慢性牙周炎患者龈沟液和唾液中巨噬细胞移动抑制因子的表达分析

发布时间：2020-10-02 10:19

　　目的:牙周炎是口腔常见疾病之一。近年来研究显示牙周炎的进展与宿主的炎症反应关系紧密。巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)是一种炎症因子,研究报道它在关节炎、肾小球肾炎等慢性疾病中起到重要调控作用,但目前MIF在牙周炎中所起的作用尚不清楚。核因子κB受体活化因子配体(Receptor Activator for Nuclear Factor-κB Ligand,RANKL)属于肿瘤坏死因子配体家族,它与骨吸收密切相关。本研究通过对健康人以及重度慢性牙周炎患者牙周基础治疗前后唾液和龈沟液中MIF与RANKL水平进行检测,并分析其与牙周临床指标、龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)相对含量之间的相关关系,初步探讨MIF在牙周组织破坏发生过程中的表达及变化特点,为重度慢性牙周炎的临床诊断和治疗提供参考。研究方法:1、研究对象的选择选取2016年8月-2017年8月在中国医科大学附属口腔医院牙周科就诊的23名重度慢性牙周炎患者为病例组,20名牙周健康者为对照组。所有研究对象均满足:无全身系统性疾病,妇女非妊娠期,3个月内未服用抗生素,近半年内无牙周治疗史,不吸烟,无正畸史。所有对象签署知情同意,并通过中国医科大学附属口腔医院伦理委员会伦理审查(2015-12)。2、受试牙的选择根据社区牙周指数(community periodontal index,CPI)选取6颗指数牙,其应满足牙体完整,无根尖周病、修复体和拔牙指征,如指数牙不符合以上条件,则选取该区段临近牙取样。3、牙周检查指标对所有重度慢性牙周炎患者进行牙周基础治疗,并分为治疗前组和治疗后组。所有重度慢性牙周炎患者的口腔检查均由同一名医生进行,经一致性检验,Kappa值0.75。包括探诊深度(probing depth,PD)、附着丧失(attachment loss,AL)、出血指数(bleeding index,BI)。4、龈沟液、唾液标本采集、分析吸潮纸尖收集研究对象6颗指数牙龈沟液后,装入有200ul PBS缓冲液的EP管中,放置于摇床上1h后取出吸潮纸尖,低温高速离心后置于-80℃冻存;收集研究对象非刺激性全唾液标本于5 ml EP管中。应用酶联免疫吸附反应法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测MIF和RANKL浓度。5、龈下菌斑中P.gingivalis的检测分别采集健康对照组和牙周炎组在基线以及牙周基础治疗后1个月时6颗指数牙的龈下菌斑。提取龈下菌斑DNA进行Real-time PCR检测P.gingivalis占总菌比例情况。6、统计分析SPSS 24对所得数据进行统计分析。计量资料采用均值±标准差表示,t检验比较组间差异;数据不符合正态分布时,采用中位数和四分位间距表示,非参数检验及Spearman进行相关性分析。结果:1.所有研究对象的龈沟液和唾液样本中都检测出MIF的表达,但92%的唾液样本和90%的龈沟液样本为RANKL检出阴性。2.重度慢性牙周炎组治疗前龈沟液MIF水平[166.93(187.30)ng/ml]和唾液中MIF水平[112.51(188.72)ng/ml]明显高于健康对照组[分别为23.05(36.78)ng/ml、24.92(25.82)ng/ml],且差别具有统计学意义(P0.05)。3.牙周基础治疗后,重度慢性牙周炎患者临床指标PD、AL、BI明显下降((35)PD=㧟1.32;(35)AL=㧟0.95;(35)BI=㧟2.17),差异有统计学意义(P0.05)。4、重度慢性牙周炎患者治疗前龈下菌斑中P.gingivalis占总菌的百分比[0.491(3.551)]高于健康对照组[0.001(0.020)],差异有统计学意义(P0.05),经基础治疗后,P.gingivalis占总菌百分比明显下降((35)P.gingivalis%=0.490)且有统计学意义(P0.05)。5、重度慢性牙周炎患者龈沟液和唾液中MIF水平在基础治疗后显著下降((35)MIF分别为81.91ng/ml和60.85ng/ml),与治疗前相比差别具有统计学意义(P0.05);治疗后龈沟液和唾液中MIF水平仍高于健康组,其差异有统计学意义(P0.05)。6.重度慢性牙周炎患者治疗前龈沟液中MIF水平与PD呈正相关关系(r=0.486,P=0.019),治疗前龈沟液和唾液中MIF水平、治疗后龈沟液和唾液中MIF水平具有相关性(r=0.700,P0.01;r=0.791,P0.01)。结论:重度慢性牙周炎患者龈沟液和唾液中MIF水平明显高于牙周健康者,经牙周基础治疗后其浓度显著下降,而且龈沟液中MIF水平与牙周炎的炎症指标PD直接相关,提示MIF作为一种炎症因子参与重度慢性牙周炎的发展进程,其表达水平可作为炎症指标辅助慢性牙周炎活动性及炎症程度的判断。
【学位单位】：中国医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R781.42
【部分图文】：

龈沟液,统计学意义,研究对象,浓度

位数间距为 187.30（ng/ml）；健康对照ng/ml），四分位数间距为 36.78（ng/m 85.02（ng/ml），四分位数间距为 146. 含量高于健康组和治疗后组（P＜0.05），差异有统计学意义，如表 5 所示。表 5 研究对象龈沟液中 MIF 浓度分组 MIF（ng/Median (康对照组 23.05（36炎治疗前 166.93（187炎治疗后 85.02（146组比较，具有统计学差异，P<0.05较，具有统计学差异，P<0.05

唾液,统计学意义,研究对象,浓度

4.92（ng/ml）,四分位数间距为 25.82（为 51.66（ng/ml）,四分位数间距为 71.于健康对照组和治疗后组（P＜0.05），，差异均有统计学意义，如表 6 所示。表 6 研究对象唾液中 MIF 浓度分组 MIF（ng/median(Q康对照组 24.92（25周炎治疗前 112.51（188周炎治疗后 51.66（71.3组比较，具有统计学差异，P<0.05较，具有统计学差异，P<0.05

散点图,龈沟液,相关性分析,统计学意义

中国医科大学硕士学位论文表 7 治疗前 MIF 浓度与临床指标相关性分析PD AL BI P.gingiva0.486* 0.366 0.388 -0.2130.354 0.281 0.355 -0.262统计学意义（P＜.0.05）有统计学意义（P＜0.01.）

【参考文献】