常规PCR反应用以定量达量差异的方法准确性受到质疑。pCR结果

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